專利名稱：中和抗生素營養(yǎng)血液培養(yǎng)基的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種中和抗生素營養(yǎng)血液培養(yǎng)基，其主要成分是牛肉膏、蛋白胨、 氯化鈉、瓊脂粉、硫酸鎂、對氨苯甲酸、土溫-80、無菌脫纖維O型人血(或無菌脫纖維羊血 或兔血)、小牛血清經(jīng)一定的工藝制成。用以供一般標本和已使用過抗生素及磺胺藥的病人標 本分離培養(yǎng)用。利用培養(yǎng)試驗鑒別細菌的種類，其關鍵在于準確、快速、簡便。而細菌接種 分離培養(yǎng)好壞，會直接影響檢測結果。往往需要將樣本通過不同方法進行分離培養(yǎng)，來進行 細菌種類的鑒別，這是目前微生物實驗室最常用的手段。由于目前培養(yǎng)條件的應用范圍所限， 供一般標本的分離培養(yǎng)用的培養(yǎng)基沒有特效的，存在所分離培養(yǎng)基營養(yǎng)不足、培養(yǎng)時間長、 易出現(xiàn)假陽性或假陰性等問題。隨著生物研究的進展，國內(nèi)外對細菌鑒別的增菌培養(yǎng)基研究 也在不斷的發(fā)展中。生物工作者一直希望能有一種能克服上述不足的分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基一一 中和抗生素營養(yǎng)血液培養(yǎng)基。
背景技術：
本發(fā)明的目的在于提供一種能克服己有鑒別培養(yǎng)基不足的中和抗生素營養(yǎng)血液 培養(yǎng)基。與其它同類培養(yǎng)基相比具備下列特點所需接種量小，少量細菌即可迅速繁殖，在 通常室溫下或37"C培養(yǎng)5-6小時即可觀察結果；不易出現(xiàn)假陽性和假陰性；能破壞標本中存 在的抑菌物質，使細菌生長不受抑制
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的要點在于選擇合適的組分，并進行合理混配，經(jīng)加溫、溶解、混合、 冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成一種中和抗生素營養(yǎng)血液培養(yǎng)基。
本發(fā)明選擇的配方如下(組分及其重量百分比％):牛肉膏(O. 3-0. 5)、蛋白胨(l. 0-1. 5)、 氯化鈉(0. 4-0. 6)、瓊脂粉(2.1-2.3)、 土溫-80 (0. 3-0. 5) 、 49. 3%硫酸鎂6-8ml、 0. 5%對氨 苯甲酸6-8ml、無菌脫纖維0型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血)6-8ml、小牛血清6-8ml、蒸 餾水加至100ml。
本培養(yǎng)基含有豐富的營養(yǎng)成分，如牛肉膏、蛋白胨、小牛血清、血液是培養(yǎng)基中的營養(yǎng) 和支持成分，對觀察鏈球菌，葡萄球菌的溶血比較滿意；分離腦膜炎球菌及嗜血桿菌屬好。氯 化鈉用于調(diào)整滲透壓；磷酸二氫鉀用于調(diào)節(jié)pH。。標本接種后即計算時間，在通常室溫下或 37t:培養(yǎng)，培養(yǎng)12小時后，即用劃線法移種到選擇性培養(yǎng)基上以分離致病菌。加入血液時溫 度必須適宜，否則不利于與瓊脂混勻及觀察溶血情況。
本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法是
1) 、將牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉、硫酸鎂、對氨苯甲酸、土溫-80、蒸餾水置于三角
燒瓶內(nèi)，混合并使液體浸濕瓊脂粉；
2) 、加熱溶解，趁熱矯正pH至7.4，以絨布過濾，分裝于試管或燒瓶內(nèi)，后置于壓力蒸氣滅菌器
內(nèi)，以1. 05kg30分鐘；
3) 、取出后冷至5(TC左右，以無菌手續(xù)加入無菌脫纖維O型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血)
和小牛血清，輕輕搖勻，傾注平板.凝固后，抽樣于37。C培養(yǎng)18 24小時，如無細菌生 長，冷藏備用。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(1)所需接種量小，培養(yǎng)時間短，少量細菌即可迅速繁殖，在通
3常室溫下或37'C培養(yǎng)8-12小時即可觀察結果；(2)不易出現(xiàn)假陽性或假陰性；(3)能破壞病 人標本中存在的抗生素及磺胺藥的抑菌作用。
具體實施方式
下面結合實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明-按照下表所列數(shù)據(jù)(重量百分比％)及其所述步驟進行配置
配方一
牛肉膏 0.3-0.5
蛋白胨 1.0-1.5
氯化鈉 0. 4-0. 6
瓊脂粉 2. 1-2. 3
土溫-80 0. 3-0. 5
硫酸鎂(49. 3%) 6-8ml
對氨苯甲酸(0.5%) 6-8ml
無菌脫纖維0型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血) 6-8ml
小牛血清 6-8ml
蒸餾水 加至100ml
配方二
牛肉膏 0.3-0.4
蛋白胨 1.0-1.4
氯化鈉 0. 4-0. 5
瓊脂粉 2. 1-2. 2
土溫-80 0. 3-0. 5
硫酸鎂(49. 3%) 6-7ml
對氨苯甲酸(0.5%) 6-7ml
無菌脫纖維0型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血) 6-7ml
小牛血清 6-7ml
蒸餾水 加至訓ml
配方三
牛肉膏 0.4-0.5
蛋白胨 1.2-1.5
氯化鈉 0. 5-0. 6
瓊脂粉 2. 2-2. 3
土溫-80 0. 3-0. 5
硫酸鎂(49.3%) 7-8ml
對氨苯甲酸(0.5%) 7-8ml羊血或兔血) 7-8ml 小牛血清 6-8ml 蒸餾水 加至100ml
配方四
牛肉膏 0.35-0.45
蛋白胨 1.1-1.4
氯化鈉 0. 5-0. 55
瓊脂粉 2. 2-2. 3
土溫-80 0. 3-0. 5
硫酸鎂(49. 3%) 6. 5-7. 5ml
對氨苯甲酸(0.5%) 6. 5-7. 5ml
無菌脫纖維0型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血) 6. 5-7. 5ml
小牛血清 6. 5-7. 5ml
蒸餾水 加至100ml
權利要求
1、本發(fā)明涉及一種中和抗生素營養(yǎng)血液培養(yǎng)基，其主要成分是牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉、硫酸鎂、對氨苯甲酸、土溫-80、無菌脫纖維O型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血)、小牛血清經(jīng)一定的工藝制成；其特征在于具有如下配方(組分及其重量百分比％)牛肉膏(0.3-0.5)；蛋白胨(1.0-1.5)；氯化鈉(0.4-0.6)；瓊脂粉(2.1-2.3)；土溫-80(0.3-0.5)；49.3％硫酸鎂6-8ml；0.5％對氨苯甲酸6-8ml；無菌脫纖維O型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血)6-8ml；小牛血清6-8ml；蒸餾水加至100ml。
2、 一種權利要求1所述中和抗生素營養(yǎng)血液培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于具有如下的 步驟1) 、將牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉、硫酸鎂、對氨苯甲酸、土溫-80、蒸餾水置于 三角燒瓶內(nèi)，混合并使液體浸濕瓊脂粉；2) 、加熱溶解，趁熱矯正pH至7.4，以絨布過濾,分裝于試管或燒瓶內(nèi)，后置于壓力蒸氣滅 菌器內(nèi)，以1.05kg30分鐘；3) 、取出后冷至5(TC左右，以無菌手續(xù)加入無菌脫纖維0型人血(或無菌脫纖維羊血或 兔血)和小牛血清，輕輕搖勻，傾注平板.凝固后，抽樣于37t:培養(yǎng)18 24小時，如無細 菌生長，冷藏備用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種中和抗生素營養(yǎng)血液培養(yǎng)基，其主要成分是牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉、硫酸鎂、對氨苯甲酸、土溫-80、無菌脫纖維O型人血(或無菌脫纖維羊血或兔血)、小牛血清經(jīng)一定的工藝制成。用以供一般標本和已使用過抗生素及磺胺藥的病人標本分離培養(yǎng)用。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(1)所需接種量小，培養(yǎng)時間短，少量細菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37℃培養(yǎng)8-12小時即可觀察結果；(2)不易出現(xiàn)假陽性或假陰性；(3)能破壞病人標本中存在的抗生素及磺胺藥的抑菌作用。
文檔編號C12Q1/04GK101565734SQ20081009344
公開日2009年10月28日 申請日期2008年4月21日 優(yōu)先權日2008年4月21日
發(fā)明者奕 曲 申請人:奕 曲