解剖學(xué)內(nèi)臟標(biāo)本的長期保存方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種解剖學(xué)內(nèi)臟標(biāo)本的保存方法。更具體地說，本發(fā)明涉及一種可長 期維持內(nèi)臟原有外觀形態(tài)且于人體無刺激性的解剖學(xué)內(nèi)臟標(biāo)本的長期保存方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 人體解剖學(xué)是研究人體形態(tài)結(jié)構(gòu)的一門科學(xué)，其與生理學(xué)、病理學(xué)、藥理學(xué)、病原 微生物學(xué)等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)及大多數(shù)臨床醫(yī)學(xué)關(guān)系密切，在解剖學(xué)中標(biāo)本作為一種直觀的教學(xué)工 具發(fā)揮著重要的作用。
[0003]目前在解剖學(xué)標(biāo)本的防腐固定保存液中，福爾馬林溶液是常用的一種化學(xué)試劑， 其穿透力強，對器官組織的固定硬化程度高，可有效保持標(biāo)本的原有形態(tài)，并且殺菌能力 強，可抑制霉菌的生長。但福爾馬林溶液也有著明顯的缺陷，其所固定保存的組織標(biāo)本易發(fā) 硬變脆，肌肉纖維易被拉斷，不利于后續(xù)的解剖研究操作，而且還有強烈的刺激性，對眼結(jié) 膜、呼吸道粘膜及經(jīng)常接觸的皮膚均有一定的損害，直接危害著解剖教學(xué)人員的身體健康。
[0004] 此外，在內(nèi)臟組織尤其是含氣組織標(biāo)本的制作過程中，內(nèi)臟內(nèi)部空氣的殘留，會使 組織結(jié)構(gòu)得不到徹底的固定而導(dǎo)致的后期組織結(jié)構(gòu)變形問題，影響了對內(nèi)臟組織正常形態(tài) 的研究和觀察。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 作為各種廣泛且細(xì)致的研究和實驗的結(jié)果，本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在解剖學(xué) 內(nèi)臟標(biāo)本的制作過程中，間歇性的在一定真空度下進(jìn)行操作處理，并在含有戊二醛和多賴 氨酸的保存液中進(jìn)行長期保存，可有效保持內(nèi)臟輪廓結(jié)構(gòu)的清晰完好，無皺縮、膨脹、發(fā)霉 等問題?；谶@種發(fā)現(xiàn)，完成了本發(fā)明。
[0006] 本發(fā)明的一個目的是解決至少上述問題和/或缺陷，并提供至少后面將說明的優(yōu) 點。
[0007] 本發(fā)明還有一個目的是通過提供一種解剖學(xué)內(nèi)臟標(biāo)本的長期保存方法，提高標(biāo)本 的保存時間和保存質(zhì)量，以維持標(biāo)本的原始狀態(tài)，利于后期內(nèi)臟形態(tài)學(xué)和組織學(xué)的研究和 觀察。
[0008] 為了實現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點，提供一種解剖學(xué)內(nèi)臟標(biāo)本的長期保 存方法，其包括如下步驟：
[0009] 步驟1 :將內(nèi)臟經(jīng)動脈灌水沖洗干凈；
[0010] 步驟2 :對所述內(nèi)臟動脈灌注并浸泡在其2~3倍體積的預(yù)處理液中，0. 04~ 0. 08Mpa真空度下處理10~15min后，在常壓下浸泡3~5h，其中所述預(yù)處理液包括40~ 50wt%的乙醇、5~10wt%的乙酸、3~6wt的甘油、3~5wt%的硝酸鉀、30~50wt%的水，
[0011] 使用乙醇對內(nèi)臟標(biāo)本進(jìn)行固定，乙醇組織滲透能力較強，固定迅速，但乙醇對組織 有一定的收縮性，乙酸的配合使用則可有效避免這一現(xiàn)象，以保持組織標(biāo)本外觀的原有狀 態(tài)，在預(yù)處理液浸泡的過程中進(jìn)行真空處理，用以充分排出內(nèi)臟內(nèi)部的空氣，在負(fù)壓狀態(tài)下 將空氣替換為預(yù)處理液，保證內(nèi)臟內(nèi)部空間與預(yù)處理液的成分的充分接觸，提高固定效果， 此外硝酸鉀的加入進(jìn)一步提高了預(yù)處理液的滲透能力，提高了固定效果，甘油的加入則提 高了內(nèi)臟標(biāo)本的柔韌性，降低了由于固化對內(nèi)臟標(biāo)本帶來的硬化副作用；
[0012] 步驟3 :將所述預(yù)處理液用清水沖洗干凈，經(jīng)動脈灌注保存液進(jìn)入所述內(nèi)臟，并將 所述內(nèi)臟浸泡在所述保存液中，每間隔2h于0. 02~0. 05Mpa真空度下處理20~30min，真 空處理的總次數(shù)為2~3次，然后將容納所述內(nèi)臟和保存液的容器密封放置，
[0013]其中，所述保存液包括1~5wt的戊二醛、0. 5~2wt%的e- e-聚賴氨酸、1~2wt%的乳酸鈉、0? 5~1. 5wt%的葡萄糖酸鈉、2~4wt%的丙二醇及85~95wt%的水，
[0014]其中，戊二醛對內(nèi)臟組織穿透能力較強，且有很好的殺菌作用，在解剖內(nèi)臟標(biāo)本的 防腐保存方面性能優(yōu)越，但其有一定的自聚現(xiàn)象，一般放置2個月左右，其抑菌效果即開始 出現(xiàn)明顯的下降，e _聚賴氨酸的加入可起到協(xié)同增效的作用，其與戊二醛可發(fā)生適當(dāng)?shù)慕?聯(lián)，明顯改善體系的穩(wěn)定性，
[0015] 此外，戊二醛并不破壞內(nèi)臟細(xì)胞膜的半透膜特性，對細(xì)胞膜的固定效果差，而 e _聚賴氨酸可以在一定程度上破壞細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，提高其滲透性，且并不改變細(xì)胞的形 狀，從而有利于戊二醛對細(xì)胞膜的固定作用，提高內(nèi)臟標(biāo)本的保存時間及其外觀原始狀態(tài) 的維持，
[0016] 此外，乳酸鈉的加入可以提高e-聚賴氨酸的抑菌效果，葡萄糖酸鈉的加入可有 效抑制內(nèi)臟標(biāo)本保存時的膨脹，丙^醇的添加可進(jìn)一步提尚體系的穩(wěn)定性，保持標(biāo)本色彩 的自然狀態(tài)，
[0017] 此外，將內(nèi)臟標(biāo)本浸泡在所述保存液中后，首先在一定真空度下處理2~3次， 由于內(nèi)臟經(jīng)預(yù)處理固定后，其內(nèi)部的空隙已基本成型，所以僅需在較低的真空度0.02~ 0. 05Mpa下，即可使內(nèi)臟充分浸潤在預(yù)處理液中，利于解剖內(nèi)臟標(biāo)本的長期保存。
[0018] 優(yōu)選的是，其中，所述內(nèi)臟共經(jīng)步驟二預(yù)處理3次，每次預(yù)處理前均更換新鮮的預(yù) 處理液，以提高固定效果，利于長期保存。
[0019] 優(yōu)選的是，其中，所述e -聚賴氨酸的分子量為3200~4200,優(yōu)選3800~4000， 當(dāng)聚賴氨酸的聚合度過低，即分子量低于2500時，其與戊二醛的協(xié)同殺菌能力即發(fā)生明顯 下降，影響內(nèi)臟標(biāo)本的長期保存。
[0020] 優(yōu)選的是，其中，容納所述內(nèi)臟和保存液的容器置于10~15°c(優(yōu)選12°C)的環(huán) 境中，以維持內(nèi)臟細(xì)胞結(jié)構(gòu)的良好形態(tài)。
[0021] 優(yōu)選的是，其中，所述保存液每18~22個月進(jìn)行更換一次，以保證保存的效果。
[0022] 本發(fā)明至少包括以下有益效果：
[0023] (1)乙醇和乙酸配合使用對內(nèi)臟標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，組織滲透能力較強，固定迅速， 內(nèi)臟組織無收縮性，此外硝酸鉀的加入進(jìn)一步提高了預(yù)處理液的滲透能力，提高了固定效 果，甘油的加入提高了內(nèi)臟標(biāo)本的柔韌性，降低了由于固化對內(nèi)臟標(biāo)本帶來的硬化副作 用；
[0024] (2)保存液中戊二醛和e-聚賴氨酸配合使用，明顯改善了保存體系的穩(wěn)定性及 抑菌效果，而且提高了單一戊二醛對細(xì)胞膜的固定作用，有效提高內(nèi)臟標(biāo)本的保存時間及 其外觀原始狀態(tài)的維持；
[0025] (3)在內(nèi)臟標(biāo)本的制作過程中，間歇性的進(jìn)行真空處理，以充分排出內(nèi)臟內(nèi)部的空 氣，在負(fù)壓狀態(tài)下將空氣替換為預(yù)處理液或保存液，利于內(nèi)臟在長期保存過程中輪廓結(jié)構(gòu) 完好狀態(tài)的維持；
[0026] (4)本發(fā)明方法簡單易行，預(yù)處理液和保存液均液無刺激性，于操作人員無害，且 保存的內(nèi)臟標(biāo)本色澤自然，質(zhì)地柔軟，無霉變現(xiàn)象，制作得到的標(biāo)本質(zhì)量高。
[0027] 本發(fā)明的其它優(yōu)點、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本 發(fā)明的研究和實踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。
【具體實施方式】
[0028] 下面結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照 說明書文字能夠據(jù)以實施。
[0029] 應(yīng)當(dāng)理解，本文所使用的諸如"具有"、"包含"以及"包括"術(shù)語并不配出一個或多 個其它元件或其組合的存在或添加。
[0030] 〈實例 1〉
[0031] -種解剖學(xué)內(nèi)臟標(biāo)本的長期保存方法，其包括如下步驟：
[0032] 步驟1 :將內(nèi)臟經(jīng)動脈灌水沖洗干凈；
[0033] 步驟2 :對所述內(nèi)臟動脈灌注并浸泡在其2倍體積的預(yù)處理液中，0. 04Mpa真空度 下處理lOmin后，在常壓下浸泡3h，然后更換新鮮的預(yù)處理液重復(fù)本步驟3次，其中所述預(yù) 處理液包括40wt%的乙醇、8wt%的甘油、5wt%的硝酸鉀、47wt%的水；
[0034] 步驟3:將所述預(yù)處理液用清水沖洗干凈，將保存液經(jīng)動脈灌注進(jìn)入所述內(nèi)臟，然 后將所述內(nèi)臟浸泡在所述保存液中，每間隔2h于0. 02Mpa真空度下處理20min，真空處理的 總次數(shù)為2次，然后將容納所述內(nèi)臟和保存液的容器密封，置于10°C的環(huán)境中，所述保存液 每18個月進(jìn)行更換一次，其中，所述保存液包括lwt%的戊二醛、0. 5wt%的e-聚賴氨酸、 2wt%的乳酸鈉、1. 5wt%的葡萄糖酸鈉、4wt%的丙二醇及91wt%的水，其中所述e -聚賴 氨酸的分子量為3200。
[0035] 〈實例 2〉
[0036] -種解剖學(xué)內(nèi)臟標(biāo)本的長期保存方法，其包括如下步驟：
[0037] 步驟1 :將內(nèi)臟經(jīng)動脈灌水沖洗干凈；
[0038] 步驟2 :對所述內(nèi)臟動脈灌注并浸泡在其3倍體積的預(yù)處理液中，0. 08Mpa真空度 下處理15min后，在常壓下浸泡5h，然后更換新鮮的預(yù)處理液重復(fù)本步驟3次，其中所述預(yù) 處理液包括50wt%的乙醇、5wt%的甘油、5wt%的硝酸鉀、40wt%的水；
[0039] 步驟3:將所述預(yù)處理液用清水沖洗干凈，將保存液經(jīng)動脈灌注進(jìn)入所述內(nèi)臟，然 后將所述內(nèi)臟浸泡在所述保存液中，每間隔2h于0. 05Mpa真空度下處理30min，真空處理 的總次數(shù)為3次，然后將容納所述內(nèi)臟和保存液的容器密封，置于15°C的環(huán)境中，所述保存 液每22個月進(jìn)行更換一次，其中，所述保存液包括5wt%的戊二醛、3wt%的e-聚賴氨酸、 lwt%的乳酸鈉、0. 5wt%的葡萄糖酸鈉、2wt%的丙二醇及88. 5wt%的水，其中所述e -聚 賴氨酸的分子量為4200。
[0040] 〈實例 3〉
[0041] -種解剖學(xué)內(nèi)臟標(biāo)本的長期保存方法，其包括如下步驟：
[0042] 步驟1 :將內(nèi)臟經(jīng)動脈灌水沖洗干凈；
[0043] 步驟2 :對所述內(nèi)臟動脈灌注并浸泡在其3倍體積的預(yù)處理液中，0. 05Mpa真空度 下處理12min后，在常壓下浸泡4h，然后更換新鮮的預(yù)處理液重復(fù)本步驟3次，其中所述預(yù) 處理液包括45wt%的乙醇、7wt%的甘油、4wt%的硝酸鉀、44wt%的水；<