一種用于增加十二卷屬多肉植物組培繁殖速度的專用培養(yǎng)基及組培方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及生物擴繁領域，主要是涉及一種用于增加十二卷屬多肉植物組培繁殖速度的專用培養(yǎng)基及組培方法。
【背景技術】
[0002]十二卷屬(Haworthia Dural)是一類多年生草本小型多肉植物，隸屬百合科蘆薈族，為紀念19世紀初英國植物學家Adrian Hardn Haworth而得名，該屬按植株和葉的形態(tài)，分為硬葉類和軟葉類二類。十二卷屬植物原產地大多在南非，我國沙漠干燥地區(qū)也有野生種類分布，現今在世界各地種植廣泛。本屬約分為20個系，150多各種，園藝變種和雜交品種繁多，價格從幾元到上萬元不等。十二卷屬植物葉形富于變化，外觀美麗，具有很高的觀賞價值，很多種類習性強健，栽培要求不高，是我國目前最受歡迎的室內觀賞植物之一。
[0003]十二卷屬植物傳統繁殖方法主要有扦插、分株及播種等。扦插成活率極低，適合植物愛好者對植株進行小規(guī)模繁殖，不適用于商品化的大規(guī)模繁殖。分株是較為常用的十二卷屬傳統繁殖方法，但每年繁殖量僅3-5株，名貴品種更少，繁殖率極低。播種法受到十二卷屬種子數量極少的限制，同時，種子發(fā)芽率又極低，需2年甚至更長時間才能夠長成，且由于為有性繁殖，性狀不穩(wěn)定，不符合商業(yè)生產的要求。上述因素使得十二卷屬植物價格居高不下，普通百姓消費不起。
[0004]組培繁殖方法是近年來研究和常用的十二卷屬植物繁殖方法，能夠獲得性狀穩(wěn)定，無菌的幼苗，較傳統繁殖方法，繁殖率有所提高，但仍存在組培繁殖速度慢，成活率不高，增值量不多的問題。為了解決上述十二卷屬植物組培繁殖率低的問題，本發(fā)明提供了一種增加十二卷屬多肉植物組培繁殖速度的培養(yǎng)基及組培方法，能夠顯著提高十二卷屬植物的擴繁速度，在短期內獲得大量十二卷屬多肉植物植株幼苗。

【發(fā)明內容】

[0005]為解決上述【背景技術】中存在的組培繁殖速率低的問題，本發(fā)明提供了一種用于增加十二卷屬多肉植物組培繁殖速度的專用培養(yǎng)基，培養(yǎng)基成分為:基礎培養(yǎng)基和低劑量的2，4-D ;所述基礎培養(yǎng)基成分為:MS20g、卡拉膠lg、6-BA(6-芐氨基腺嘌呤)0.lmg、KT (氯吡脲)0.5mgo，所述2，4-D為2，4- 二氯苯氧乙酸，含量范圍是0.1-0.25mg/L。
[0006]—種用于增加十二卷屬多肉植物組培繁殖速度的專用培養(yǎng)基組培方法是通過如下步驟實現的:
[0007](I)外植體的選擇和消毒
[0008]取生長發(fā)育很好的待組培的植株的葉片(或側芽)，進行消毒，切成I X Icm2大小，背面劃傷的葉片，待接種。
[0009](2)接種及無菌系的建立
[0010]用無菌攝子將切好的葉片接種到無菌培養(yǎng)基上(側芽直接斜插入，頂端向上)，葉片平放在培養(yǎng)基面上，劃過傷口的那側向下接觸培養(yǎng)基，1-2周后外置體迅速膨大，部分邊緣分化出小苗，獲得無菌系。
[0011](3)轉接與擴繁
[0012]將獲得的無菌系，切成小段，接種在本發(fā)明的增殖培養(yǎng)基上，進行增殖培養(yǎng)，2-3周后，將大的植株單個切下，放入壯苗培養(yǎng)基或生根培養(yǎng)基上，繼續(xù)培養(yǎng)2-3周，可將植株取出，洗出培養(yǎng)基，放入陰涼處晾干1-2天，移栽到培養(yǎng)土中，即可獲得十二卷類植株幼苗。
[0013]所述步驟(I)中的消毒方法為:將選好的葉片或側芽用清水中沖洗，再放入質量含量約為5%的多菌靈溶液中浸泡10-15分鐘，再用清水沖洗干凈；在超凈工作臺上放入無菌瓶中用1%生汞處理3-5分鐘(根據幼嫩程度和污染程度決定浸泡時間長短)，倒出生汞，用冷卻的無菌水沖洗3-6次。葉片(或側芽)切割過程需放到無菌培養(yǎng)皿上，并采用無菌刀片。
[0014]所述步驟(2)中無菌培養(yǎng)基置于無菌培養(yǎng)基瓶中，其成分為:MS20g、卡拉膠lg、6-BA0.lmg、KT0.5mg中無菌系建立的培養(yǎng)條件是:將接種好的無菌培養(yǎng)基瓶抒緊，放于光照培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，控制培養(yǎng)箱的溫度為25攝氏度，光照時間為16小時/天。
[0015]所述步驟(3)中的增殖培養(yǎng)過程可重復操作，即可將增殖出的組織或植株作為無菌系接種于本發(fā)明的增殖培養(yǎng)基上，能夠在短期內獲得大量的十二卷類幼苗。
[0016]與現有技術相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于:
[0017]1、在多肉植物組培繁殖過程中，首次在培養(yǎng)基中添加了低劑量的2，4-D，在增殖培養(yǎng)階段，同時會產生大量的芽和愈傷組織，增繁量為不添加2，4_D的培養(yǎng)基時的1.5-2.5倍，為以后愈傷組織的擴繁和芽的分化提供了大量的基礎材料；
[0018]2、本發(fā)明能夠顯著增加十二卷屬多肉植物的繁殖速度，為降低整個組培成本，提高產品上市速度，奠定了堅實的基礎。
【具體實施方式】
[0019]實施例1:
[0020]1.外植體的選擇和消毒:
[0021]取生長發(fā)育良好的待組培植株的葉片用清水中沖洗，再放入質量含量約為5%的多菌靈溶液中浸泡10-15分鐘，再用清水沖洗干凈。
[0022]在超凈工作臺上放入無菌瓶中倒I %氯化汞溶液處理3-5分鐘(根據幼嫩程度和污染程度決定浸泡時間長短)，倒出氯化汞溶液，用冷卻的無菌水沖洗3-6次，放到無菌培養(yǎng)皿，用無菌刀片切成I X Icm2大小的葉片，并將葉片背面劃傷，待接種。
[0023]2.接種及無菌系的建立:
[0024]用無菌攝子將切好的葉片，平放在無菌培養(yǎng)基面上，劃過傷口的那側向下接觸培養(yǎng)基，擰緊無菌培養(yǎng)基瓶口，做好記號，放入光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，調節(jié)溫度為25攝氏度，光照時間為16小時/天，培養(yǎng)1-2周，外植體迅速膨大，產生愈傷組織，并在部分邊緣分化出幼苗。
[0025]3.轉接與擴繁:
[0026]將分化的外植體取出，切成小段，接種在本發(fā)明的專用培養(yǎng)基上，其中2，4-D含量為0.lmg/L，繼續(xù)培養(yǎng)2-3周后，能夠獲得大量的愈傷組織和無菌叢生芽，增殖量為不添加2，4-D的培養(yǎng)基的1.7倍。重復以上過程，愈傷組織及叢生芽數量迅速增加。此時選取大的芽體單個切下，放入壯苗培養(yǎng)基或生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)2-3周后，將植株取出，洗去培養(yǎng)基，放入陰涼處晾干1-2天，即可移栽到培養(yǎng)土中，獲得十二卷屬多肉植物幼苗。
[0027]實施例2
[0028]1.外植體的選擇和消毒:
[0029]取生長發(fā)育良好的待組培植株的葉片用清水中沖洗，再放入質量含量約為5%的多菌靈溶液中浸泡10-15分鐘，再用清水沖洗干凈。
[0030]在超凈工作臺上放入無菌瓶中倒I %氯化汞溶液處理3-5分鐘(根據幼嫩程度和污染程度決定浸泡時間長短)，倒出氯化汞溶液，用冷卻的無菌水沖洗3-6次，放到無菌培養(yǎng)皿，用無菌刀片切成I X Icm2大小的葉片，并將葉片背面劃傷，待接種。
[0031]2.接種及無菌系的建立:
[0032]用無菌攝子將切好的葉片，平放在無菌培養(yǎng)基面上，劃過傷口的那側向下接觸培養(yǎng)基，擰緊無菌培養(yǎng)基瓶口，做好記號，放入光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，調節(jié)溫度為25攝氏度，光照時間為16小時/天，培養(yǎng)1-2周，外植體迅速膨大，產生愈傷組織，并在部分邊緣分化出幼苗。
[0033]3.轉接與擴繁:
[0034]將分化的外植體取出，切成小段，接種在本發(fā)明的專用培養(yǎng)基上，其中2，4-D含量為0.15mg/L，繼續(xù)培養(yǎng)2-3周后，能夠獲得大量的愈傷組織和無菌叢生芽，增殖量為不含有2，4-0的1.9倍。重復以上過程，叢生芽數量迅速增加。此時選取大的芽體單個切下，放入壯苗培養(yǎng)基或生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)2-3周后，將植株取出，洗去培養(yǎng)基，放入陰涼處晾干1-2天，即可移栽到培養(yǎng)土中，獲得十二卷屬多肉植物幼苗。
[0035]實施例3
[0036]1.外植體的選擇和消毒:
[0037]取生長發(fā)育良好的待組培植株的葉片用清水中沖洗，再放入質量含量約為5%的多菌靈溶液中浸泡10-15分鐘，再用清水沖洗干凈。
[0038]在超凈工作臺上放入無菌瓶中倒I %氯化汞溶液處理3-5分鐘(根據幼嫩程度和污染程度決定浸泡時間長短)，倒出氯化汞溶液，用冷卻的無菌水沖洗3-6次，放到無菌培養(yǎng)皿，用無菌刀片切成I X Icm2大小的葉片，并將葉片背面劃傷，待接種。