一種抑菌農(nóng)藥組合物及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及農(nóng)藥組合物在抑制病原真菌方面的應(yīng)用，尤其設(shè)及一種抑菌農(nóng)藥組合 物及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)抑菌殺蟲(chóng)植物資源篩選做了大量的研究工作，發(fā)現(xiàn)了許多 具有抑菌殺蟲(chóng)活性的植物資源。例如，Wilson等從345種植物和49種植物精油中篩選出 13種植物和4種精油具有較強(qiáng)的抑菌活性。又如，Viuda-Marto等研究發(fā)現(xiàn)巧樣、相枯、葡 萄抽和廝澄4種精油對(duì)霉菌生長(zhǎng)的影響通常與食物腐敗有關(guān)，發(fā)現(xiàn)甜澄精油對(duì)黑曲霉最有 效，相枯精油能抑制黃曲霉的生長(zhǎng)，抽子精油對(duì)黃青霉抑制最有效。相枯精油被認(rèn)為是最合 適的替代品用做食品工業(yè)的添加劑。
[0003]相橘是多年生的常綠小喬木，資源豐富、優(yōu)良品種繁多，具有四千多年的栽培歷 史，目前是我國(guó)生產(chǎn)面積最大的水果。然而，相橘的加工產(chǎn)生過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量廢棄皮渣。 針對(duì)運(yùn)些廢棄皮渣，目前資源化利用和處理的主要方式有：衛(wèi)生填埋、提取有效活性物質(zhì)、 生產(chǎn)有機(jī)肥等。研究開(kāi)發(fā)其中的殺蟲(chóng)和抑菌活性物質(zhì)，是相橘皮渣綜合利用的較好途徑。近 些年來(lái)，相橘中的活性物質(zhì)在防治病原菌等方面的作用日益得到重視，但其抑菌的主要成 分和機(jī)理目前還不十分清楚。
[0004] 目前，雖然已有關(guān)于相橘中的活性物質(zhì)的殺蟲(chóng)和抑菌活性的相關(guān)研究，但是運(yùn)些 研究中所提及的活性物質(zhì)能夠起到抑菌作用的應(yīng)用范圍和方式等仍有一定的局限，同時(shí) 運(yùn)些研究也都未說(shuō)明其提取物中所含的抑菌活性物質(zhì)分別是什么，因此有進(jìn)一步研究的必 要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的第一目的在于提供一種抑菌農(nóng)藥組合物，該抑菌農(nóng)藥組合物可用作高效 抑制膠抱炭痘菌等多種病原真菌的殺菌農(nóng)藥。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案具體如下：
[0007]-種抑菌農(nóng)藥組合物，其特征在于：它包括巧樣締、芳精醇、β-羨締、α-松油醇、 巧樣醒、月桂締和正己醒。
[000引作為進(jìn)一步限定，上述抑菌農(nóng)藥組合物具體可由巧樣締、芳精醇、β-羨締、α-松 油醇、巧樣醒、月桂締和正己醒組成。
[0009] 作為再進(jìn)一步明確，上述各個(gè)物質(zhì)的用量范圍，按重量份數(shù)計(jì)分別為巧樣締3~ 50份、芳精醇1~20份、β-羨締0. 01~3份、α-松油醇0. 1~5份、巧樣醒0. 1~5份、 月桂締0.5~10份和正己醒0.01~2份。
[0010]為進(jìn)一步提高上述抑菌農(nóng)藥組合物的抑菌效率，作為再進(jìn)一步優(yōu)選，上述各個(gè)物 質(zhì)的用量范圍，按重量份數(shù)計(jì)分別為巧樣締5~50份、芳精醇5~10份、β-羨締1~3 份、α-松油醇2~4份、巧樣醒1~5份、月桂締4~7份和正己醒1~2份。
[0011] 作為更進(jìn)一步優(yōu)選，上述各個(gè)物質(zhì)的用量，按重量份數(shù)計(jì)分別為巧樣締45份、芳 精醇15份、β-羨締2份、α-松油醇3份、巧樣醒4份、月桂締7份和正己醒1. 5份。
[0012] 本發(fā)明中的上述抑菌農(nóng)藥組合物，可制備成用于抑制膠抱炭痘菌 (Colletotrichumgloeosprioides)、相橘褐色蒂腐病菌值iaporthecitri)、相橘黑腐病 菌（AlternariacitriJ、相橘青霉菌（Penicilliumitali州m)、相橘黑斑病菌（Gui即ardia citricarpa)或/和相橘綠霉菌（Penicilliumdigitatum)的殺菌農(nóng)藥。
[0013] 本發(fā)明具有W下有益效果：
[0014] 本發(fā)明公開(kāi)了一種抑菌農(nóng)藥組合物，它能作為一種農(nóng)藥殺菌劑，對(duì)膠抱炭痘菌、相 橘褐色蒂腐病菌、相橘黑腐病菌、相橘青霉菌、相橘黑斑病菌和相橘綠霉菌等多種病原真菌 均具有良好的抑制作用。它不僅為相橘中活性物質(zhì)的開(kāi)發(fā)利用提供了新途徑，也為將相橘 中的活性物質(zhì)應(yīng)用于抑菌農(nóng)藥的研發(fā)提供了依據(jù)。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 下面通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體描述，在此指出W下實(shí)施例只用于對(duì)本發(fā) 明進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明，不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，本領(lǐng)域的技術(shù)熟練人員可W根 據(jù)上述
【發(fā)明內(nèi)容】
對(duì)本發(fā)明作出一些非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整。
[001引實(shí)施例1
[0017] 一種抑菌農(nóng)藥組合物，它由巧樣締、芳精醇、β-羨締、α-松油醇、巧樣醒、月桂締 和正己醒組成；其各個(gè)物質(zhì)的用量，按重量份數(shù)計(jì)分別為巧樣締45. 53份、芳精醇15. 34份、 β-羨締2. 10份、α-松油醇3. 33份、巧樣醒4. 13份、月桂締7. 77份和正己醒1. 51份。
[0018] 為了得出上述抑菌農(nóng)藥組合物的組成，本例還進(jìn)行了W下探究：
[0019] ①將夏澄果皮洗凈驚干，50°C烘干后粉碎過(guò)篩，之后按照料液比為12. 5ml/g分別 加入石油酸、無(wú)水乙醇、丙酬、乙酸乙醋，保鮮膜封口，50°C超聲波萃取40min，減壓過(guò)濾，重 復(fù)Ξ次，再將收集的濾液減壓濃縮制得提取物；②提取來(lái)源選擇為紅枯種子，提取方法同 ①；③澄油（伏令夏澄果皮提取物）。
[0020] 夏澄果皮和紅枯種子的4種提取物對(duì)膠抱炭痘菌的抑制作用的研究：
[0021] 采用菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行測(cè)定：在8個(gè)240M^培養(yǎng)基中分別加入夏澄果皮和紅枯 種子的四種提取物各lOmU搖勻后取15mL倒入直徑為9cm的培養(yǎng)皿內(nèi)，制成混有提取物的 平板培養(yǎng)基，其中提取物的濃度80mg/mU同時(shí)制備只含有等量4種溶劑的PDA培養(yǎng)基平板， 用于對(duì)照。在培養(yǎng)好的膠抱炭痘菌菌落邊緣用滅菌的打孔器取5mm直徑的菌絲塊，分別移 到制備好的平板培養(yǎng)基上，每種提取物設(shè)置Ξ個(gè)重復(fù)，28°C光照培養(yǎng)72h，待對(duì)照菌落長(zhǎng)至 培養(yǎng)皿2/3時(shí)，采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，計(jì)算菌落直徑平均值和菌絲生長(zhǎng)抑制率，其 結(jié)果見(jiàn)下表1。
[0022] 菌絲生長(zhǎng)抑制率（％ ) = [1-(處理菌落直徑-菌餅直徑）/(對(duì)照菌落直徑-菌餅 直徑）]X100。
[0023] 表1夏澄果皮和紅枯種子的4種提取物對(duì)膠抱炭痘菌的抑制作用
[0024]
[00巧]注：表中數(shù)字為平均值+標(biāo)準(zhǔn)誤，同一系列中凡小寫(xiě)字母不同表示在0. 05水平差 異顯著（t測(cè)驗(yàn)），下表同。
[0026] 根據(jù)表1可知：夏澄果皮和紅枯種子的四種提取物對(duì)膠抱炭痘菌都有抑制作用； 其中，夏澄果皮的乙醇提取物對(duì)膠抱炭痘菌的抑制率達(dá)54. 86%，紅枯種子的乙醇提取物的 抑制率達(dá)60. 95%。
[0027] 夏澄果皮的乙醇提取物對(duì)六種病原真菌的抑制作用的研究：
[0028] 其測(cè)定方法同上述菌絲生長(zhǎng)速率法，且具體是將膠抱炭痘菌、相橘褐色蒂腐病菌、 相橘黑腐病菌、相橘青霉菌、相橘黑斑病菌和相橘綠霉菌等六種病原真菌的菌餅分別接到 含有夏澄果皮的乙醇提取物的平板培養(yǎng)基上，提取物的濃度40mg/mU每個(gè)菌種設(shè)置Ξ個(gè)重 復(fù)，然后放于28Γ恒溫培養(yǎng)，待對(duì)照菌落長(zhǎng)至培養(yǎng)皿2/3時(shí)，計(jì)算菌落直徑平均值和菌絲生 長(zhǎng)抑制率，其測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表2。
[0029] 表2夏澄果皮的乙醇提取物對(duì)六種植物病原真菌的抑制作用
[0030]
[oosli_根據(jù)表2可知：夏澄果皮的乙醇提取物對(duì)六種植物病原真菌均有不同程度的抑制 作用，其中，對(duì)相橘黑斑病菌抑菌效果最好，對(duì)相橘褐色蒂腐病菌、膠抱炭痘菌、相橘青霉菌 等抑菌效果相對(duì)較好，對(duì)相橘黑腐病菌效果稍差。
[0032] 澄油對(duì)六種病原真菌的抑制作用的研究：
[0033] 其測(cè)定方法同上述菌絲生長(zhǎng)速率法，具體是將W上6種病原真菌的菌餅分別接 到含有上述澄油的平板培養(yǎng)基上，澄油的濃度50mg/mU每個(gè)菌種設(shè)置Ξ個(gè)重復(fù)，然后放于 28Γ恒溫光照培養(yǎng)，待對(duì)照菌落長(zhǎng)至培養(yǎng)皿2/3時(shí)，計(jì)算菌落直徑平均值和菌絲生長(zhǎng)抑制 率，根據(jù)測(cè)定結(jié)果得知：澄油對(duì)6種病原真菌均有不同的抑制作用，其中，對(duì)相橘綠霉菌抑 制率77. 02%，膠抱炭痘菌等抑制率在69%W上，而對(duì)相橘黑斑病菌的抑菌效果相對(duì)較差， 但其抑菌率仍在50. 36%~88. 72%之間。
[0034] 為了明確其中的抑菌活性成分主要包括有哪些物質(zhì)，本例中還對(duì)夏澄果皮、紅枯 種子和澄油等相橘提取物中活性成分進(jìn)行了GC-MS分析：
[003引（1)供試材料度澄果皮乙醇提取物、紅枯種子乙醇提取物和澄油；
[003引似主要儀器：7890A/5975C氣相色譜-質(zhì)譜儀（GC-M巧
[0037] (3)夏澄果皮乙醇提取物、紅枯種子乙醇提取物和澄油的GC-MS分析：分別稱取 3mL供試材料中的提取物，放于20mL螺口樣品瓶中，加入3.Og氯化鋼，用聚四氣乙締隔墊 密封，于40°C磁力攬拌器上平衡加熱15分鐘，用DVB/CAR/PDMS50/30um萃取頭頂空吸附 40分鐘，將萃取頭插入GC進(jìn)樣，解析5分鐘；內(nèi)標(biāo)物的量：2uL環(huán)己酬；色譜條件：色譜柱： HP-5MS;載氣：氮?dú)?血/min:進(jìn)樣口溫度：250°C，不分流進(jìn)樣；程序升溫：35°C保持5分鐘， W3°C/min升至180°C保持2分鐘，再W5°C/min升至240°C，保持2分鐘；質(zhì)譜條件：接口