一種鐵皮石斛的新型育苗方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種育苗方法，具體涉及一種鐵皮石斛的新型育苗方法，屬于農(nóng)業(yè)育苗技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]鐵皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo是我國的名貴中藥材，素有“中華仙草”、“藥中黃金”之美稱，是《中國藥典》2010年版收載的主要石斛品種，具有滋陰清熱、生津益胃、潤肺止咳、潤喉明目、延年益壽之功效?，F(xiàn)代研究表明，鐵皮石斛對治療咽喉疾病、白內(nèi)障、糖尿病和抑制腫瘤生長具有顯著療效。鐵皮石斛是生產(chǎn)石斛夜光丸、脈絡(luò)寧注射液、通塞脈片、清睛粉等數(shù)十種中成藥及保健品的必要原料，以鐵皮石斛加工成的楓斗在國內(nèi)外享有很高的聲譽(yù)。過去我國的鐵皮石斛藥材主要來自野生資源，過度采集使野生資源量急劇下降，瀕臨滅絕。同時鐵皮石斛采用傳統(tǒng)的分株繁殖法，繁殖速度比較慢，難以滿足日益增長的市場需求，因此通過組織培養(yǎng)技術(shù)，對鐵皮石斛進(jìn)行快速繁殖是保護(hù)和利用鐵皮石斛資源的必要途徑。
[0003]中國發(fā)明申請?zhí)朇N201310623199.9和中國發(fā)明申請?zhí)朇N201510069824.9分別公開了一種鐵皮石斛的種植方法，都是具體涉及到栽培基質(zhì)的配方和制作方法，均沒有涉及育苗方面的研究。
[0004]本發(fā)明通過實驗篩選出鐵皮石斛最佳外植體消毒方式、最佳培養(yǎng)基配方，最佳瓶苗移栽方式從而建立穩(wěn)定、高效的鐵皮石斛組織培養(yǎng)快繁技術(shù)體系，以便定時、定量、定質(zhì)出苗，滿足市場需求。該方法在國內(nèi)目前未見申請。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種鐵皮石斛的新型育苗方法，該方法培育出來的鐵皮石斛苗生長勢旺盛，苗色濃綠，莖粗壯呈紅紫色，產(chǎn)生新根多，根系發(fā)達(dá)，在生物量和各營養(yǎng)元素含量上也有明顯提升。
[0006]為了解決上述問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
(1)一種鐵皮石斛的新型育苗方法，育苗步驟包括外植體的消毒，無菌體系的建立，原球莖的誘導(dǎo)，原球莖增殖，原球莖分化，幼苗生根，瓶苗的移栽；具體技術(shù)方案為:選取生長旺盛、無病害的鐵皮石斛健康植株的一年生莖段為外植體，進(jìn)行消毒后建立無菌體系，用得到的無菌體系進(jìn)行原球莖的誘導(dǎo)培養(yǎng)30天后，將增殖的充分成熟的較大原球莖塊切割成直徑3?8 mm左右的小塊，接種在芽分化培養(yǎng)基上在無菌條件下進(jìn)行分化培養(yǎng)45天，將原球莖分化出的幼苗接種于生根培養(yǎng)基上，基本培養(yǎng)基為1/2 MS+15%土豆汁+ 2%AC，培養(yǎng)45天后，將生根瓶苗在移栽前放在溫室大棚中煉苗15?20天后即可移植栽培；該技術(shù)培育出來的鐵皮石斛苗生長勢旺盛，苗色濃綠，莖粗壯呈紅紫色，產(chǎn)生新根多，根系發(fā)達(dá)，在生物量和各營養(yǎng)元素含量上也有明顯提升；
(2)外植體的消毒，采用的消毒方法為70%乙醇處理30s后再用0.1% HgCl2處理1min ；
(3)無菌體系的建立是指將上述消毒過的外植體材料剪成每I節(jié)為一段，去掉藥物浸透的莖段部分，最后將莖段接種到培養(yǎng)基(MS +6-BA 2.5 mg/L)中，培養(yǎng)條件為溫度26°C，光照時間12 h，光照強(qiáng)度2 000 Lx ;
(4)原球莖的誘導(dǎo)是采用MS+ 2%活性炭(AC)的基本培養(yǎng)基和MS + 1.0mg/L 6-BA +
0.5mg/L NAA + 2g/L AC激素進(jìn)行誘導(dǎo)；
(5)原球莖增殖采用2，4-D和6-BA激素；
(6)原球莖分化采用的培養(yǎng)基為MS+ 6-BA 1.2 mg/L + IBA 0.2 mg/L + 2 g/L AC。
[0007]本發(fā)明具有如下優(yōu)點:
(1)該方法培育出來的鐵皮石斛苗生長勢旺盛，苗色濃綠，莖粗壯呈紅紫色，產(chǎn)生新根多，根系發(fā)達(dá)，在生物量和各營養(yǎng)元素含量上也有明顯提升；
(2)建立了鐵皮石斛的快繁技術(shù)體系，為鐵皮石斛的工業(yè)化生產(chǎn)奠定技術(shù)基礎(chǔ)。
【具體實施方式】
[0008]下面通過實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明，這些實施例僅用來說明本發(fā)明，并不限制本發(fā)明的范圍。
[0009]實施例1
一種鐵皮石斛的新型育苗方法，具體技術(shù)方案為:選取生長旺盛、無病害的鐵皮石斛健康植株的一年生莖段為外植體，采用的消毒方法為70%乙醇處理30s后再用0.1%取(:12處理lOmin，將上述消毒過的外植體材料剪成每I節(jié)為一段，去掉藥物浸透的莖段部分，最后將莖段接種到培養(yǎng)基(MS + 6-BA 2.5 mg/L)中，培養(yǎng)條件為溫度26°C，光照時間12 h，光照強(qiáng)度2 000 Lx，建立無菌體系，用得到的無菌體系采用MS + 2%活性炭(AC)的基本培養(yǎng)基和MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.5mg/L NAA + 2g/L AC激素進(jìn)行誘導(dǎo)原球莖培養(yǎng)30天后，將增殖的充分成熟的較大原球莖塊切割成直徑8 _左右的小塊，接種在芽分化培養(yǎng)基上在無菌條件下進(jìn)行分化培養(yǎng)45天，將原球莖分化出的幼苗接種于生根培養(yǎng)基上，基本培養(yǎng)基為1/2 MS + 15% 土豆汁+ 2%AC，培養(yǎng)45天后，將生根瓶苗在移栽前放在溫室大棚中煉苗15天后即可移植栽培；該技術(shù)培育出來的鐵皮石斛苗生長勢旺盛，苗色濃綠，莖粗壯呈紅紫色，產(chǎn)生新根多，根系發(fā)達(dá)，在生物量和各營養(yǎng)元素含量上也有明顯提升。
[0010]實施例2
一種鐵皮石斛的新型育苗方法，具體技術(shù)方案為:選取生長旺盛、無病害的鐵皮石斛健康植株的一年生莖段為外植體，采用的消毒方法為70%乙醇處理30s后再用0.1%取(:12處理lOmin，將上述消毒過的外植體材料剪成每I節(jié)為一段，去掉藥物浸透的莖段部分，最后將莖段接種到培養(yǎng)基(MS + 6-BA 2.5 mg/L)中，培養(yǎng)條件為溫度26°C，光照時間12 h，光照強(qiáng)度2 000 Lx，建立無菌體系，用得到的無菌體系采用MS + 2%活性炭(AC)的基本培養(yǎng)基和MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.5mg/L NAA + 2g/L AC激素進(jìn)行誘導(dǎo)原球莖培養(yǎng)30天后，將增殖的充分成熟的較大原球莖塊切割成直徑4_左右的小塊，接種在芽分化培養(yǎng)基上在無菌條件下進(jìn)行分化培養(yǎng)45天，將原球莖分化出的幼苗接種于生根培養(yǎng)基上，基本培養(yǎng)基為1/2 MS + 15%土豆汁+ 2%AC，培養(yǎng)45天后，將生根瓶苗在移栽前放在溫室大棚中煉苗15天后即可移植栽培；該技術(shù)培育出來的鐵皮石斛苗生長勢旺盛，苗色濃綠，莖粗壯呈紅紫色，產(chǎn)生新根多，根系發(fā)達(dá)，在生物量和各營養(yǎng)元素含量上也有明顯提升。
[0011]實施例3
一種鐵皮石斛的新型育苗方法，具體技術(shù)方案為:選取生長旺盛、無病害的鐵皮石斛健康植株的一年生莖段為外植體，采用的消毒方法為70%乙醇處理30s后再用0.1%取(:12處理lOmin，將上述消毒過的外植體材料剪成每I節(jié)為一段，去掉藥物浸透的莖段部分，最后將莖段接種到培養(yǎng)基(MS + 6-BA 2.5 mg/L)中，培養(yǎng)條件為溫度26°C，光照時間12 h，光照強(qiáng)度2 000 Lx，建立無菌體系，用得到的無菌體系采用MS + 2%活性炭(AC)的基本培養(yǎng)基和MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.5mg/L NAA + 2g/L AC激素進(jìn)行誘導(dǎo)原球莖培養(yǎng)30天后，將增殖的充分成熟的較大原球莖塊切割成直徑6_左右的小塊，接種在芽分化培養(yǎng)基上在無菌條件下進(jìn)行分化培養(yǎng)45天，將原球莖分化出的幼苗接種于生根培養(yǎng)基上，基本培養(yǎng)基為1/2 MS + 15%土豆汁+ 2%AC，培養(yǎng)45天后，將生根瓶苗在移栽前放在溫室大棚中煉苗15天后即可移植栽培；該技術(shù)培育出來的鐵皮石斛苗生長勢旺盛，苗色濃綠，莖粗壯呈紅紫色，產(chǎn)生新根多，根系發(fā)達(dá)，在生物量和各營養(yǎng)元素含量上也有明顯提升。
[0012]實施例4
一種鐵皮石斛的新型育苗方法，具體技術(shù)方案為:選取生長旺盛、無病害的鐵皮石斛健康植株的一年生莖段為外植體，采用的消毒方法為70%乙醇處理30s后再用0.1%取(:12處理lOmin，將上述消毒過的外植體材料剪成每I節(jié)為一段，去掉藥物浸透的莖段部分，最后將莖段接種到培養(yǎng)基(MS + 6-BA 2.5 mg/L)中，培養(yǎng)條件為溫度26°C，光照時間12 h，光照強(qiáng)度2 000 Lx，建立無菌體系，用得到的無菌體系采用MS + 2%活性炭(AC)的基本培養(yǎng)基和MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.5mg/L NAA + 2g/L AC激素進(jìn)行誘導(dǎo)原球莖培養(yǎng)30天后，將增殖的充分成熟的較大原球莖塊切割成直徑5_左右的小塊，接種在芽分化培養(yǎng)基上在無菌條件下進(jìn)行分化培養(yǎng)45天，將原球莖分化出的幼苗接種于生根培養(yǎng)基上，基本培養(yǎng)基為1/2 MS + 15%土豆汁+ 2%AC，培養(yǎng)45天后，將生根瓶苗在移栽前放在溫室大棚中煉苗15天后即可移植栽培；該技術(shù)培育出來的鐵皮石斛苗生長勢旺盛，苗色濃綠，莖粗壯呈紅紫色，產(chǎn)生新根多，根系發(fā)達(dá)，在生物量和各營養(yǎng)元素含量上也有明顯提升。
【主權(quán)項】
1.一種鐵皮石斛的新型育苗方法，其特征在于:包括如下步驟: 育苗步驟包括外植體的消毒，無菌體系的建立，原球莖的誘導(dǎo)，原球莖增殖，原球莖分化，幼苗生根，瓶苗的移栽；具體方法為:選取生長旺盛、無病害的鐵皮石斛健康植株的一年生莖段為外植體，進(jìn)行消毒后建立無菌體系，用得到的無菌體系進(jìn)行原球莖的誘導(dǎo)培養(yǎng)30天后，將增殖的充分成熟的較大原球莖塊切割成直徑3?8 _左右的小塊，接種在芽分化培養(yǎng)基上在無菌條件下進(jìn)行分化培養(yǎng)45天，將原球莖分化出的幼苗接種于生根培養(yǎng)基上，基本培養(yǎng)基為1/2 MS + 15% 土豆汁+ 2%AC，培養(yǎng)45天后，將生根瓶苗在移栽前放在溫室大棚中煉苗15?20天后即可移植栽培。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛的新型育苗方法，其特征在于:所述的外植體的消毒，采用的消毒方法為70%乙醇處理30s后再用0.1% HgCl2處理lOmin。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛的新型育苗方法，其特征在于:所述的無菌體系的建立是指將上述消毒過的外植體材料剪成每1節(jié)為一段，去掉藥物浸透的莖段部分，最后將莖段接種到培養(yǎng)基:MS + 6-BA 2.5 mg/L中，培養(yǎng)條件為溫度26°C，光照時間12 h，光照強(qiáng)度2000 Lxo4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛的新型育苗方法，其特征在于:所述的原球莖的誘導(dǎo)是采用MS + 2%活性炭AC的基本培養(yǎng)基和MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.5mg/L NAA +2g/L AC激素進(jìn)行誘導(dǎo)。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛的新型育苗方法，其特征在于:所述的原球莖增殖采用2，4-D和6-BA激素。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛的新型育苗方法，其特征在于:所述的原球莖分化采用的培養(yǎng)基為 MS + 6-BA 1.2 mg/L + IBA 0.2 mg/L + 2 g/L AC。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種鐵皮石斛的新型育苗方法，屬于農(nóng)業(yè)育苗技術(shù)領(lǐng)域，育苗步驟包括外植體的消毒，無菌體系的建立，原球莖的誘導(dǎo)，原球莖增殖，原球莖分化，幼苗生根，瓶苗的移栽；具體技術(shù)方案為：選取鐵皮石斛健康植株為外植體，進(jìn)行消毒后建立無菌體系，用得到的無菌體系進(jìn)行原球莖的誘導(dǎo)培養(yǎng)30天后，將增殖的充分成熟的較大原球莖塊切割成小塊，接種在芽分化培養(yǎng)基上在無菌分化培養(yǎng)45天，將原球莖分化出的幼苗接種于生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)45天后，將生根瓶苗在移栽前放在溫室大棚中煉苗15～20天后即可移植栽培；該技術(shù)培育出來的鐵皮石斛苗生長勢旺盛，苗色濃綠，莖粗壯呈紅紫色，產(chǎn)生新根多，根系發(fā)達(dá)，在生物量和各營養(yǎng)元素含量上也有明顯提升。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105284625
【申請?zhí)枴緾N201510872034
【發(fā)明人】劉楚玲
【申請人】劉楚玲
【公開日】2016年2月3日
【申請日】2015年12月3日