專利名稱：一種鱘魚軟骨素提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種鱘魚軟骨素提取方法。
背景技術(shù)：
鱘魚，也稱鱘龍，和鯊魚一樣是地球上最古老和最原始的軟骨魚種，是淡水魚類中個(gè)體最大、壽命最長的魚類，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和科學(xué)價(jià)值。隨著鱘魚人工繁殖和養(yǎng)殖技術(shù)的成功和推廣，我國鱘魚養(yǎng)殖業(yè)已取得了顯著的成績，鱘魚的養(yǎng)殖面積和養(yǎng)殖產(chǎn)量逐年遞增。魚軟骨素是近年研究人員關(guān)注的熱點(diǎn)問題之一。鱘魚通體是軟骨，具有抗癌和補(bǔ)鈣作用，據(jù)報(bào)道鱘魚頭、脊索、鰭中軟骨的硫酸軟骨素含量高達(dá)30％，素有“鯊魚翅、鱘魚骨，食之明目壯陽，延年益壽”之說。
硫酸軟骨素(Chondroitin sulfate，簡稱Chs)是從動(dòng)物軟骨組織中提取的天然酸性粘多糖，有ChsA、ChsB、ChsC、ChsD和ChsE等多種異構(gòu)體，它們均是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖交替連結(jié)而成的雙糖聚合物，只是硫酸基團(tuán)位置不同而已。它通常與蛋白質(zhì)結(jié)合成糖蛋白的形式存在，當(dāng)其水解時(shí)發(fā)生β消去反應(yīng)，連接硫酸軟骨素與蛋白質(zhì)中絲氨酸羥基的O-苷鍵斷裂，可以得到游離態(tài)的硫酸軟骨素。硫酸軟骨素為白色或微黃色粉末，具有吸濕性，易溶于水而成粘度較大的溶液，難溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙醇、丙酮和冰醋酸等有機(jī)溶劑。硫酸軟骨素遇熱不穩(wěn)定，乙?；装l(fā)生水解脫落，在酸性條件下更易水解成不同聚合度的低聚糖。近年來，隨著對其生理功能和生化性質(zhì)研究的深入，發(fā)現(xiàn)Chs具有抗凝、抗炎、抗血栓、抗癌及降低心肌耗氧量，促進(jìn)冠狀動(dòng)脈循環(huán)、降血脂、抗凝血和防止血管硬化等作用；對冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化、心絞痛、心肌缺氧、心肌梗塞等心血管疾病的治療有一定療效；還對神經(jīng)細(xì)胞、粘膜細(xì)胞、腎細(xì)胞等具有保護(hù)作用；Chs還可活化脂解酶，使脂肪降解，因此是防止肥胖有效物質(zhì)；Chs可與某些物質(zhì)調(diào)制成化妝品用于保護(hù)皮膚的健美；Chs還具有保水性、保膠性和高粘性，我國出口到日本、韓國的Chs都被用作食品添加劑。因此Chs是國內(nèi)外流行的保健品和化妝品以及醫(yī)藥品的重要原料。因此研究鱘魚軟骨素的提取，可以充分利用鱘魚軟骨資源，不但可以提高鱘魚產(chǎn)品附加值，而且減少對環(huán)境的污染，還可開發(fā)鱘魚系列產(chǎn)品，對促進(jìn)我國鱘魚養(yǎng)殖業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展，使我國鱘魚的養(yǎng)殖和加工形成良性循環(huán)是發(fā)展的必然趨勢，對于提高鱘魚的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)價(jià)值具有不可估量的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供鱘魚軟骨素提取方法，將酶解與堿解工藝相結(jié)合，優(yōu)化鱘魚軟骨素的提取工藝，提高鱘魚軟骨素的提取得率及質(zhì)量，促進(jìn)其經(jīng)濟(jì)效益的提升。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種鱘魚軟骨素提取方法，具體包括如下步驟包括以下步驟a、取鱘魚軟骨組織，攪碎并沖洗干凈；b、將上述攪碎的鱘魚軟骨進(jìn)行堿解，堿解時(shí)間為10～12h，，用量為鱘魚軟骨重量的9～10倍；堿解后將溶液調(diào)pH至中性；c、接著對調(diào)至中性的堿解液進(jìn)行酶解，酶解時(shí)間7～8h，酶量為鱘魚軟骨重量的0.5～1％，酶解溫度40±2℃；d、將酶解后的溶液按1∶2～1∶3的體積比加入95％乙醇，邊加入邊用玻棒攪拌；然后于0～4℃靜置沉淀8～10h，去除上清液，所得沉淀物在烘箱中用40～50℃烘干，得到鱘魚軟骨素產(chǎn)品。
采用本發(fā)明后可達(dá)到以下的效果本發(fā)明將堿解與酶解工藝結(jié)合，促進(jìn)軟骨組織中蛋白質(zhì)分解，有效將與之結(jié)合的軟骨素釋放出來，提高鱘魚軟骨素的提取得率和產(chǎn)品質(zhì)量。產(chǎn)品顏色為乳白色，粘度較高，呈膠塊狀，粗產(chǎn)品得率為16％左右，其中氨基已糖的最高含量達(dá)27.58％。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1將清洗后的鱘魚軟骨進(jìn)行堿解，堿種類為NaOH，堿濃度為5.5％，堿解時(shí)間12h，堿液用量約為鱘魚軟骨重量的10倍；堿解后將溶液調(diào)pH至中性。將調(diào)至中性的堿解液用胰酶進(jìn)行酶解，酶活力為200U，酶用量為鱘魚軟骨重量1.0％，酶解溫度40±2℃，酶解時(shí)間8h。將酶解后的溶液按1∶2.5(v/v)加入95％乙醇，邊加入邊用玻棒輕輕攪拌。然后于0～4℃靜置沉淀9h，小心傾倒去除上清液，沉淀物在烘箱中用45℃烘干，得到鱘魚軟骨素產(chǎn)品為淡黃色，粗產(chǎn)品得率為16.20％，其中氨基已糖的含量為27.58％。
實(shí)施例2將鱘魚軟骨進(jìn)行堿解，堿種類為NaOH，堿濃度為6％，堿解時(shí)間11h，堿液用量約為9.5倍；堿解后將溶液調(diào)pH至中性。將調(diào)至中性的堿解液用胰酶進(jìn)行酶解，酶活力為190U，酶用量為0.75％，酶解溫度40±2℃，酶解時(shí)間7.5h。將酶解后的溶液按1∶3(v/v)加入95％乙醇，邊加入邊用玻棒輕輕攪拌。然后于0～4℃靜置沉淀10h，小心傾倒去除上清液，沉淀物在烘箱中用50℃烘干，得到鱘魚軟骨素產(chǎn)品產(chǎn)品顏色為乳黃色，粘度較高，呈膠塊狀，粗產(chǎn)品得率為15.58％，其中氨基已糖的含量為26.31％。
實(shí)施例3將鱘魚軟骨進(jìn)行堿解，堿種類為NaOH，堿濃度為6.5％，堿解時(shí)間10h，堿液用量約為9倍；堿解后將溶液調(diào)pH至中性。將調(diào)至中性的堿解液用胰酶進(jìn)行酶解，酶活力為180U，酶用量為0.5％，酶解溫度40±2℃，酶解時(shí)間8h。將酶解后的溶液按1∶2(v/v)加入95％乙醇，邊加入邊用玻棒輕輕攪拌。然后于0～4℃靜置沉淀8h，小心傾倒去除上清液，沉淀物在烘箱中用40℃烘干，得到鱘魚軟骨素產(chǎn)品產(chǎn)品顏色為乳黃色，粘度較高，呈膠塊狀，粗產(chǎn)品得率為16.30％，其中氨基已糖的含量為23.66％。
權(quán)利要求
1.一種鱘魚軟骨素提取方法，其特征在于包括以下步驟a、取鱘魚軟骨組織，攪碎并沖洗干凈；b、將上述攪碎的鱘魚軟骨進(jìn)行堿解，堿解時(shí)間為10～12h，用量為鱘魚軟骨重量的9～10倍，堿解后將溶液調(diào)pH至中性；c、接著對調(diào)至中性的堿解液進(jìn)行酶解，酶解時(shí)間7～8h，酶用量為鱘魚軟骨重量的0.5～1％，酶解溫度40±2℃；d、將酶解后的溶液按1∶2～1∶3的體積比加入95％乙醇，邊加入邊用玻棒攪拌；然后于0～4℃靜置沉淀8～10h，去除上清液，所得沉淀物在烘箱中用40～50℃烘干，得到鱘魚軟骨素產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鱘魚軟骨素提取方法，其特征在于所述的步驟b中所用堿種類為NaOH，堿濃度為5.5～6.5％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鱘魚軟骨素提取方法，其特征在于所述的步驟c中所用酶為胰酶，酶活力為180±20U。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種鱘魚軟骨素提取方法，它包括以下步驟a.取鱘魚軟骨組織，攪碎并沖洗干凈；b.將上述攪碎的鱘魚軟骨進(jìn)行堿解，堿解時(shí)間為10～12h，用量約為鱘魚軟骨的9～10倍；堿解后將溶液調(diào)pH至中性；c.接著對調(diào)至中性的堿解液進(jìn)行酶解，解時(shí)間7～8h，酶量約為鱘魚軟骨的0.5～1％，酶解溫度40±2℃；d.將酶解后的溶液按1∶2～1∶3的體積比加入95％乙醇，邊加入邊用玻棒攪拌；然后于0～4℃靜置沉淀8～10h，去除上清液，所得沉淀物在烘箱中用40～50℃烘干，得到鱘魚軟骨素產(chǎn)品。本發(fā)明明顯提高鱘魚軟骨素的提取得率及質(zhì)量，促進(jìn)其經(jīng)濟(jì)效益的提升。
文檔編號C12P19/04GK1974778SQ20061012406
公開日2007年6月6日 申請日期2006年12月5日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月5日
發(fā)明者楊賢慶, 李來好, 郝淑賢, 王斌, 馬國軍, 石紅, 岑劍偉, 刁石強(qiáng), 陳勝軍 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所