一種具有離心功能的微量精子冷凍裝置的制造方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種具有離心功能的微量精子冷凍裝置，包括：冷凍載管和管蓋，冷凍載管包括：金屬環(huán)、內(nèi)管、外管；內(nèi)管呈圓錐形，內(nèi)管設(shè)于外管內(nèi)，內(nèi)管的開口設(shè)于內(nèi)管上部，內(nèi)管通過開口與外管固定連接，內(nèi)管的底部呈尖錐形充分與液氮接觸；外管上面對應(yīng)內(nèi)管底部的位置鑲嵌固定安裝有由金屬構(gòu)成的環(huán)狀金屬環(huán)。開口的直徑設(shè)成適用于微量樣本離心機的直徑尺寸。內(nèi)管、外管管蓋、連接繩由透明而薄且導(dǎo)熱性高的材質(zhì)構(gòu)成。具有離心濃縮功能，能將200微升的微量精子離心成5微升立即冷凍，提高冷凍前精子濃度、減少所需的冷凍管數(shù)。從精液裝管到最后解凍完成，冷凍及復(fù)蘇整個過程不需要反復(fù)轉(zhuǎn)移及更換，減少轉(zhuǎn)移過程中精子的丟失，提高精子回收率。
【專利說明】
一種具有離心功能的微量精子冷凍裝置
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種精子冷凍裝置，尤其是一種具有離心功能的微量精子冷凍裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，在進行輔助生殖技術(shù)助孕時，由于微量精子(來源于嚴重少精癥、睪丸穿刺和附睪穿刺的精子)不易獲取，且質(zhì)量較差，有些嚴重少精子癥和無精子癥患者在取卵日不能提供足夠的精子供ICSI受精，直接導(dǎo)致助孕失敗。因此，對這些特殊患者進行精子冷凍保存意義重大。微量精子冷凍可減少無精癥患者睪丸、附睪手術(shù)次數(shù)，降低反復(fù)手術(shù)的費用及手術(shù)的風(fēng)險，減少取卵日無精子風(fēng)險，保證卵子及時被利用。
[0003]與常規(guī)精液冷凍相比，微量精子凍存由于精子數(shù)量少，復(fù)蘇后精子活率及回收率低，冷凍難度較大。微量精子凍存首先應(yīng)選擇合適的精子凍融載體。為了有效保存這些微量精子，國內(nèi)外學(xué)者采用各種不同的載體來冷凍微量精子，這些載體包括了常規(guī)冷凍管、麥管、透明帶、冷凍環(huán)和ICSI注射針等。精子頭部直徑4-5μπι，尾部長40-50μπι，應(yīng)用常規(guī)冷凍管或麥管，冷凍前要用冷凍保護劑稀釋，稀釋及管壁粘附使得精子密度進一步降低，復(fù)蘇后回收率低，甚至難以發(fā)現(xiàn)，且由于冷凍過程中細胞內(nèi)冰晶形成等因素會導(dǎo)致復(fù)蘇后精子細胞膜損傷嚴重，導(dǎo)致無法用于后續(xù)的輔助生殖治療。另外一些研究利用人類和小鼠的空透明帶冷凍微量精子，但人卵透明帶較難獲得，且可能存在污染的問題，難以推廣應(yīng)用。冷凍環(huán)、ICSI注射針也有被應(yīng)用于微量精子冷凍，但精子加載難度較大。因此，需迫切尋求一種高效的微量精子的冷凍裝置。
[0004]研究表明，減少精液冷凍損傷的關(guān)鍵是避免精子內(nèi)冰晶的形成。精子冷凍中冰晶的形成導(dǎo)致機械損傷，精子頂體、質(zhì)膜、線粒體及其DNA的完整性受到了影響，甚至導(dǎo)致細胞死亡。因此精子冷凍過程中，需要迅速跨越冰晶形成時期，降至玻璃化狀態(tài)。要實現(xiàn)玻璃化降溫必須要迅速，這就要求冷凍裝置裝載的體積要盡可能的小，并且冷凍載體的導(dǎo)熱性能要好。經(jīng)睪丸穿刺和附睪穿刺精子樣本或自行排出的嚴重少精癥精子樣本總體積較大，約數(shù)毫升，含有較多其它非精子物質(zhì)，冷凍時需經(jīng)過離心、分管冷凍等多次轉(zhuǎn)移操作，不利于微量精子的收集及造成微量精子的無端丟失。因此冷凍載體應(yīng)避免多次轉(zhuǎn)移，最大化地收集精子及最小化地降低精子丟失。而目前國內(nèi)外未有可直接用于離心的精子冷凍載體。因此，只需微量冷凍液且可直接離心濃縮的玻璃化冷凍裝置可以最大限度地減少精子冷凍-解凍過程中的冷凍損傷和提高回收率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的為了解決現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明提供了一種具有離心功能的微量精子冷凍裝置。
[0006]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是:
[0007]這種具有離心功能的微量精子冷凍裝置，包括:冷凍載管和管蓋，冷凍載管包括:金屬環(huán)、內(nèi)管、外管；
[0008]內(nèi)管呈圓錐形，內(nèi)管設(shè)于外管內(nèi)，內(nèi)管的開口設(shè)于內(nèi)管上部，內(nèi)管通過開口與外管固定連接，內(nèi)管的底部呈尖錐形充分與液氮接觸；
[0009]外管上面對應(yīng)內(nèi)管底部的位置鑲嵌固定安裝有由金屬構(gòu)成的環(huán)狀金屬環(huán)。
[0010]開口的直徑設(shè)成適用于微量樣本離心機的直徑尺寸。
[0011]內(nèi)管、外管管蓋、連接繩由透明而薄且導(dǎo)熱性高的材質(zhì)構(gòu)成。
[0012]管蓋通過連接繩與內(nèi)管的開口密封活動連接。
[0013]具有離心功能的微量精子冷凍裝置還包括:熏蒸篩;所述的熏蒸篩由金屬材質(zhì)構(gòu)成。
[0014]熏蒸篩的中間支柱設(shè)標記刻度，標記自由伸縮調(diào)節(jié)適合的熏蒸高度。
[0015]冷凍載管冷凍時放置在熏蒸篩內(nèi)，在液氮蒸汽的作用下均勻，迅速降溫。
[0016]具有離心功能的微量精子冷凍裝置還包括:冷凍卡槽;所述的冷凍卡槽由鋁質(zhì)材料構(gòu)成。
[0017]冷凍卡槽為多個與冷凍載管匹配固定連接的卡槽，依據(jù)冷凍載管的管數(shù)按需剪裁卡槽的大小以進行長期儲存。
[0018]冷凍卡槽的上方設(shè)有標識區(qū)，以此進行冷凍信息的標記，節(jié)省冷凍空間。
[0019]本發(fā)明的有益效果:
[0020]①具有離心濃縮功能，能將200微升的微量精子離心成5微升立即冷凍，提高冷凍前精子濃度、減少所需的冷凍管數(shù)。
[0021]②從精液裝管到最后解凍完成，冷凍及復(fù)蘇整個過程不需要反復(fù)轉(zhuǎn)移及更換，減少轉(zhuǎn)移過程中精子的丟失，提尚精子回收率。
[0022]③管壁薄、精液量少，溫度傳導(dǎo)速度快，可實現(xiàn)快速降溫和復(fù)溫，有效提高精子的存活率。
[0023]④采用密閉的精液冷凍管承載還可預(yù)防漲破的精液污染液氮，避免交叉污染，生物安全性高。
[0024]⑤載管可沉于液氮下，存儲時避免漂浮而影響精液的冷凍效果。
【附圖說明】
[0025]下面結(jié)合附圖和【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步的說明。
[0026]圖1是本發(fā)明的組合結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實施方式】
[0027]根據(jù)圖1所示，本發(fā)明主要包括:冷凍載管1、金屬環(huán)2、內(nèi)管3、外管4、內(nèi)管上部5、內(nèi)管底部6、管蓋7、連接繩8、開口 9。
[0028]這種具有離心功能的微量精子冷凍裝置，包括:冷凍載管I和管蓋7，冷凍載管I包括:金屬環(huán)2、內(nèi)管3、外管4;
[0029]內(nèi)管3呈圓錐形，內(nèi)管3設(shè)于外管4內(nèi)，內(nèi)管3的開口9設(shè)于內(nèi)管上部5，內(nèi)管3通過開口 9與外管4固定連接，內(nèi)管3的底部呈尖錐形充分與液氮接觸；
[0030]外管4上面對應(yīng)內(nèi)管3底部的位置鑲嵌固定安裝有由金屬構(gòu)成的環(huán)狀金屬環(huán)2。
[0031]開口9的直徑設(shè)成適用于微量樣本離心機的直徑尺寸。
[0032]內(nèi)管3、外管4管蓋7、連接繩8由透明而薄且導(dǎo)熱性高的材質(zhì)構(gòu)成。
[0033]管蓋7通過連接繩8與內(nèi)管3的開口9密封活動連接。
[0034]具有離心功能的微量精子冷凍裝置還包括:熏蒸篩;所述的熏蒸篩由金屬材質(zhì)構(gòu)成。
[0035]熏蒸篩的中間支柱設(shè)標記刻度，標記自由伸縮調(diào)節(jié)適合的熏蒸高度。
[0036]冷凍載管I冷凍時放置在熏蒸篩內(nèi)，在液氮蒸汽的作用下均勻，迅速降溫。
[0037]具有離心功能的微量精子冷凍裝置還包括:冷凍卡槽;所述的冷凍卡槽由鋁質(zhì)材料構(gòu)成。
[0038]冷凍卡槽為多個與冷凍載管I匹配固定連接的卡槽，依據(jù)冷凍載管I的管數(shù)按需剪裁卡槽的大小以進行長期儲存。
[0039]冷凍卡槽的上方設(shè)有標識區(qū)，以此進行冷凍信息的標記，節(jié)省冷凍空間。
[0040]工作原理:
[0041]冷凍載管呈圓錐形，上部設(shè)計成適用于微量樣本離心機的大小的直徑，可直接用于離心濃縮精液，底部尖錐形可充分與液氮接觸，實現(xiàn)迅速降溫，選用透明而薄且導(dǎo)熱性高的材質(zhì)構(gòu)成，底部鑲嵌一金屬環(huán)，可防止冷凍載管懸浮于液氮中，方便冷凍使用。
[0042]臨床應(yīng)用:
[0043]1、微量精子冷凍裝置的應(yīng)用
[0044]收集精液后，吸取精子懸液放入冷凍載管內(nèi)，直接用低轉(zhuǎn)離心濃縮。離心后盡可能去除上清液，然后再加入與精子沉淀1:1體積的精子冷凍液，混勻，使最終懸液的總體積小于10yL。將裝有精子懸液的冷凍載管置于液氮上方2-3cm熏蒸3-5min，然后直接投入液氮保存。解凍時直接將冷凍裝置投入到預(yù)熱好的37°C的水中放置約lOmin。最后將精子懸液吸出放置于培養(yǎng)皿中，加入少許培養(yǎng)液稀釋培養(yǎng)。
[0045]2、微量精子復(fù)蘇率評估
[0046]冷凍前和復(fù)蘇后分別計算精子的存活率，以及冷凍后的存活指數(shù)(冷凍后的精子存活率/冷凍前的精子存活率)來評價微量精子的冷凍效果。
[0047]3、微量精子冷凍裝置的應(yīng)用效果評估
[0048]選取8例睪丸穿刺的精液，采用本新型冷凍裝置進行微量冷凍保存。精子懸液分成兩份，一份用于計數(shù)冷凍前精子的存活率，另一份用于微量冷凍。這8例患者精子冷凍前平均存活率為63.46%,解凍后平均存活率為54.02%,總的精子存活指數(shù)為0.85 (該值為解凍后平均精子存活率/冷凍前平均精子存活率)。冷凍復(fù)蘇后精子存活率、存活指數(shù)均符合世界衛(wèi)生組織的標準。說明本新型冷凍裝置作為微量精子冷凍載體是可行的、高效的。
[0049]綜上所述，我們建立了一種高效、簡便微量精子的冷凍裝置，最大限度地減少精子冷凍-解凍過程中的冷凍損傷，提高了精子回收率，且復(fù)蘇后具有良好的精子存活率，精子不易丟失，可用于后續(xù)的輔助生殖治療，生物安全性高。這為微量精子的冷凍提供了技術(shù)支持和保障。國內(nèi)外均未見相關(guān)的報道。
【主權(quán)項】
1.一種具有離心功能的微量精子冷凍裝置，包括:冷凍載管(I)和管蓋(7)，其特征在于:冷凍載管(I)包括:金屬環(huán)(2)、內(nèi)管(3)、外管(4); 內(nèi)管(3)呈圓錐形，內(nèi)管(3)設(shè)于外管(4)內(nèi)，內(nèi)管(3)的開口(9)設(shè)于內(nèi)管上部(5)，內(nèi)管(3)通過開口(9)與外管(4)固定連接，內(nèi)管(3)的底部呈尖錐形充分與液氮接觸； 外管(4)上面對應(yīng)內(nèi)管(3)底部的位置鑲嵌固定安裝有由金屬構(gòu)成的環(huán)狀金屬環(huán)(2)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有離心功能的微量精子冷凍裝置，其特征在于:所述的開口(9)的直徑設(shè)成適用于微量樣本離心機的直徑尺寸。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有離心功能的微量精子冷凍裝置，其特征在于:所述的內(nèi)管(3)、外管(4)管蓋(7)、連接繩(8)由透明而薄且導(dǎo)熱性高的材質(zhì)構(gòu)成。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有離心功能的微量精子冷凍裝置，其特征在于:所述的管蓋(7)通過連接繩(8)與內(nèi)管(3)的開口(9)密封活動連接。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有離心功能的微量精子冷凍裝置，其特征在于:具有離心功能的微量精子冷凍裝置還包括:熏蒸篩;所述的熏蒸篩由金屬材質(zhì)構(gòu)成。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的具有離心功能的微量精子冷凍裝置，其特征在于:所述的熏蒸篩的中間支柱設(shè)標記刻度，標記自由伸縮調(diào)節(jié)適合的熏蒸高度。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有離心功能的微量精子冷凍裝置，其特征在于:所述的冷凍載管(I)冷凍時放置在熏蒸篩內(nèi)，在液氮蒸汽的作用下均勻，迅速降溫。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有離心功能的微量精子冷凍裝置，其特征在于:具有離心功能的微量精子冷凍裝置還包括:冷凍卡槽;所述的冷凍卡槽由鋁質(zhì)材料構(gòu)成。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的具有離心功能的微量精子冷凍裝置，其特征在于:所述的冷凍卡槽為多個與冷凍載管(I)匹配固定連接的卡槽，依據(jù)冷凍載管(I)的管數(shù)按需剪裁卡槽的大小以進行長期儲存。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的具有離心功能的微量精子冷凍裝置，其特征在于:所述的冷凍卡槽的上方設(shè)有標識區(qū)，以此進行冷凍信息的標記，節(jié)省冷凍空間。
【文檔編號】A01N1/02GK105918310SQ201610477671
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年6月27日
【發(fā)明人】馮貴雪, 林若蕓, 張波, 周紅, 汪彩珠, 舒金輝, 陳煥華, 甘賢優(yōu)
【申請人】廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院, 馮貴雪