一種賓王菇分子鑒定及菌種生產(chǎn)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食用菌分類及菌種制作工藝技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種賓王菇分子鑒定及菌種生產(chǎn)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]現(xiàn)階段賓王菇的分類僅局限于從形態(tài)和化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行鑒定，結(jié)論為賓王菇屬于傘菌目，白蘑科，離褶傘屬的煙色離褶傘，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，賓王菇不單單為煙色離褶傘，還有荷葉離褶傘，從而更加明確了賓王菇的分類地位；現(xiàn)有技術(shù)的母種菌絲長滿18X180mm的試管斜面培養(yǎng)基，需要15?18天；原種一般采用500ml罐頭瓶草炭與玉米芯配方制作，培養(yǎng)一般需要45?60天；栽培種采用750ml罐頭瓶制備，大約需要培養(yǎng)45?60天才能長滿，污染率高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于克服上述技術(shù)存在的缺陷，提供一種賓王菇分子鑒定及菌種生產(chǎn)方法，通過分子鑒定手段，明確賓王菇系統(tǒng)分類學(xué)地位；通過改變賓王菇菌絲生長的環(huán)境條件，來加快賓王菇菌絲生長速度，縮短制種周期，解決賓王菇制種過程中因培養(yǎng)時間過長而導(dǎo)致污染率高的問題，從而提高賓王菇的生物學(xué)轉(zhuǎn)化率。
[0004]其具體技術(shù)方案為:
[0005]一種賓王菇分子鑒定及菌種生產(chǎn)方法，包括以下步驟:
[0006]I)分子鑒定:ITS擴增一產(chǎn)物測序-Blast同源數(shù)據(jù)比較一_確定分類地位；
[0007]2)母種:外源添加物香蕉對賓王菇母種菌絲生長的影響試驗-培養(yǎng)條件對賓王菇母種菌絲生長的影響試驗，得出培養(yǎng)基配方:土豆100g，香蕉100g，葡萄糖20g，牛肉膏4g，瓊脂20g，水100ml ;培養(yǎng)條件為溫度25°C?27°C，PH值為6?7。
[0008]3)原種:通過對液體培養(yǎng)基配方篩選研宄:得出麥粒70g浸汁(浸泡12小時后，煮沸過濾取其汁液)，土豆200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀0.3g，硫酸鎂0.15g，牛肉膏3g，水100ml ；
[0009]4)栽培種:培養(yǎng)基配方:麥粒10 %，草炭40 %，玉米芯或秸桿30 %，麥麩18 %，石膏％，石灰1% ;
[0010]5)制種工藝:母種-原種-栽培種；
[0011]6)出菇培養(yǎng)基配方:麥粒10%，草炭40%，玉米芯或秸桿30%，麥麩18%，石膏％，石灰1%。
[0012]優(yōu)選地，所述浸汁麥粒的制備方法為:麥粒80g浸泡12小時后，煮沸過濾取其汁液。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為:
[0014]1.通過分子鑒定，明確賓王菇的分類地位，更加有利于摸清賓王菇的生物學(xué)特性，提高制種成功率及生物學(xué)轉(zhuǎn)化率。
[0015]2.通過母種培養(yǎng)條件及添加物的研宄，發(fā)現(xiàn)賓王菇在土豆100g，香蕉100g，葡萄糖20g，牛肉膏4g，瓊脂20g，水100ml的培養(yǎng)基上，27°C培養(yǎng)，11天左右就能長滿試管，污染率為0，培養(yǎng)時間縮短為5?8天；
[0016]3.通過原種由固體菌種轉(zhuǎn)化為液體菌種，在對其培養(yǎng)基配方進(jìn)行改良，發(fā)現(xiàn)賓王菇在麥粒浸汁培養(yǎng)基上，26°C，PH值為7.5的條件下培養(yǎng)，10?13天菌絲布滿液體培養(yǎng)基內(nèi)，污染率降低5?10%，培養(yǎng)時間縮短為30?45天；
[0017]4.通過栽培種培養(yǎng)基配方的研宄，750ml罐頭瓶制備栽培種，30?40天即可長滿菌瓶，比原有技術(shù)縮短培養(yǎng)時間10?15天，污染率降低10?15%。
[0018]4.利用栽培種的培養(yǎng)基配方栽培出菇，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率由以前的54%提高到60%。
【具體實施方式】
[0019]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步詳細(xì)地說明。
[0020]2012年預(yù)計生產(chǎn)賓王菇菌種2000袋，3月5日開始接母種，3月11日接液體原種，3月24日接栽培種，到4月30日菌絲長滿菌袋，從母種到栽培種共用時間56天，比常規(guī)接種方法縮短50多天，母種污染率為0，原種污染率0，栽培種污染率僅為3%，利用栽培種的培養(yǎng)基配方栽培出菇，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率由以前的54%提高到60%。
[0021]通過本發(fā)明，使母種菌絲生長速度大幅提高，10天長滿試管斜面；原種由固體菌種改為液體菌種，優(yōu)化培養(yǎng)基配方，10?13天即可制作好；栽培種30?40天菌絲長滿菌瓶，從而大大縮短制種周期，減少因培養(yǎng)時間過長而造成的污染率。首次將分子標(biāo)記技術(shù)應(yīng)用到賓王菇分類上，通過ITS測序，明確賓王菇的分類地位，從而更加有針對性地研宄賓王菇的種性，有利于解決賓王菇生物學(xué)轉(zhuǎn)化率低的問題；通過改變賓王菇培養(yǎng)基配方展開對賓王菇生物學(xué)特性的研宄，從而解決菌絲生長緩慢的問題，縮短制種周期，提高賓王菇制種成功率。
[0022]以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實施方式】，本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，可顯而易見地得到的技術(shù)方案的簡單變化或等效替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種賓王菇分子鑒定及菌種生產(chǎn)方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)分子鑒定:ITS擴增、產(chǎn)物測序-Blast同源數(shù)據(jù)比較、確定分類地位； 2)母種:培養(yǎng)基配方為:土豆100g，香蕉100g，葡萄糖20g，牛肉膏4g，瓊脂20g，水100ml ;培養(yǎng)條件為溫度25°C?27°C，PH值為6?7 ; 3)原種:液體培養(yǎng)基配方為:浸汁麥粒70g，土豆200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀0.3g，硫酸鎂0.15g，牛肉膏3g，水100ml ； 4)栽培種:培養(yǎng)基配方為:麥粒10%，草炭40%，玉米芯或秸桿30%，麥麩18%，石膏％，石灰1% ; 5)制種工藝:母種、原種、栽培種；6)出菇培養(yǎng)基配方:麥粒10%，草炭40 %，玉米芯或秸桿30 %，麥麩18 %，石膏％，石灰
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的賓王菇分子鑒定及菌種生產(chǎn)方法，其特征在于，所述浸汁麥粒的制備方法為:麥粒80g浸泡12小時后，煮沸過濾取其汁液。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種賓王菇分子鑒定及菌種生產(chǎn)方法，該方法包括以下步驟：1)分子鑒定：ITS擴增、產(chǎn)物測序-Blast同源數(shù)據(jù)比較、確定分類地位；2)母種：外源添加物對賓王菇母種菌絲生長的影響試驗-培養(yǎng)條件，對賓王菇母種菌絲生長的影響試驗，得出：椰汁+PDA培養(yǎng)基配方；3)原種：通過對液體培養(yǎng)基配方篩選研究：得出麥粒浸汁，土豆200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀0.3g，硫酸鎂0.15g，牛肉膏3g；4)栽培種；5)制種工藝；6)出菇培養(yǎng)基配方。本發(fā)明解決了賓王菇制種過程中因培養(yǎng)時間過長而導(dǎo)致污染率高的問題，從而提高賓王菇的生物學(xué)轉(zhuǎn)化率。
【IPC分類】C05G3-00, A01G1-04
【公開號】CN104521560
【申請?zhí)枴緾N201410803416
【發(fā)明人】劉俊杰, 宋 瑩, 張士義, 劉巖巖, 李宏亮, 劉娜, 張敏, 劉國宇, 李紅
【申請人】遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2014年12月12日