專利名稱：一種水稻葉形控制基因srnl1及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物基因工程領(lǐng)域。具體地說，本發(fā)明涉及一種利用圖位克隆技術(shù)克隆水稻SRNLl (Semi-Rolled and Narrow Leaf 1)基因，通過構(gòu)建互補(bǔ)載體借助轉(zhuǎn)基因技術(shù) 鑒定該基因的功能；同時(shí)還涉及利用該基因調(diào)控葉片維管束數(shù)目的變化和泡狀細(xì)胞的形態(tài) 改變，從而調(diào)節(jié)水稻葉片寬度和卷曲度，用以獲得農(nóng)作物的理想株型，改善葉片光合效率， 提高農(nóng)作物的產(chǎn)量。
背景技術(shù)：
水稻作為單子葉植物的模式植物，具有單子葉植物葉的典型特點(diǎn)。水稻葉由葉片 和葉鞘組成，葉片可分為表皮層，葉肉層和維管層三個(gè)組成部分。葉片的發(fā)育作為植物形態(tài) 建成的一個(gè)重要方面，是一個(gè)非常復(fù)雜的過程，包括了細(xì)胞分裂和延伸、極性決定、組織分 化等諸多方面。在維管層中包括靠近遠(yuǎn)軸面的韌皮部、靠近近軸面的木質(zhì)部、外周的維管束 鞘薄壁細(xì)胞以及將維管束和表皮緊密相連的厚壁纖維細(xì)胞；其是植物進(jìn)行光合作用和呼吸 作用的主要器官，其光合效率的高低直接影響其生長(zhǎng)發(fā)育及糧食產(chǎn)量的高低。水稻是世界上最重要的糧食作物之一，葉片形態(tài)的研究一直備受關(guān)注。葉片對(duì)植 物的生命活動(dòng)起著重要的作用，關(guān)系到植物株型和農(nóng)業(yè)產(chǎn)量的形成，所以葉片性狀是超高 產(chǎn)育種的一項(xiàng)重要形態(tài)指標(biāo)。對(duì)其形態(tài)的遺傳機(jī)理及葉形態(tài)建成的分子機(jī)理進(jìn)行研究，不 僅能使我們更多地了解水稻的葉發(fā)育機(jī)制，而且能幫助我們通過分子設(shè)計(jì)改良株型。目前，國(guó)內(nèi)外科學(xué)家們已經(jīng)對(duì)水稻葉片的性狀進(jìn)行了大量研究，但在遺傳控制及 分子水平機(jī)制的研究相對(duì)較少，尤其對(duì)葉片形態(tài)建成的分子機(jī)理研究還很不充分?，F(xiàn)已研 究表明水稻中存在多對(duì)控制水稻葉片形狀的基因，卷葉性狀通常由1對(duì)或幾對(duì)基因控制。 雖然迄今為止已報(bào)道的水稻卷葉主基因多達(dá)12個(gè)，但其中3個(gè)基因被精細(xì)定位，而真正克 隆到的卷葉調(diào)控相關(guān)的基因僅有2個(gè)。近年來，植物的葉形態(tài)建成分子機(jī)理研究取得了重大進(jìn)展，許多葉發(fā)育相關(guān)的關(guān) 鍵基因、小分子RNA和生長(zhǎng)素等調(diào)控因子被研究揭示出來，它們之間復(fù)雜的相互作用也得 到了初步解析。調(diào)控葉原基及軸性發(fā)育因子間的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路沒有一種是專有的，相互通 路之間互相影響又緊密聯(lián)系，共同調(diào)控葉的發(fā)育。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種從水稻半卷窄葉突變體中克隆的新基因 SRNL1，該基因編碼一種BELl同源的表達(dá)蛋白，主要通過控制水稻葉片中維管束的數(shù)目及 泡狀細(xì)胞的形態(tài)來控制葉片的寬度和卷曲度。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種水稻葉形控制基因SRNLl編碼的蛋白 質(zhì)，該蛋白質(zhì)為SEQ ID NO :2所示的氨基酸序列。作為本發(fā)明的水稻葉形態(tài)建成控制基因SRNLl編碼的蛋白質(zhì)的改進(jìn)氨基酸序列 還包括在SEQ ID NO :2所示的氨基酸序列中添加、取代、插入或缺失一個(gè)或多個(gè)氨基酸或其他物種的同源序列而生成的氨基酸序列或衍生物。本發(fā)明還提供了編碼上述蛋白質(zhì)的基因，該基因?yàn)镾EQ ID NO 1所示的核苷酸序 列。作為本發(fā)明的基因的 改進(jìn)核苷酸序列還包括在SEQ ID NO 1所示的核苷酸序列 中添加、取代，插入或缺失一個(gè)或多個(gè)核苷酸而生成的突變體、等位基因或衍生物。本發(fā)明還提供了含有上述基因的質(zhì)粒。本發(fā)明還提供了含有上述基因的植物表達(dá)載體。本發(fā)明還提供了一種宿主細(xì)胞，該宿主細(xì)胞含有上述基因序列。作為本發(fā)明的宿主細(xì)胞的改進(jìn)該細(xì)胞為大腸桿菌細(xì)胞、農(nóng)桿菌細(xì)胞或植物細(xì)胞。本發(fā)明還提供了一種培育植物葉片卷曲的方法，包括用上述植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化植 物細(xì)胞，再將轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞培育成植株。作為本發(fā)明的培育方法的改進(jìn)轉(zhuǎn)化采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法或基因槍法。具體的說本發(fā)明所提供的從水稻卷葉突變體中克隆的新基因SRNL1，具有SEQ ID NO :1所示的DNA序列。也包括在取代一個(gè)核苷酸而產(chǎn)生的突變體等位基因，還含具有相同 功能并能達(dá)到本發(fā)明目的的基因序列。本發(fā)明中SEQ ID NO :2所示的蛋白質(zhì)屬於BELl同源蛋白家族，其中進(jìn)行一個(gè)或幾 個(gè)氨基酸的替換、插入或缺失氨基酸所獲得的功能類似物。本發(fā)明所提供的含有SEQ ID NO 1所示序列的基因或部分基因片段的載體，如圖 4所示，該載體可以表達(dá)由上述核酸序列編碼的多肽或同源類似物。本發(fā)明所提供的植物葉片卷曲的培育方法，是一種用SRNLl進(jìn)行高效植物遺傳轉(zhuǎn) 化的方法；具體地說，是利用植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞以影響農(nóng)作物葉片形態(tài)方法。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的具體技術(shù)步驟如下一、水稻卷葉突變體srnl-Ι的分離和遺傳分析本發(fā)明所采用的水稻葉片半卷曲窄葉突變體是將粳稻品種“日本晴”(japonica) 經(jīng)濃度的化學(xué)誘變劑(ethyl methane sulphonate, EMS)處理后，再通過大量篩選而得 到的表型穩(wěn)定的突變體srnl-Ι。該突變體除了葉片變窄且表現(xiàn)出向上卷曲外，其它表型均 與野生型相似，如圖1所示。經(jīng)雜交實(shí)驗(yàn)、遺傳分析表明，我們所得到的是一個(gè)符合單基因 控制遺傳規(guī)律的隱性突變體。二、圖位克隆控制水稻葉形的SRNLl基因1、SRNLl基因的初步定位為了分離SRNLl基因，本發(fā)明首先建立了一個(gè)大的多態(tài)性高的定位群體，由 srnl-Ι與秈稻品種臺(tái)中本地1號(hào)(Tm)雜交而形成的F2群體，再通過圖位克隆的方法，并 利用STS、SSR等分子標(biāo)記對(duì)SRNLl位點(diǎn)進(jìn)行初步定位，將其初步定位在第3染色體上，并介 于RM7000(為公知內(nèi)容)和V128. 3-1兩標(biāo)記之間，見圖2。2、SRNLl基因的精細(xì)定位通過對(duì)BAC克隆0SJNBa0079G12的序列分析，發(fā)展了 3個(gè)新的SSR標(biāo)記和9 個(gè) STS 標(biāo)記(表 1)，將 SRNLl 精確定位于 STS 標(biāo)記 V135. 1-2 (F :GACCTGTACGGGCGGTTC ； R:CACTGTAGTCTCGCAAGGAGAA)禾P Vsl35. 1-2 (F ATTAGCAGCATGGATGGATAGG ；R GCCCTTTGAAGACAACACTAGG)之間，28kb的范圍之內(nèi)。通過測(cè)序分析此區(qū)段的開放閱讀框(ORF)，將 SRNLl 基因確定于 BAC 克隆 0SJNBa0079G12 的 54863-59968 的位置(圖 3)。3、SRNLl基因的鑒定和功能分析 利用pCAMBIA1300質(zhì)粒構(gòu)建互補(bǔ)載體(圖4)，通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，進(jìn)行功能互補(bǔ)的轉(zhuǎn) 基因研究，結(jié)果表明本發(fā)明獲得了使突變體恢復(fù)正常功能的轉(zhuǎn)基因水稻(圖5)，證明了本 發(fā)明正確克隆了 SRNLl基因，明確SRNLl基因的DNA序列(SEQ ID NO 1所示)和cDNA序 列(SEQ ID NO 3所示)，氨基酸序列分析表明SRNLl基因編碼一種BELl同源的表達(dá)蛋白 (SEQ ID NO 2 所示)。在水稻中，SRNLl基因功能的喪失造成葉片維管束數(shù)目的減少和泡狀細(xì)胞形態(tài)的 改變，導(dǎo)致葉片寬度減少，同時(shí)使葉片向近軸面的卷曲。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)表明，SRNLl基因編 碼一種BELl同源的表達(dá)蛋白，主要通過調(diào)控維管束數(shù)目的下降，使葉片寬度變窄；同時(shí)通 過改變泡狀細(xì)胞的形態(tài)來控制葉形的卷曲程度。該基因在了解葉片泡狀細(xì)胞、維管組織和 厚壁纖維組織的分化發(fā)育，以及單子葉植物葉片極性建成等方面具有重要的理論價(jià)值。綜上所述，本發(fā)明利用水稻葉形突變體——半卷窄葉突變體(Semi-rolled and narrowleaf 1) srnll，通過圖位克隆技術(shù)克隆到了 SRNLl基因，該基因編碼一種BELl同源 的表達(dá)蛋白，并以此控制水稻葉片中維管束的數(shù)目及泡狀細(xì)胞的形態(tài)，從而控制葉片的寬 度及卷曲度。我國(guó)是水稻生產(chǎn)和消費(fèi)大國(guó)，隨著人口的增長(zhǎng)和人均耕地面積的減少，對(duì)水 稻需求將呈上升趨勢(shì)。高產(chǎn)和超高產(chǎn)是作物育種永恒的主題，是確保我國(guó)糧食安全和農(nóng)業(yè) 可持續(xù)發(fā)展最有效的保障。現(xiàn)代高產(chǎn)或超高產(chǎn)育種理論都提出了卷葉性狀的利用問題，而 且，目前生產(chǎn)上育成推廣的許多高產(chǎn)品種已經(jīng)利用了該性狀，說明卷葉性狀確有育種利用 價(jià)值。開展水稻卷葉基因的克隆研究無論在發(fā)育生物學(xué)還是在理想株型育種的分子設(shè)計(jì)上 都具有重要的意義。SRNLl基因的克隆和應(yīng)用，對(duì)超級(jí)水稻理想株形的分子設(shè)計(jì)育種奠定了 分子理論基礎(chǔ)和提供了可直接利用的有利基因資源。無論是對(duì)稻作科學(xué)的發(fā)展，實(shí)現(xiàn)我國(guó) 水稻單產(chǎn)的第三次突破，還是對(duì)解決新世紀(jì)我國(guó)糧食安全問題，都具有重大意義。


下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式
作進(jìn)一步詳細(xì)說明。圖1是水稻日本晴野生型與卷葉突變體srnll的表型圖，注圖1中的“WT”代表野生型品種，“srnll”代表半卷窄葉突變體；圖2是SRNLl在水稻第3染色體上的初步定位圖；圖3是SRNLl基因的精細(xì)定位圖；圖4是互補(bǔ)載體構(gòu)建質(zhì)粒圖譜；圖5是功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)Tl代轉(zhuǎn)基因水稻的表型圖，注圖5中的“8 111”代表半卷窄葉突變體，“811111/58見1”代表轉(zhuǎn)SRNLl基因TO 代突變體植株。
具體實(shí)施例方式
參照上述附圖，對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式
進(jìn)行詳細(xì)說明。實(shí)施例1 1、水稻材料
H 明 Miffi 白勺ΤΚ禾g (Oryza sativa L. )(Semi-rolled and narrow leafl)(srnll)是由中國(guó)水稻研究所國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室種質(zhì)創(chuàng)新組將常規(guī)粳稻品種“日本晴” 種子(japonica)經(jīng)濃度的化學(xué)誘變劑(ethyl methane sulphonate, EMS)處理后，再 通過大量篩選而得到的表型穩(wěn)定的半卷窄葉突變體srnl-1，原始野生型材料為“日本晴”粳 稻品種。2、分析和定位群體純合的srnll突變體和葉片平展的常規(guī)秈稻品種臺(tái)中本地1號(hào)(Tm)進(jìn)行雜交， Fl代自交，得到F2群體，并從中選出1451個(gè)srnll突變個(gè)體(其葉片為半卷窄葉)作為定 位群體。在分蘗初期每株取0. 5克左右的嫩葉，用來提取總DNA。3、SSR和STS標(biāo)記定位SRNLl基因采用水稻微量DNA的快速提取方法從水稻葉片中提取用于基因定位的基因組 DNA0取大約100 mg水稻葉片，經(jīng)液氮冷凍，在直徑5cm的小研缽中磨成粉狀，轉(zhuǎn)移到1. 5ml 離心管里提取DNA，獲得的DNA沉淀溶解于100 μ 1超純水中。每一 PCR反應(yīng)用2 μ 1 DNA樣
品 O在SRNLl基因的初步定位階段，對(duì)由F2中篩選出的242個(gè)半卷窄葉突變個(gè)體 進(jìn)行分子標(biāo)記連鎖分析，根據(jù)公布的粳稻和秈稻創(chuàng)建的分子遺傳圖譜，選取近似均勻分 布于各條染色體上的SSR引物和STS引物，根據(jù)常規(guī)的PCR擴(kuò)增方法，具體步驟為PCR 儀是MJResearch的PTC-200型梯度熱循環(huán)儀。PCR擴(kuò)增反應(yīng)總體積為20 μ 1，其中包括 2ul (IOX)PCR 緩沖液(TAKALA 公司購(gòu)買)，1.5ul 200 μ mol · ΓΜΝΤΡ，2ul (50_100ng)的基 因組DNA，0. 25ul (1個(gè)單位)的Taq聚合酶(TAKALA公司購(gòu)買)和3ul (0. 1 μ mol · Γ1)引 物(上海生工合成)，14. 25ul去離子水。PCR程序?yàn)?4°C預(yù)變性5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增94°C 變性lmin，各引物退火溫度見表1，退火時(shí)間lmin，72°C延伸lmin，循環(huán)40次；72°C延伸 IOmin0經(jīng)5%瓊脂糖凝膠電泳分離和溴化乙啶(ER)染色，檢測(cè)PCR產(chǎn)物的多態(tài)性。根據(jù)各 標(biāo)記與目標(biāo)基因的交換值大小，將SRNLl初步定位在第3號(hào)染色體長(zhǎng)臂RM7000和V128. 9-1 標(biāo)記間。4、SRNLl基因的精細(xì)定位在精細(xì)定位SRNLl基因時(shí)，通過對(duì)BAC克隆0SJNBa0079G12的序列分析， 在RM7000和V128. 9-1兩標(biāo)記間發(fā)展了 3個(gè)新的SSR標(biāo)記和9個(gè)STS標(biāo)記(如 表1所示)利用常規(guī)的染色體步移法進(jìn)行精細(xì)定位。所有外圍交換單株在STS標(biāo) 記 V135. 1-1 (F :AGCCGAGGGGAATATATCTAGG ；R :ATAATTGCGCACAAAACACACT)處則出現(xiàn) 共分離，于是我們將SRNLl精確定位于STS標(biāo)記V135. 1-2 (F :GACCTGTACGGGCGGTTC ； R:CACTGTAGTCTCGCAAGGAGAA)禾P Vsl35. 1-2 (F ATTAGCAGCATGGATGGATAGG ；R GCCCTTTGAAGACAACACTAGG)之間，28kb的范圍之內(nèi)。通過測(cè)序分析此區(qū)段的開放閱讀框 (ORF)，將 SRNLl 基因確定于 BAC 克隆 0SJNBa0079G12 的 54863-59968 的位置。表1、新發(fā)展的具有多態(tài)的SSR標(biāo)記和STS標(biāo)記片段 引物名稱 大小 前引物(5’ -3’ ) Reverse (5’ -3’ ) 退火溫度 __(bp)____ 注V-為STS標(biāo)記；VS-為SSR標(biāo)記。根據(jù)BAC克隆0SJNBa0079G12序列，設(shè)計(jì)測(cè)序引物，采用PCR方法分別從srnll和 野生型日本晴的基因組中分段擴(kuò)增出這28kb，進(jìn)行全測(cè)序分析。發(fā)現(xiàn)突變體SRNLl擴(kuò)增的 產(chǎn)物比野生型日本晴有一個(gè)堿基的替換(C到T)。在根據(jù)cDNA水平檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該突變事件 發(fā)生基因的第一個(gè)開放閱讀框(ORF)內(nèi)，使編碼谷氨酰胺氨基酸(Gln)密碼子CAG突變成 了終止子TAG，從而導(dǎo)致基因編碼蛋白氨基酸序列提前終止。根據(jù)BAC克隆0SJNBa0079G12 序列的基因注釋信息(TIGR)，該基因編碼一個(gè)編碼一種BELl同源的表達(dá)蛋白。通過測(cè)序分 析此區(qū)段的開放閱讀框(ORF)推測(cè)候選基因，將SRNLl基因定位于BAC克隆0SJNBa0079G12 的54863-59968的位置。該基因共包含3個(gè)外顯子(Exon)和2個(gè)內(nèi)含子(Intron)。5、SRNLl cDNA全長(zhǎng)基因的獲得與功能的預(yù)測(cè)在分蘗盛期取野生型日本晴品種的葉片，采用Trizol方法提取mRNA ；通過RT-PCR 技術(shù)反轉(zhuǎn)錄獲得全基因組cDNA，RT-PCR反應(yīng)體系(20 μ 1)包括(RNaSe free)專用水 9μ 1 ；5XRTbuffer4y 1 ； dNTPs (IOmM) 2 μ 1 ； RNase inhibitor (IOU/μ 1) 1 μ 1 ；OligdT 1 μ 1 ;Ε (AMV) 1 μ 1 禾口 RNA 2 μ 1。RT-PCR 運(yùn)行程序30 "C IOmin ；42 "C 20_40min ；95 "C 5min ；0-5°C 5min。程序結(jié)束后進(jìn)行瞬時(shí)離心，反轉(zhuǎn)錄好的cDNA在_20°C貯藏備用。通過設(shè)計(jì)測(cè)定SRNLl基因全長(zhǎng)cDNA弓丨物(F :GCCGGCATGGGAATAGCG ；R CGCCAACAGTGCGGTATCTATAG)。用該引物PCR擴(kuò)增反轉(zhuǎn)錄好的cDNA，獲得的目標(biāo)片段經(jīng)測(cè)序 后明確SRNLl基因的cDNA全長(zhǎng)序列(SEQ ID NO :3所示)。在上述研究的基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)了基 因發(fā)生突變的位置，并預(yù)測(cè)該基因編碼一個(gè)編碼一種BELl同源的表達(dá)蛋白(SEQ ID NO 2 所示)，主要通過調(diào)控維管束數(shù)目的下降，使葉片寬度變窄；同時(shí)通過改變泡狀細(xì)胞的形態(tài) 來控制葉形的卷曲程度。實(shí)施例2 植物轉(zhuǎn)化載體pCAMBIA1300的改造和質(zhì)粒轉(zhuǎn)化設(shè)計(jì)1對(duì)將Swa I酶切位點(diǎn)引入pCAMBIA1300載體的引物Vsrnl_1300 (F
GC :|ggatcc| ttaattaagccgtcgctg ；r =GC |aagctt| atttaaatccgacgaggg),其中前引物中含有BamH I酶切位點(diǎn)序列(GGATCC)，后引物中含有Hind III (AAGCTT)和Swa I(ATTTAAA)酶切位點(diǎn)序列；用該合成的Vsrnl-1300引物PCR擴(kuò)增日本晴基因組DNA，獲得不含pCAMBIA1300 多克隆位點(diǎn)上所有酶切位點(diǎn)序列421bp片段(SEQ ID NO :4)，將該擴(kuò)增片段電泳分離、回收 純化后用BamH I和Hind III兩種內(nèi)切酶進(jìn)行雙酶切，并回收411bp的目標(biāo)片段(SEQ ID NO :5)。將該片段與同樣用BamH I和Hind III兩種內(nèi)切酶雙酶切后的pCAMBIA1300載體 連接，這樣在PCAMBIA1300載體的多克隆位點(diǎn)BamH I與Hind III之間就引入了 Swa I酶 切位點(diǎn)。然后將BAC克隆0SJNBa0079G12用BamH I和Swa I進(jìn)行完全酶切，將電泳分離后 割取8. 371KB的DNA片段(SEQ ID NO 6)連接至Ij pCAMBIA1300多克隆位點(diǎn)中的BamHI禾口 Swa I切點(diǎn)上，該DNA片段覆蓋了整個(gè)ORF的基因組區(qū)域(SEQ ID NO 1)，還包括ATG上游 2. 310Kb啟動(dòng)子序列和終止子TAG后的0. 955Kb的3，端非翻譯區(qū)序列。這個(gè)質(zhì)粒通過電擊的方法轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)株系 EHA105中轉(zhuǎn)化水稻。我們利用突變體幼胚誘導(dǎo)的愈傷組織，經(jīng)過誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)3周后，挑 選生長(zhǎng)旺盛愈傷用作轉(zhuǎn)化的受體。用含有雙元質(zhì)粒載體的EHA105菌株侵染水稻愈傷，在黑 暗、25°C條件下共培養(yǎng)3天后，在含有40mg/LHygromyCin的篩選培養(yǎng)基上培養(yǎng)。篩選抗性 愈傷在含有50mg/L預(yù)分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)10天左右。將預(yù)分化的愈傷轉(zhuǎn)至分化培養(yǎng)基上在 光照條件下培養(yǎng)。一個(gè)月左右得到抗性轉(zhuǎn)基因植株。對(duì)植株進(jìn)行鑒定和連續(xù)的觀察，于同 一生長(zhǎng)階段的突變體比較，發(fā)現(xiàn)植株葉片寬度恢復(fù)了正常，葉片平展不再卷曲(圖5)。說明 SRNLl基因具有使突變體葉片表型恢復(fù)正常的功能。最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個(gè)具體實(shí)施例。顯然，本發(fā) 明不限于以上實(shí)施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容 直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
一種水稻葉形控制基因SRNL1編碼的蛋白質(zhì)，其特征在于該蛋白質(zhì)為SEQ ID NO2所示的氨基酸序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水稻葉形控制基因SRNL1編碼的蛋白質(zhì)，其特征在于所述 氨基酸序列還包括在SEQ ID NO :2所示的氨基酸序列中添加、取代、插入或缺失一個(gè)或多個(gè) 氨基酸或其他物種的同源序列而生成的氨基酸序列或衍生物。
3.一種編碼權(quán)利要求1或2所述蛋白質(zhì)的基因，其特征在于該基因?yàn)镾EQ ID N0:1 所示的核苷酸序列。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基因，其特征在于所述核苷酸序列還包括在SEQID N0:1 所示的核苷酸序列中添加、取代，插入或缺失一個(gè)或多個(gè)核苷酸而 生成的突變體、等位基因 或衍生物。
5.一種含有權(quán)利要求3或4所述基因的質(zhì)粒。
6.一種含有權(quán)利要求3或4所述基因的植物表達(dá)載體。
7.一種宿主細(xì)胞，其特征在于該宿主細(xì)胞含有權(quán)利要求3或4所述的基因序列。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的宿主細(xì)胞，其特征在于該細(xì)胞為大腸桿菌細(xì)胞、農(nóng)桿菌細(xì)胞 或植物細(xì)胞。
9.一種培育植物葉片卷曲的方法，其特征在于包括用權(quán)利要求6所述的植物表達(dá)載 體轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞，再將轉(zhuǎn)化后的植物細(xì)胞培育成植株。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的培育植物葉片卷曲的方法，其特征在于所述轉(zhuǎn)化為農(nóng)桿菌 介導(dǎo)法或基因槍法；所述植物為水稻。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種水稻葉形控制基因SRNL1編碼的蛋白質(zhì)，其具有SEQ ID NO2所示的氨基酸序列。本發(fā)明還同時(shí)公開了編碼上述蛋白質(zhì)的基因，其具有SEQ ID NO1所示的核苷酸序列。本發(fā)明的基因能用于培育葉片卷曲的水稻。
文檔編號(hào)C12N15/29GK101857633SQ20091025879
公開日2010年10月13日 申請(qǐng)日期2009年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月18日
發(fā)明者張光恒, 曾大力, 朱麗, 胡江, 董國(guó)軍, 郭龍彪, 錢前, 顏美仙, 高振宇 申請(qǐng)人:中國(guó)水稻研究所