一種天然沉香誘導劑以及生產(chǎn)沉香的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種天然沉香誘導劑以及生產(chǎn)沉香的方法，屬于植物栽培技術領域。本發(fā)明天然沉香誘導劑的藥效成分由植物內源傷害信號分子、天然誘導結香分子、植物營養(yǎng)劑和植物免疫劑組成。本發(fā)明先在沉香屬植物的樹干上鉆孔，然后利用植物蒸騰拉力將天然沉香誘導劑注入沉香樹體中，然后封住孔洞，處理3～24個月后割取樹干中棕褐色油狀物以及黃棕色變色木質部，曬干后即為沉香。本發(fā)明的天然沉香誘導劑的藥效成分安全，為天然植物成分，不添加任何激素、化學藥物、人工香料等成分；采用本發(fā)明沉香誘導劑能高效、優(yōu)質、高產(chǎn)的生產(chǎn)出沉香，結香3個月可以達到國家藥典2015年版的標準；且顯著提高醇溶性浸出物、沉香四醇、揮發(fā)油及倍半萜的含量。
【專利說明】
一種天然沉香誘導劑以及生產(chǎn)沉香的方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及藥用植物栽培技術領域，具體涉及一種天然沉香誘導劑以及高效率、 尚廣量、尚品質和穩(wěn)定生廣沉香的方法。
【背景技術】
[0002] 沉香是我國傳統(tǒng)名貴藥材，外界刺激可誘導沉香屬(Aqui laria)植物產(chǎn)生沉香，健 康的白木香不產(chǎn)沉香，因此天然沉香資源稀少。沉香的化學成分主要包括倍半萜類、芳香族 和2-苯乙基色酮類化合物，其中倍半萜類是其主要藥效成分，藥理學實驗證明該類化合物 對神經(jīng)系統(tǒng)有明顯的生理活性。雖然中國已種植有可產(chǎn)沉香的白木香樹幾十萬畝近2000~ 3000萬株，東南亞各國也種有數(shù)十萬畝，但自然條件下沉香的產(chǎn)出率非常低。為此，人們經(jīng) 通過科學研究和實踐經(jīng)驗，總結出"砍傷法"、"半斷枝法"、"鑿洞法"、"鐵釘法"、"人工接菌 法"和"化學法"等人工結香的方法。但是這些傳統(tǒng)的人工結香方法操作復雜，沉香得率很 低，成本高，造成很大程度上的浪費。
[0003] 中國專利"一種生產(chǎn)沉香的方法"（申請?zhí)?01310150138.5)公開了一種生產(chǎn)沉香 的方法，具體采用輸液法將沉香促香劑緩慢滴入白木香樹干中，處理3~24個月后可以得到 沉香。雖然該方法生產(chǎn)的沉香滿足國家藥典對其醇溶性浸出物的含量要求，有較好的沉香 油含量以及沉香油中倍半萜含量，但是其沉香促香劑一味追求植物激素和無機鹽傷害刺激 白木香結香，導致白木香樹生長代謝嚴重受阻，直接表現(xiàn)為部分或全部落葉甚至死亡。另 外，此專利并未考慮到傷害結香過程中應當添加植物營養(yǎng)成分和植物免疫劑的重要性，從 而加強沉香樹植物營養(yǎng)和免疫力，減少沉香樹葉子掉落和死樹率，最終實現(xiàn)提高沉香產(chǎn)量 的目標，更未考慮《中國人民共和國藥典》(2015版)對沉香藥材中沉香四醇含量提出了明確 要求。眾所周知，沉香除作香料外，但其作為名貴中藥材更加備受重視，所以沉香的沉香四 醇含量對于沉香藥材品質評價尤其重要。由于沉香產(chǎn)量及其藥效成分(沉香揮發(fā)油、倍半萜 及沉香四醇）的含量很低，因此在本領域能夠提升沉香產(chǎn)量及含量將同時實現(xiàn)增產(chǎn)和提升 沉香的品質。

【發(fā)明內容】

[0004] 針對上述領域中的缺陷，本發(fā)明的目的在于提供一種天然沉香誘導劑，能高效率、 高產(chǎn)量、高品質和穩(wěn)定生產(chǎn)沉香。
[0005] 同時提供使用該天然沉香誘導劑的方法，本發(fā)明不僅顯著提高了醇溶性浸出物含 量、沉香四醇含量、揮發(fā)油含量、揮發(fā)油中倍半萜含量，而且顯著提高了單棵沉香樹的沉香 藥材產(chǎn)量，從而大幅提高了每沉香樹的醇溶性浸出物、沉香四醇、揮發(fā)油和倍半萜的產(chǎn)量， 大幅度提高了單位面積沉香藥材產(chǎn)量和品質。
[0006] 天然沉香誘導劑，為下列藥效組分的水溶液，其藥效成分由植物內源傷害信號分 子、天然誘導結香分子、植物營養(yǎng)劑和植物免疫劑組成。
[0007] 其中各藥效成分的含量為1〇_15~l〇_12mol/L的植物內源傷害信號分子、10~80mg/ L的天然誘導結香分子、50~250mg/L的植物營養(yǎng)劑、2~8mg/L的植物免疫劑。
[0008] 所述植物內源傷害信號分子為番茄系統(tǒng)素，其氨基酸序列為 AVQSKPPSKRDPPKMQTD。
[0009] 所述天然誘導結香分子為氯化鐵、氯化亞鐵中的一種或兩種。
[0010] 所述植物營養(yǎng)劑為20~80mg/L硝酸銨、25~100mg/L硝酸鉀、8~48mg/L硫酸銨、10 ~60mg/L磷酸二氫鉀、2~8mg/L L-抗壞血酸、2~20mg/L硫酸鎂中的一種或多種。
[0011] 所述植物免疫誘導劑為氨基寡糖素。
[0012] -種生產(chǎn)沉香的方法，其特征在于，在沉香樹的樹干上鉆孔，用輸液法將上述天然 沉香誘導劑滴入沉香樹的樹體中，然后封住孔洞，天然沉香誘導劑的用量為50~5000mL，結 香處理3~24個月，然后割取樹干中棕褐色油狀物以及黃棕色變色木質部，曬干后即為沉 香。
[0013] 所述天然沉香誘導劑的用量為400~800mL。
[0014] 所述沉香樹樹齡為5~15年、胸徑大于等于7 cm的樹木。
[0015]沉香樹包括白木香等所有沉香屬(Aquilaria)植物。
[0016] 本發(fā)明天然沉香誘導劑采用氯化鐵和氯化亞鐵替代氯化鈉和氯化鎂，發(fā)明人發(fā)現(xiàn) 鐵釘產(chǎn)生的鐵銹(鐵的氧化物)能夠快速誘導白木香產(chǎn)生非常好的結香效果，其結香效果遠 遠超過氯化鈉或氯化鎂。采用植物內源傷害信號分子一番茄系統(tǒng)素（氨基酸序列為 AVQSKPPSKRDPPKMQTD，由生工生物工程上海(股份)有限公司合成，替代茉莉酸和乙烯利等 植物激素。系統(tǒng)素是植物受到機械傷害或昆蟲侵害時在細胞質中產(chǎn)生的具有信號傳導作用 的內源多肽物質，其作為植物最基本的傷害信號可調控茉莉酸和乙烯的生物合成，進而啟 動植物防御反應并產(chǎn)生大量次生代謝產(chǎn)物。本發(fā)明首次將植物營養(yǎng)劑(硝酸銨、硝酸鉀、硫 酸銨、磷酸二氫鉀、L-抗壞血酸、硫酸鎂)添加到沉香誘導劑中，其能夠迅速補充樹木所需的 各種營養(yǎng)成分，改善樹勢，加快植物傷害液造成的傷口愈合和再生。同時本發(fā)明首次將植物 免疫誘導劑為氨基寡糖素(海島素)添加到沉香誘導劑中，其不但能夠激活植物免疫系統(tǒng)提 高植物抗逆性，還能夠誘導植物產(chǎn)生防御類次生代謝產(chǎn)物。
[0017] 經(jīng)過和未添加植物內源傷害信號劑、植物營養(yǎng)劑和植物免疫劑誘導的沉香以及不 同配方組成制備的沉香對比，結果顯示，本發(fā)明不僅顯著提高了醇溶性浸出物含量、沉香四 醇含量、揮發(fā)油含量、揮發(fā)油中倍半萜含量，而且顯著提高了單棵沉香樹的沉香藥材產(chǎn)量， 從而大幅提高了每沉香樹的醇溶性浸出物、沉香四醇、揮發(fā)油和倍半萜的產(chǎn)量，大幅度提高 了單位面積沉香藥材產(chǎn)量和品質。本發(fā)明對誘導生產(chǎn)的沉香隨機挑選三份樣品的醇浸出物 進行了含量測定，同一批樣品平行試驗5次，得實驗產(chǎn)出的沉香樣品浸出物含量均高于 10 %，而且沉香四醇(&7Η18〇6)含量也均高于0.1 %，達到藥典要求水平。
[0018] 本發(fā)明的沉香誘導劑以及生產(chǎn)方法的優(yōu)點：
[0019] (1)安全:本發(fā)明的沉香誘導劑為天然植物成分，不添加任何激素、化學藥物、人工 香料等成分；
[0020] (2)高效:結香3個月可以達到國家藥典2015年版的標準；
[0021] (3)優(yōu)質：顯著提高醇溶性浸出物、沉香四醇、揮發(fā)油及倍半萜的含量；
[0022] (4)高產(chǎn):顯著提高沉香樹的沉香藥材、醇溶性浸出物、沉香四醇、揮發(fā)油及倍半萜 的產(chǎn)量(23.53%~139.81%)，實現(xiàn)了安全、高效、優(yōu)質、高產(chǎn)地生產(chǎn)沉香，將產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)沉 香變?yōu)楝F(xiàn)實。
[0023] 本發(fā)明所生產(chǎn)的沉香完全滿足市場需求和要求，可用于大規(guī)模、標準化、商品化的 生產(chǎn)，既可提高香農收入，又可保護野生沉香和白木香資源，具有重要的經(jīng)濟效益、社會效 益和生態(tài)效益。
【具體實施方式】
[0024] 本發(fā)明公開了一種天然沉香誘導劑以及生產(chǎn)沉香的方法，本領域技術人員可以借 鑒本文內容，適當改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領域 技術人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明所述方法已經(jīng)通過較佳 實施例進行了描述，相關人員明顯能在不脫離本
【發(fā)明內容】
、精神和范圍內對本文所述的方 法和應用進行改動或適當變更與組合，來實現(xiàn)和應用本發(fā)明技術。
[0025] 在【具體實施方式】中，檢測方法如下：
[0026]醇溶性浸出物含量檢測：
[0027] 割取的沉香參照2015年《中華人民共和國藥典》所載醇溶性浸出物測定法項下的 熱浸法制取沉香油，并對所得沉香樣品的醇溶性浸出物含量進行了測定。精密稱取沉香藥 材粉末2.0g，置250ml的錐形瓶中，精密加入無水乙醇50ml，塞緊，稱定重量，靜置1小時后， 連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1小時。放冷，取下圓底燒瓶，塞緊，稱定重量，用 水補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，即得沉香油。精密量取濾液25ml，置已干燥至恒 重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于l〇5°C干燥3小時，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密 稱定重量，以干燥品計算藥材中醇溶性浸出物的含量（％ )。
[0028] 沉香油含量和沉香油中倍半萜含量檢測：
[0029] 沉香樣品粉碎過26目篩，精密稱取100g置于5000ml圓底燒瓶中，加入2500ml蒸餾 水浸泡過夜。安裝水蒸氣蒸餾裝置Clevenger，微沸提取12h。收集揮發(fā)油，加入適量無水硫 酸鈉，使用〇. 45μπι的有機相微孔膜過濾器后即得揮發(fā)油。
[0030] 將樣品的揮發(fā)油進行GC-MS分析。儀器為美國瓦里安公司的Varian 450GC-300MS 聯(lián)用儀。色譜柱為石英毛細管柱VF-5MS，30m X 0.25mm，膜厚0.25μπι。
[0031] 升溫程序：從50°C開始以10°C/min升到155°C，保留15min;再以8°C/min升到280 °C，保留lOmin.載氣為He，柱流量lml/min，進樣量ΙμL。進樣口溫度為250°C，不分流。質譜條 件:EI源；電離電壓:70eV;離子源溫度:250°C ;全掃描范圍：50~500amu。ΙμL的C8-C4Q正構烷 烴混標以同樣的方法進行檢測。用峰面積歸一化法計算出各峰化合物的相對百分含量，每 個峰對應的RI指數(shù)根據(jù)AMDIS軟件直接計算。各峰所得質譜通過檢索NIST08標準質譜圖庫、 參考文獻報道。再在NIST Chemistry WebBook(http://webbook.nist·gov/chemistry/)上 比對相似度較高化合物的RI值，鑒定出倍半萜類化合物，計算總的倍半萜百分比含量。 [0032] 沉香四醇(&7Η1806)含量測定
[0033]供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精 密加人乙醇l〇ml，稱定重量，浸泡0.5小時，超聲處理(功率250W，頻率40kHZ) 1小時，放冷，再 稱定重量，用乙醇補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液濾過，取續(xù)濾液，即得。參照2015年 《中華人民共和國藥典》所載高效液相色譜法(通則0512)測定。測定法分別精密吸取對照品 溶液與供試品溶液各l〇yL，注入Waters高效液相色譜儀，采用Agilent-C18柱(柱長為25cm， 內徑為4.6mm，粒徑為5μπι);以乙腈為流動相A，以0.1%甲酸溶液為流動相B，按T表中的規(guī)定 進行梯度洗脫;流速為每分鐘〇.7ml;柱溫為檢測波長為252nm。理論板數(shù)按沉香四醇峰計算 應不低于6000。
[0034]
[0035]
[0036] 以下就本發(fā)明所提供的一種生產(chǎn)沉香的方法做進一步說明。
[0037] 實施例1
[0038] 1、本發(fā)明方法
[0039] 選取5年樹齡，胸徑大于7cm的白木香樹，在距離地面5cm處，垂直樹干使用普通電 鉆，鉆頭直徑為〇. 6cm，鉆2個深4.5cm的孔。配置含有植物內源傷害信號分子(終濃度為10- 15mol/L系統(tǒng)素），植物營養(yǎng)劑(終濃度為20mg/L硝酸銨、25mg/L硝酸鉀、8mg/L硫酸銨、2mg/L 硫酸鎂、l〇mg/L磷酸二氫鉀和2mg/L抗壞血酸），天然誘導結香分子(終濃度均為10mg/L的氯 化亞鐵和氯化鐵)和植物免疫誘導劑(終濃度為2mg/L氨基寡糖素，即海島素)溶液500ml，從 鉆孔通過植物蒸騰拉力輸入白木香樹體，輸液完畢后用橡膠塞封住輸液孔，防止沉香誘導 劑流出和雨水沖刷。輸液結束后數(shù)天內未觀察到樹葉掉落。輸液結香處理3個月后，割取創(chuàng) 傷周圍形成的棕褐色油狀物及黃褐色的變色木質部，經(jīng)曬干后得到沉香。
[0040] 2、對比方法
[00411參照申請?zhí)?01310150138.5"一種生產(chǎn)沉香的方法"專利，采用實施例1的結香條 件和方法。將500ml結香液I (0.1 %的茉莉酸甲酯、0.5 %的NaCl和0.3 %的苯乙醇溶液)輸入 白木香樹體。結香3~4天后均觀察到白木香樹部分葉子掉落。
[0042] 3、試驗檢測
[0043]對上述方法制備的沉香采用前述方法進行醇溶性浸出物含量、沉香四醇含量、揮 發(fā)油含量、揮發(fā)油中倍半萜含量、沉香產(chǎn)量、醇溶性浸出物產(chǎn)量、沉香四醇產(chǎn)量、揮發(fā)油產(chǎn) 量、總倍半萜產(chǎn)量進行測定，見下表。
[0044]
[0045] 上表數(shù)據(jù)顯示，對比方法結香3個月的沉香藥材中的沉香四醇含量僅為0.08%，低 于國家藥典沉香藥材對沉香四醇含量不低于〇. 1 %的要求，故未能達到國家藥典2015年版 沉香藥材的質量標準。本發(fā)明不僅顯著提高了醇溶性浸出物含量、沉香四醇含量、揮發(fā)油含 量、揮發(fā)油中倍半萜含量(增產(chǎn)率達10.27%~75.00%)，而且顯著提高了單棵沉香樹的沉 香藥材產(chǎn)量(增產(chǎn)率為42.62 % )，從而大幅提高了每沉香樹的醇溶性浸出物、沉香四醇、揮 發(fā)油和倍半萜的產(chǎn)量(增產(chǎn)率為71.85%~149.59%)，大幅度提高了單位面積沉香藥材產(chǎn) 量和品質。
[0046] 實施例2
[0047] 1、本發(fā)明方法
[0048] 選取8年樹齡，胸徑大于10cm的白木香樹，在距離地面10cm處，垂直樹干使用普通 電鉆，鉆頭直徑為〇.6cm，鉆2個深7cm的孔。配置含有植物內源傷害信號分子(終濃度為10- 14mol/L系統(tǒng)素)和植物營養(yǎng)劑(終濃度為40mg/L硝酸銨、50mg/L硝酸鉀、16mg/L硫酸銨、4mg/ L硫酸鎂、20mg/L磷酸二氫鉀和4mg//L抗壞血酸），天然誘導結香分子(終濃度均為20mg/L的 氯化亞鐵和氯化鐵)和植物免疫誘導劑(終濃度為4mg/L氨基寡糖素，即海島素)溶液500ml， 從鉆孔通過植物蒸騰拉力輸入白木香樹體，輸液完畢后用橡膠塞封住輸液孔，防止沉香誘 導劑流出和雨水沖刷。輸液結束后數(shù)天內未觀察到樹葉掉落。輸液結香處理12個月后，割取 創(chuàng)傷周圍形成的棕褐色油狀物及黃褐色的變色木質部，經(jīng)曬干后得到沉香。
[0049] 2、對比方法
[0050]參照申請?zhí)?01310150138.5"一種生產(chǎn)沉香的方法"專利，采用實施例2的結香條 件和方法。將500ml結香液結香液Π (0.01 %的6-BA、0.1 %的MgCl2和0.2%的苯乙醇溶液） 輸入白木香樹體。結香3~4天后均觀察到白木香樹部分葉子掉落。
[0051 ] 3、試驗檢測
[0052]對上述方法制備的沉香采用前述方法進行醇溶性浸出物含量、沉香四醇含量、揮 發(fā)油含量、揮發(fā)油中倍半萜含量、沉香產(chǎn)量、醇溶性浸出物產(chǎn)量、沉香四醇產(chǎn)量、揮發(fā)油產(chǎn) 量、總倍半萜產(chǎn)量進行測定，見下表。
[0053]
[0054] 上表數(shù)據(jù)顯示，本發(fā)明方法生產(chǎn)的沉香達到國家藥典2015年版的標準（醇溶性浸 出物含量不低于10 %和沉香四醇含量不低于0.1%)，醇溶性浸出物含量為18.58 %和沉香 四醇含量為〇. 19 %，均遠高于藥典標準的85.80 %和90.00 %。與對照方法相比較，本發(fā)明不 僅顯著提高了醇溶性浸出物含量、沉香四醇含量、揮發(fā)油含量、揮發(fā)油中倍半萜含量(增產(chǎn) 率達10.65%~50.00%)，而且顯著提高了單棵沉香樹的沉香藥材產(chǎn)量（增產(chǎn)率為 38.50%)，從而大幅提高了每沉香樹的醇溶性浸出物、沉香四醇、揮發(fā)油和倍半萜的產(chǎn)量 (增產(chǎn)率為66.35%~129.88% )，大幅度提高了單位面積沉香藥材產(chǎn)量和品質。
[0055] 實施例3
[0056] 1、本發(fā)明方法
[0057] 選取10年樹齡，胸徑大于12cm的白木香樹，在距離地面15cm處，垂直樹干使用普通 電鉆，鉆頭直徑為〇.6cm，鉆2個深8cm的孔。配置含有植物內源傷害信號分子(終濃度為10- 13mol/L番茄系統(tǒng)素)和植物營養(yǎng)劑(終濃度為60mg/L硝酸銨、75mg/L硝酸鉀、32mg/L硫酸銨、 10mg/L硫酸鎂、40mg/L磷酸二氫鉀和6mg/L抗壞血酸），天然誘導結香分子（終濃度均為 30mg/L的氯化亞鐵和氯化鐵)和植物免疫誘導劑(終濃度為6mg/L氨基寡糖素，即海島素)溶 液500ml，從鉆孔通過植物蒸騰拉力輸入白木香樹體，輸液完畢后用橡膠塞封住輸液孔，防 止沉香誘導劑流出和雨水沖刷。輸液結束后數(shù)天內未觀察到樹葉掉落。輸液結香處理12個 月后，割取創(chuàng)傷周圍形成的棕褐色油狀物及黃褐色的變色木質部，經(jīng)曬干后得到沉香。 [0058] 2、對比方法
[0059]參照申請?zhí)?01310150138.5"一種生產(chǎn)沉香的方法"專利，采用實施例3的結香條 件和方法。將500ml結香液結香液ΙΠ (0.01 %的6-BA、0.05 %乙烯利、0.5 %的MgCl2和0.5 % 的苯乙醇溶液)輸入白木香樹體。結香3~4天后均觀察到白木香樹部分葉子掉落。
[0060] 3、試驗檢測
[0061] 對上述方法制備的沉香采用前述方法進行醇溶性浸出物含量、沉香四醇含量、揮 發(fā)油含量、揮發(fā)油中倍半萜含量、沉香產(chǎn)量、醇溶性浸出物產(chǎn)量、沉香四醇產(chǎn)量、揮發(fā)油產(chǎn) 量、總倍半萜產(chǎn)量進行測定，見下表。
[0062]
[0063] 本發(fā)明不僅顯著提高了醇溶性浸出物含量、沉香四醇含量、揮發(fā)油含量、揮發(fā)油中 倍半萜含量（增產(chǎn)率達23.35%~41.18%)，而且顯著提高了單棵沉香樹的沉香藥材產(chǎn)量 (增產(chǎn)率為31.31 % )，從而大幅提高了每沉香樹的醇溶性浸出物、沉香四醇、揮發(fā)油和倍半 萜的產(chǎn)量(增產(chǎn)率為61.97%~121.43%)，大幅度提高了沉香藥材及藥效成分的畝產(chǎn)量。
[0064] 實施例4
[0065] 1、本發(fā)明方法
[0066] 選取12年樹齡，胸徑大于15cm的白木香樹，在距離地面20cm處，垂直樹干使用普通 電鉆，鉆頭直徑為〇 .6cm，鉆2個深10cm的孔。配置含有植物內源傷害信號分子(終濃度為10 _12mo 1/L系統(tǒng)素）和植物營養(yǎng)劑（終濃度為80mg/L硝酸銨、100mg/L硝酸鉀、48mg//L硫酸銨、 20mg/L硫酸鎂、60mg/L磷酸二氫鉀和8mg/L抗壞血酸），天然誘導結香分子（終濃度均為 40mg/L的氯化亞鐵和氯化鐵)和和植物免疫誘導劑(終濃度為8mg/L氨基寡糖素，即海島素） 溶液500ml，從鉆孔通過植物蒸騰拉力輸入白木香樹體，輸液完畢后用橡膠塞封住輸液孔， 防止沉香誘導劑流出和雨水沖刷。輸液結束后數(shù)天內未觀察到樹葉掉落。輸液結香處理12 個月后，割取創(chuàng)傷周圍形成的棕褐色油狀物及黃褐色的變色木質部，經(jīng)曬干后得到沉香。 [0067] 2、對比方法
[0068]參照申請?zhí)?01310150138.5"一種生產(chǎn)沉香的方法"專利，采用實施例4的結香條 件和方法。將500ml結香液IV(0.05%的6-BA、0.05%乙烯利、0.2%的NaCl和0.3%的苯乙醇 溶液)輸入白木香樹體。結香3~4天后均觀察到白木香樹部分葉子掉落。
[0069] 3、試驗檢測
[0070] 對上述方法制備的沉香采用前述方法進行醇溶性浸出物含量、沉香四醇含量、揮 發(fā)油含量、揮發(fā)油中倍半萜含量、沉香產(chǎn)量、醇溶性浸出物產(chǎn)量、沉香四醇產(chǎn)量、揮發(fā)油產(chǎn) 量、總倍半萜產(chǎn)量進行測定，見下表。
[0071]
[0072] 本發(fā)明不僅顯著提高了醇溶性浸出物含量、沉香四醇含量、揮發(fā)油含量、揮發(fā)油中 倍半萜含量（增產(chǎn)率達23.35%~41.18%)，而且顯著提高了單棵沉香樹的沉香藥材產(chǎn)量 (增產(chǎn)率為23.53%)，從而大幅提高了每沉香樹的醇溶性浸出物、沉香四醇、揮發(fā)油和倍半 萜的產(chǎn)量(增產(chǎn)率為61.97%~121.43%)，大幅度提高了沉香藥材及藥效成分的畝產(chǎn)量。 [0073] 實施例5 [0074] 1、本發(fā)明方法
[0075] 選取15年樹齡，胸徑大于18cm的白木香樹，在距離地面25cm處，垂直樹干使用普通 電鉆，鉆頭直徑為〇 .6cm，鉆2個深12cm的孔。配置含有植物內源傷害信號分子(終濃度為10 _13mol/L系統(tǒng)素）和植物營養(yǎng)劑（終濃度為60mg/L硝酸銨、75m g//L硝酸鉀、32mg/L硫酸銨、 10mg/L硫酸鎂、40mg/L磷酸二氫鉀和6mg/L抗壞血酸），天然誘導結香分子（終濃度均為 30mg/L的氯化亞鐵和氯化鐵)和植物免疫誘導劑(終濃度為6mg/L氨基寡糖素，即海島素)溶 液500ml，從鉆孔通過植物蒸騰拉力輸入白木香樹體，輸液完畢后用橡膠塞封住輸液孔，防 止沉香誘導劑流出和雨水沖刷。輸液結束后數(shù)天內未觀察到樹葉掉落。
[0076] 2、對比方法
[0077]參照申請?zhí)?01310150138.5"一種生產(chǎn)沉香的方法"專利，采用實施例5的結香條 件和方法。將500ml結香液V (0.05%的6-BA、0.03%茉莉酸甲酯、0.15%的MgCl2和0.5%的 苯乙醇溶液)輸入白木香樹體。結香3~4天后均觀察到白木香樹部分葉子掉落。
[0078] 3、試驗檢測
[0079]輸液結香處理24個月后，割取創(chuàng)傷周圍形成的棕褐色油狀物及黃褐色的變色木質 部，經(jīng)曬干后得到沉香。對上述方法制備的沉香采用前述方法進行醇溶性浸出物含量、沉香 四醇含量、揮發(fā)油含量、揮發(fā)油中倍半萜含量、沉香產(chǎn)量、醇溶性浸出物產(chǎn)量、沉香四醇產(chǎn) 量、揮發(fā)油產(chǎn)量、總倍半萜產(chǎn)量進行測定，見下表。
[0080]
[0081 ] 對比例1
[0082]采用實施例2的結香條件和方法。配置植物營養(yǎng)劑(終濃度為60mg/L硝酸銨、75mg/ L硝酸鉀、32mg/L硫酸銨、10mg/L硫酸鎂、40mg/L磷酸二氫鉀和6mg/L抗壞血酸），天然誘導結 香分子(終濃度均為30mg/L的氯化亞鐵和氯化鐵)溶液500ml，從鉆孔通過植物蒸騰拉力輸 入白木香樹體，輸液完畢后用橡膠塞封住輸液孔，防止沉香誘導劑流出和雨水沖刷。輸液結 束后數(shù)天內未觀察到樹葉掉落。輸液結香處理12個月后，割取創(chuàng)傷周圍形成的棕褐色油狀 物及黃褐色的變色木質部，經(jīng)曬干后得到沉香。
[0083]
[0084] 與實施例3相比較，對比例1的結香液只添加了植物營養(yǎng)劑和天然誘導結香分子， 而未添加植物內源傷害信號分子一系統(tǒng)素和植物免疫誘導劑(氨基寡糖素，海島素），直接 導致其醇溶性浸出物含量、沉香四醇含量、揮發(fā)油含量、揮發(fā)油中倍半萜含量大幅度降低， (減產(chǎn)率達27.23%~62.13%)，而且顯著減少了單棵沉香樹的沉香藥材產(chǎn)量(減產(chǎn)率為 44.14 % )，從而大幅提高了每沉香樹的醇溶性浸出物、沉香四醇、揮發(fā)油和倍半萜的產(chǎn)量 (減產(chǎn)率為66.13%~82.73% )。研究結果證實植物內源傷害信號分子一系統(tǒng)素和植物免疫 誘導劑(氨基寡糖素，海島素)能夠顯著增加沉香產(chǎn)量并且極大提高沉香藥效成分含量，提 升沉香品質，在誘導白木香結香方面發(fā)揮著重要作用。
[0085] 以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人 員來說，在不脫離本發(fā)明技術原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾 也應視為本發(fā)明的保護范圍。
[0086] 本發(fā)明涉及一種天然沉香誘導劑以及生產(chǎn)沉香的方法，屬于植物栽培技術領域。 本發(fā)明天然沉香誘導劑的藥效成分由植物內源傷害信號分子、天然誘導結香分子、植物營 養(yǎng)劑和植物免疫劑組成。本發(fā)明先在沉香屬植物的樹干上鉆孔，然后利用植物蒸騰拉力將 天然沉香誘導劑注入沉香樹體中，然后封住孔洞，處理3~24個月后割取樹干中棕褐色油狀 物以及黃棕色變色木質部，曬干后即為沉香。本發(fā)明的天然沉香誘導劑的藥效成分安全，為 天然植物成分，不添加任何激素、化學藥物、人工香料等成分;采用本發(fā)明沉香誘導劑能高 效、優(yōu)質、高產(chǎn)的生產(chǎn)出沉香，結香3個月可以達到國家藥典2015年版的標準;且顯著提高醇 溶性浸出物、沉香四醇、揮發(fā)油及倍半萜的含量。
【主權項】
1. 天然沉香誘導劑，為下列藥效組分的水溶液，其藥效成分由植物內源傷害信號分子、 天然誘導結香分子、植物營養(yǎng)劑和植物免疫劑組成。2. 根據(jù)權利要求1所述的天然沉香誘導劑，其中各藥效成分的含量為10-15~l(T12m 〇l/L 的植物內源傷害信號分子、10~80mg/L的天然誘導結香分子、50~250mg/L的植物營養(yǎng)劑、2 ~8mg/L的植物免疫劑。3. 根據(jù)權利要求1所述的天然沉香誘導劑，所述植物內源傷害信號分子為番茄系統(tǒng)素， 其氨基酸序列為AVQSKPPSKRDPPKMQTD。4. 根據(jù)權利要求1所述的天然沉香誘導劑，所述天然誘導結香分子為氯化鐵、氯化亞鐵 中的一種或兩種。5. 根據(jù)權利要求1所述的天然沉香誘導劑，所述植物營養(yǎng)劑為20~80mg/L硝酸銨、25~ 100mg/L硝酸鉀、8~48mg/L硫酸銨、10~60mg/L磷酸二氫鉀、2~8mg/L L-抗壞血酸、2~ 20mg/L硫酸鎂中的一種或多種。6. 根據(jù)權利要求1所述的天然沉香誘導劑，所述植物免疫誘導劑為氨基寡糖素。7. -種生產(chǎn)沉香的方法，其特征在于，在沉香樹的樹干上鉆孔，用輸液法將權利要求1-5任一所述的天然沉香誘導劑滴入沉香樹樹體中，然后封住孔洞，天然沉香誘導劑的用量為 50~5000mL，結香處理3~24個月，然后割取樹干中棕褐色油狀物以及黃棕色變色木質部， 曬干后即為沉香。8. 根據(jù)權利要求7所述的方法，所述天然沉香誘導劑的用量為400~800mL。9. 根據(jù)權利要求7所述的方法，所述沉香樹樹齡為5~15年、胸徑大于等于7cm的樹木。10. 根據(jù)權利要求7所述的方法，所述沉香樹為白木香樹。
【文檔編號】A01N59/00GK106070325SQ201610373562
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年5月31日
【發(fā)明人】唐靜, 劉瑤瑤
【申請人】國森天香（北京）生物科技有限公司