添加新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種添加新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長的方法。其操作步驟主要包括：（1）下垂蟲草菌種活化；（2）新鮮昆蟲蛋白培養(yǎng)基制備；（3）新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長效果檢測。使用本發(fā)明所提出的添加新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長的方法，促進(jìn)下垂蟲草菌絲體生長，提高下垂蟲草菌絲體的產(chǎn)率。本發(fā)明操作簡便，效果良好，可推廣應(yīng)用到下垂蟲草的大規(guī)模實際生產(chǎn)過程中。
【專利說明】
添加新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬微生物生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種添加新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長的 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 下垂蟲草 QoAi'oco/Oyce/w /WiaftS1 (Patouillard) G. H. Sung, J. M. Sung, Hywel-Jones & Spatafora是下垂蟲草菌與寄主蝽象的復(fù)合體。野生下垂蟲草多生長在山 谷斜坡混交林的陰濕處林木腐葉中，采集時間每年7-10月。民間用該蟲草泡酒或煎服，用 于理氣、止痛、壯陽，治療胃痛、腰腿疼痛等癥。下垂蟲草野生資源分布較廣，但資源數(shù)量較 少，而且其單只蟲草的重量較輕，人工可采集規(guī)模不大，限制了下垂蟲草的開發(fā)利用。
[0003] 下垂蟲草的無性型菌株人工培養(yǎng)生長比較緩慢，菌絲體產(chǎn)率很低。本課題組前期 研究發(fā)現(xiàn)采用昆蟲干粉對下垂蟲草菌絲體的生長并無明顯促進(jìn)作用，而在下垂蟲草菌培養(yǎng) 基中添加從活體昆蟲中提取的新鮮昆蟲蛋白，能夠顯著促進(jìn)下垂蟲草菌的生長?，F(xiàn)在人工 培養(yǎng)的昆蟲如家蠶、蜜蜂、黃粉蟲、玉米螟、蝽象等材料已經(jīng)達(dá)到工廠化生產(chǎn)規(guī)模，可以滿足 下垂蟲草菌培養(yǎng)所需的新鮮昆蟲蛋白材料。為了尋找一條大規(guī)模培養(yǎng)下垂蟲草的途徑，本 發(fā)明嘗試在下垂蟲草培養(yǎng)基中添加新鮮昆蟲蛋白，有效促進(jìn)下垂蟲草菌絲體的生長，為下 垂蟲草人工大規(guī)模培養(yǎng)奠定基礎(chǔ)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明提供了一種添加新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長的方法。
[0005] 該方法的操作步驟如下： (1)下垂蟲草菌種活化：將4°C保存的下垂蟲草菌株接種到PDA平皿培養(yǎng)基上，于 15-20°C恒溫培養(yǎng)30-45天，接種塊邊緣有新菌絲長出，菌落周圍培養(yǎng)基顏色變?yōu)楹稚?(2 )新鮮昆蟲蛋白培養(yǎng)基制備：選取生長健壯的昆蟲如黃粉蟲幼蟲、玉米螟幼蟲或蝽象 成蟲等作為新鮮昆蟲蛋白來源；每800 ml水中加入活體昆蟲50-150 g，去皮鮮馬鈴薯200 g，在攪拌機(jī)中攪拌打碎，用2層紗布過濾；在此濾液中加入20 g葡萄糖，加水定容為1000 ml，混勻；按每瓶100 ml的裝量，分裝入500 ml三角瓶，用透氣膜封口，121°C常規(guī)滅菌30 min ； (3)新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長效果檢測：用3 mm直徑無菌打孔器取3塊活化的 下垂蟲草菌種，轉(zhuǎn)接到裝有100 ml新鮮昆蟲蛋白培養(yǎng)基的500 ml三角瓶中，在搖床上以 120 rpm的轉(zhuǎn)速，15-20°C恒溫培養(yǎng)30天，用2層紗布過濾下垂蟲草菌絲體，50°C干燥至恒 重，采用分析天平稱重；以在常規(guī)PDA液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)下垂蟲草菌絲體為對照，比較新鮮 昆蟲蛋白對下垂蟲草菌絲體產(chǎn)率的促進(jìn)作用。
[0006] 本發(fā)明的關(guān)鍵點在于：采用的昆蟲蛋白材料是用活體昆蟲提取出來的，新鮮昆蟲 蛋白能夠促進(jìn)下垂蟲草菌絲生長；根據(jù)不同昆蟲種類調(diào)整培養(yǎng)基中添加新鮮昆蟲蛋白的 量；另外，培養(yǎng)過程中控制好溫度等生長因素。以上關(guān)鍵點如能把握好，可以顯著促進(jìn)下垂 蟲草菌絲體的生長，提高下垂蟲草菌絲體的產(chǎn)率。
[0007] 本發(fā)明操作簡便，效果良好，可推廣應(yīng)用到下垂蟲草的大規(guī)模人工培養(yǎng)實際生產(chǎn) 過程中。
【具體實施方式】
[0008] 以下實施例用于說明本發(fā)明，但不是對本發(fā)明的限制。
[0009] 實施例1 :添加新鮮黃粉蟲幼蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草菌絲體生長 (1) 下垂蟲草菌種活化：將4°C保存的下垂蟲草菌株接種到PDA平皿培養(yǎng)基上，于15°C 恒溫培養(yǎng)45天，接種塊邊緣有新菌絲長出，菌落周圍培養(yǎng)基顏色變?yōu)楹稚?(2) 新鮮昆蟲蛋白培養(yǎng)基制備：選取生長健壯的黃粉蟲幼蟲作為新鮮昆蟲蛋白來源； 每800 ml水中加入活體昆蟲100 g，去皮鮮馬鈴薯200 g，在攪拌機(jī)中攪拌打碎，用2層紗 布過濾；在此濾液中加入20 g葡萄糖，加水定容至1000ml，混勻；按每瓶100 ml的裝量，分 裝入500 ml三角瓶，用透氣膜封口，121°C常規(guī)滅菌30 min; (3) 新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長效果檢測：用3 mm直徑無菌打孔器取3塊活化的 下垂蟲草菌種，轉(zhuǎn)接到裝有100 ml新鮮黃粉蟲幼蟲蛋白培養(yǎng)基的500 ml三角瓶中，在搖床 上以120 rpm的轉(zhuǎn)速，15°C恒溫培養(yǎng)30天，用2層紗布過濾下垂蟲草菌絲體，50°C干燥至恒 重，采用分析天平稱重；以在常規(guī)PDA液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)下垂蟲草菌絲體為對照，比較新鮮 黃粉蟲幼蟲蛋白對下垂蟲草菌絲體產(chǎn)率的促進(jìn)作用。
[0010] 添加新鮮黃粉蟲幼蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草菌絲體生長
實施例2 :添加新鮮玉米螟幼蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草菌絲體生長 (1) 下垂蟲草菌種活化：將4°C保存的下垂蟲草菌株接種到PDA平皿培養(yǎng)基上，于18°C 恒溫培養(yǎng)40天，接種塊邊緣有新菌絲長出，菌落周圍培養(yǎng)基顏色變?yōu)楹稚?(2) 新鮮昆蟲蛋白培養(yǎng)基制備：選取生長健壯的玉米螟幼蟲作為新鮮昆蟲蛋白來源； 每800 ml水中加入活體昆蟲150 g，去皮鮮馬鈴薯200 g，在攪拌機(jī)中攪拌打碎，用2層紗 布過濾；在此濾液中加入20 g葡萄糖，加水定容至1000ml，混勻；按每瓶100 ml的裝量，分 裝入500 ml三角瓶，用透氣膜封口，121°C常規(guī)滅菌30 min; (3) 新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長效果檢測：用3 mm直徑無菌打孔器取3塊活化的 下垂蟲草菌種，轉(zhuǎn)接到裝有100 ml新鮮玉米螺幼蟲蛋白培養(yǎng)基的500 ml三角瓶中,在搖床 上以120 rpm的轉(zhuǎn)速，18°C恒溫培養(yǎng)30天，用2層紗布過濾下垂蟲草菌絲體，50°C干燥至恒 重，采用分析天平稱重；以在常規(guī)PDA液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)下垂蟲草菌絲體為對照，比較新鮮 玉米螟幼蟲蛋白對下垂蟲草菌絲體產(chǎn)率的促進(jìn)作用。
[0011] 添加新鮮玉米螟幼蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草菌絲體生長
實施例3 :添加新鮮蝽象成蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草菌絲體生長 (1) 下垂蟲草菌種活化：將4°C保存的下垂蟲草菌株接種到PDA平皿培養(yǎng)基上，于20°C 恒溫培養(yǎng)30天，接種塊邊緣有新菌絲長出，菌落周圍培養(yǎng)基顏色變?yōu)楹稚?(2) 新鮮昆蟲蛋白培養(yǎng)基制備：選取生長健壯的蝽象成蟲作為新鮮昆蟲蛋白來源；每 800 ml水中加入活體昆蟲50 g，去皮鮮馬鈴薯200 g，在攪拌機(jī)中攪拌打碎，用2層紗布過 濾；在此濾液中加入20 g葡萄糖，加水定容至1000ml，混勻；按每瓶100 ml的裝量，分裝入 500 ml三角瓶，用透氣膜封口，121°C常規(guī)滅菌30 min; (3) 新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長效果檢測：用3 mm直徑無菌打孔器取3塊活化的 下垂蟲草菌種，轉(zhuǎn)接到裝有100 ml新鮮蝽象成蟲蛋白培養(yǎng)基的500 ml三角瓶中，在搖床上 以120 rpm的轉(zhuǎn)速，20°C恒溫培養(yǎng)30天，用2層紗布過濾下垂蟲草菌絲體，50°C干燥至恒 重，采用分析天平稱重；以在常規(guī)PDA液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)下垂蟲草菌絲體為對照，比較新鮮 蝽象成蟲蛋白對下垂蟲草菌絲體產(chǎn)率的促進(jìn)作用。
[0012] 添加新鮮蝽象成蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草菌絲體生長
【主權(quán)項】
1. 一種添加新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長的方法，其特征在于該方法的操作步驟包 括： (1) 下垂蟲草菌種活化：將4°C保存的下垂蟲草菌株接種到PDA平皿培養(yǎng)基上，于 15-20°C恒溫培養(yǎng)30-45天，接種塊邊緣有新菌絲長出，菌落周圍培養(yǎng)基顏色變?yōu)楹稚? (2) 新鮮昆蟲蛋白培養(yǎng)基制備：選取生長健壯的昆蟲如黃粉蟲幼蟲、玉米螟幼蟲或蝽 象成蟲等作為新鮮昆蟲蛋白來源；每800 ml水中加入活體昆蟲50-150 g，去皮鮮馬鈴薯 200 g，在攪拌機(jī)中攪拌打碎，用2層紗布過濾；在此濾液中加入20 g葡萄糖，加水定容至 1000ml，混勻；按每瓶100 ml的裝量，分裝入500 ml三角瓶，用透氣膜封口，121°C常規(guī)滅菌 30 min ； (3) 新鮮昆蟲蛋白促進(jìn)下垂蟲草生長效果檢測：用3 mm直徑無菌打孔器取3塊活化的 下垂蟲草菌種，轉(zhuǎn)接到裝有100 ml新鮮昆蟲蛋白培養(yǎng)基的500 ml三角瓶中，在搖床上以 120 rpm的轉(zhuǎn)速，15-20°C恒溫培養(yǎng)30天，用2層紗布過濾下垂蟲草菌絲體，50°C干燥至恒 重，采用分析天平稱重；以在常規(guī)PDA液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)下垂蟲草菌絲體為對照，比較新鮮 昆蟲蛋白對下垂蟲草菌絲體產(chǎn)率的促進(jìn)作用。
【文檔編號】A01G1/04GK105981583SQ201510066992
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年2月10日
【發(fā)明人】陳自宏, 徐玲, 楊曉娜, 王國強(qiáng)
【申請人】保山學(xué)院