專利名稱:一種冬蟲夏草低海拔人工培殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種真菌培殖方法，更具體的說(shuō)涉及冬蟲夏草低海抜人工培殖方法。技術(shù)背景
冬蟲夏草[Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc.]別名蟲草、冬蟲草、夏草冬蟲。根據(jù)最近的分類系統(tǒng)，冬蟲夏草隸屬于真菌界(Fungi)、子囊菌門(Ascomycota)、子囊菌綱(Ascomycetes)、糞殼菌亞綱(Sordariomycetidae)、肉座菌目、麥角菌科(Clavicipifaceae)、蟲草屬(Cordyceps)。是麥角菌科真菌冬蟲夏草菌[Cordycepssinensis (Berk.) Sacc.]寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復(fù)合體。人工繁殖和飼養(yǎng)蝙蝠娥幼蟲是冬蟲夏草人工培育的重要環(huán)節(jié)。迄今報(bào)道的蝙蝠蛾昆蟲超過(guò)60種，其中云南20種，西藏17種，四川12種，青海9種，甘肅9種。蝙蝠蛾幼蟲為雜食昆蟲，在土壤中營(yíng)隧道式穴居生活，以植物嫩根為食物。不同種類的蝙蝠蛾在生物學(xué)和生態(tài)學(xué)上雖然有一定的差異，但其特點(diǎn)是需要經(jīng)歷較漫長(zhǎng)的幼蟲期，并具有明顯的世代交替現(xiàn)象，蝙蝠蛾具有典型的垂直分布特征，其分布下限在緯度偏南地區(qū)海拔3000m，而在緯度偏北地區(qū)海拔2500m ;分布上限為海拔5100m ;最適合的生長(zhǎng)海拔3600_5000m ;最適宜的生長(zhǎng)土壤為高寒草甸和高寒灌木叢土。由于蝙蝠蛾完成ー個(gè)生命周期需經(jīng)歷卵、幼蟲、蛹、成蟲四個(gè)階段，在毎年10月至次年4月凍土期蝙蝠蛾幼蟲在土壌中處于休眠狀態(tài)，蝙蝠蛾幼蟲需要經(jīng)歷6-8齡的生長(zhǎng)發(fā)育期才能化蛹，具體因種類而異，如玉樹蝙蝠蛾幼蟲需要996天，康定蝙蝠蛾越1000天，貢嘎蝙蝠蛾875-1040天，而且終年可以在土中找到不同齡起的蝙蝠蛾幼蟲。自然環(huán)境中蝙蝠蛾屬昆蟲的繁育受到生態(tài)地理分布、食物、植被、土壤結(jié)構(gòu)、溫度、濕度和自然天敵等多種生態(tài)因子的綜合制約控制，蝙蝠蛾幼蟲在自然環(huán)境中的繁育速率已成為制約青藏高原冬蟲夏草產(chǎn)量的關(guān)鍵因素。
中國(guó)專利申請(qǐng)(公開號(hào):CN19700734A)公開了ー種冬蟲夏草的生產(chǎn)方法，中國(guó)專利申請(qǐng)(公開號(hào):CN1970733A)公開了ー種在蝠蛾圈養(yǎng)場(chǎng)培育冬蟲夏草的方法，中國(guó)專利申請(qǐng)(公開號(hào):CN1948456A)公開了ー種提高青藏高原冬蟲夏草產(chǎn)量的方法，中國(guó)專利申請(qǐng)(公開號(hào):CN19484757A)公開了ー種提高青藏高原冬蟲夏草產(chǎn)量的方法，所述四種方法公開的就似乎內(nèi)容均為在青藏高原野生環(huán)境下改造環(huán)境建立溫棚圈養(yǎng)蝙蝠娥幼蟲，増加圈養(yǎng)區(qū)域成蟲或幼蟲的數(shù)量，以提高蝙蝠蛾幼蟲的存活率，在蝙蝠蛾幼蟲發(fā)育至6-8齡時(shí)，通過(guò)向整個(gè)圈養(yǎng)場(chǎng)地施用染菌孢液的方式，對(duì)蝙蝠蛾幼蟲進(jìn)行感染，蝙蝠蛾幼蟲完全感染去掉溫濕保護(hù)設(shè)置讓其恢復(fù)到自然溫濕。整冬蟲夏草的生長(zhǎng)過(guò)程都在同一地域中進(jìn)行。據(jù)專利申請(qǐng)文件公開的數(shù)據(jù)，該方法蝙蝠蛾幼蟲從I齡生長(zhǎng)發(fā)育至6-8齡僅需要365-380天；最終冬蟲夏草的感染成功率能夠達(dá)到50%左右。
自1970年代末，申請(qǐng)人即開展了冬蟲夏草人工培殖的研究，先后承擔(dān)“七五”、“八五”國(guó)家重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目“冬蟲夏草人工培殖研究”課題中，確立了室內(nèi)人工培殖冬蟲夏草的模式后，繼而又承擔(dān)了 “九 五”國(guó)家重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目“西藏那曲冬蟲夏草半野生撫育及開發(fā)研究”，且獲得了重大突破——首次在西藏那曲海抜4700多米的藏北高原，培殖出了半野生撫育的冬蟲夏草，從而確立了冬蟲夏草半野生撫育的新模式?！笆晃濉逼陂g承擔(dān)國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目“冬蟲夏草人工培殖關(guān)鍵技術(shù)優(yōu)化研究”，在四川康定又對(duì)半野生撫育新模式的關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，進(jìn)ー步提高了產(chǎn)量，簡(jiǎn)化了操作環(huán)節(jié)，且降低了成本。申請(qǐng)人在通過(guò)研究冬蟲夏草寄主幼蟲的生長(zhǎng)特性，獲得了在低海抜室內(nèi)飼養(yǎng)寄主幼蟲的重大突破，該技術(shù)不僅可以縮短幼蟲的生長(zhǎng)期還可提高其成活率，本發(fā)明即提供冬蟲夏草寄主幼蟲(感菌和非感菌幼蟲,下同)在低海拔室內(nèi)飼養(yǎng)的主要技術(shù)環(huán)節(jié)。推出了低海拔培殖冬蟲夏草的新模式。

發(fā)明內(nèi)容
高原環(huán)境培殖冬蟲夏草環(huán)境與低海抜的主要差異在于溫度、光照、氣壓、土質(zhì)以及植被，研究發(fā)現(xiàn)，高原土質(zhì)在低海抜地區(qū)可以實(shí)現(xiàn)重現(xiàn)，而作為冬蟲夏草寄主幼蟲飼料的高原植物也完全可以被低海拔植被胡蘿卜、紅薯和人參果所替代；同時(shí)研究還發(fā)現(xiàn)，冬蟲夏草寄主蝙蝠蛾幼蟲是生活在土層中，氣壓對(duì)其的影響是非常微小的；所以本發(fā)明提供了ー種主要通過(guò)模擬高海抜冬蟲夏草寄主幼蟲生長(zhǎng)的溫度，并對(duì)寄主幼蟲的生長(zhǎng)期間和冬蟲夏草有性階段的生長(zhǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，得到一種冬蟲夏草低海抜人工培殖方法，包括寄主幼蟲孵化前準(zhǔn)備，寄主幼蟲的孵化·放養(yǎng)，寄主幼蟲的飼養(yǎng)，寄主幼蟲中后期飼養(yǎng)和冬蟲夏草有性階段的培殖；所述寄主幼蟲的飼養(yǎng)寄主幼蟲的飼養(yǎng)為人工控制飼養(yǎng)溫度為-30°C -5°C的凍土低溫休眠培育和飼養(yǎng)溫度為6°C 18°C的生長(zhǎng)發(fā)育培育兩個(gè)飼養(yǎng)步驟。
所述凍土低溫休眠階段的飼養(yǎng)時(shí)間為5 30d。
所述凍土低溫休眠階段的飼養(yǎng)溫度為-10°C _5°C。
所述的生長(zhǎng)發(fā)育培育寄主幼蟲4齡以內(nèi)8 18°C條件下飼養(yǎng)，寄主幼蟲5 8齡5 14°C條件下飼養(yǎng)。
所述生長(zhǎng)發(fā)育培育為:
4齡以內(nèi)寄主幼蟲在溫度8 18°C條件下飼養(yǎng)，基質(zhì)濕度35% 45% ;每天紫外光消毒2 5次，每次15 30分鐘。每月消毒培養(yǎng)室2 4次；
5 8齡寄主幼蟲在溫度5 14°C條件年下飼養(yǎng)，基質(zhì)濕度25% 45% ;光照強(qiáng)度0.5 10萬(wàn)Ix ;每天紫外光消毒3 4次計(jì):30 60分鐘。每月3次用300 500PPM的次氯酸鈉消毒液進(jìn)行養(yǎng)蟲室間消毒。
·[0012]所述寄主幼蟲的孵化放養(yǎng)為:將95%已經(jīng)發(fā)育成熟的蟲卵，用55 75%的こ醇液做消毒處理，濾干消毒液，用無(wú)菌水沖洗干凈，吸水，將卵粒攤放在濾紙上，將卵分散于紙面，待卵表面水分吸至半干后，換用新的無(wú)菌干燥濾紙，將半干的卵粒攤放其上左右篩動(dòng)，不斷變換卵在濾紙上的位置，待全部卵粒能在濾紙上自如翻滾梭動(dòng)后，收集于培養(yǎng)皿或其他容器內(nèi)備用；將卵播撒入盒內(nèi)飼料與基質(zhì)的表面，在其表面撒放ー層0.2 1.2cm厚的濕潤(rùn)基質(zhì)。
所述冬蟲夏草有性階段的培殖為:發(fā)現(xiàn)僵蟲后，將其集中移栽入事先布置好基質(zhì)的養(yǎng)蟲盒內(nèi)；僵蟲頭向上，斜植于基質(zhì)中，頭部距土表0.1 1.2cm，白天揭開盒蓋，紫外光照2 4次，每次10 15分鐘；其余時(shí)間保持0.5 IOOlx的白光光照強(qiáng)度；溫度_2 90C，空氣相對(duì)濕度控制在45% 98%，培養(yǎng)時(shí)間為15 25天。
本發(fā)明的有益技術(shù)效果是:本發(fā)明申請(qǐng)通過(guò)人工控制溫度、光照等飼養(yǎng)條件，不僅解決了冬蟲夏草寄主低海拔飼養(yǎng)的問(wèn)題；同時(shí)，本發(fā)明方法還縮短了冬蟲夏草寄主幼蟲的生長(zhǎng)時(shí)間；為在低海抜地區(qū)培殖冬蟲夏草創(chuàng)造了條件。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1溫度對(duì)冬蟲夏草寄主幼蟲的生長(zhǎng)的影響
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
在海拔200 1200米的范圍內(nèi)，模擬冬蟲夏草(含其寄主昆蟲各蟲態(tài))生長(zhǎng)發(fā)育所需的生態(tài)環(huán)境，修建人工氣候室(即培殖車間或培殖室、養(yǎng)蟲室等，下同)。對(duì)人工氣候室的幾項(xiàng)主要參數(shù)要求是:潔凈無(wú)菌，溫度、濕度可控，光照強(qiáng)弱可調(diào)。具體指標(biāo)如下:空氣潔凈度級(jí)別30萬(wàn)級(jí)到100級(jí)；空氣相對(duì)濕度15% 98% ;光照強(qiáng)弱度:0.5 10萬(wàn)Ix ;溫度為零下30°C至零上28°C;室內(nèi)安裝紫外光燈管(高度2 2.3米)每立方米不少于1.5至4.5w。室內(nèi)層架飼養(yǎng)。養(yǎng)蟲室外應(yīng)有標(biāo)準(zhǔn)更衣室、緩沖間。
將同一批次的卵去除雜物、洗浄、充分混勻，隨機(jī)數(shù)5個(gè)100粒，分別攤放在有保濕濾紙的5個(gè)培養(yǎng)皿中，編號(hào)貼上標(biāo)簽后，置8 16°C條件下保濕培養(yǎng)，待幼蟲開始孵化吋，每天早、中、晚各ー次將孵出的幼蟲清點(diǎn)記數(shù)，記錄好每個(gè)編號(hào)每天孵出的幼蟲數(shù)。待每個(gè)編號(hào)連續(xù)3天無(wú)幼蟲孵化，視為幼蟲孵化結(jié)束。統(tǒng)計(jì)每個(gè)編號(hào)幼蟲孵化率，并求得該批卵幼蟲的平均孵化率。本發(fā)明涉及的寄主昆蟲種為比如蝠蛾(Hepialua biruensis.Sp.nov、貢嘎蝠蛾(Hepialus gonggaensis S.Q.Fu & T.F.Fuang)、石渠一種蝠蛾(Hepialus sp)、小金一種蝠蛾(Hepialus sp)、蟲草蝠蛾，門源蝠蛾(Hepialus minyuancus)、斜脈蝠蛾(Hepialusoblifurcns)、玉樹蝠蛾，拉脊蝠蛾(Hepialus lagii Yan)。
通過(guò)鏡檢幼蟲胚胎發(fā)育情況，在幼蟲孵化前的2 3天內(nèi)做好飼養(yǎng)幼蟲的一切準(zhǔn)備。
做好養(yǎng)蟲室的清潔衛(wèi)生，使室內(nèi)環(huán)境達(dá)到設(shè)計(jì)要求的各項(xiàng)指標(biāo)。
清水洗浄、濾干，65 75%的こ醇溶液浸泡消毒2 5分鐘(或300 900PPM的次氯酸鈉溶液浸泡10 30分鐘)后，濾干殘液，潔凈水沖洗衣2 3次，用滅過(guò)菌的薄膜包裝封存?zhèn)溆茫?br>以珠牙寥、園穗寥、人參果、理塘黃芪、小大黃、雪山黃芪、羊角天麻、白馬雪山黃芪、香海仙報(bào)春、鵝黃燈苔報(bào)春、靛藍(lán)穗花報(bào)春、鐘花報(bào)春、景天點(diǎn)地梅、偏花鐘報(bào)春、山麗報(bào)春、云南報(bào)春等的地下部分為好，要求新鮮潔凈，洗盡泥沙，去除須根葉片、木質(zhì)老化及腐爛變質(zhì)部分，用55% 75%こ醇、1% 7%的次氯酸鈉消毒3 30分鐘后，濾干殘液，用清水沖洗2 3次、濾干水分、加工成黃豆般大小的粒狀封存待用。或制成干粉飼料:即將其洗浄消毒處理好的飼料曬干，粉碎，磨成粉狀，裝袋備用(用時(shí)加潔浄水及適量食品防腐劑拌濕投放飼養(yǎng)幼蟲)。飼料植物種類還涉及紅薯、胡羅卜、蘋果、土豆等代用品。
采用腐殖質(zhì)含量高、呈黑褐色的高山草甸土、亞高山草甸土、黑鈣土、栗鈣土制作而成的自然基質(zhì)或用珍珠巖、蛭石、泥碳、草碳、水晶泥等新材料制作的人造基質(zhì)(以下統(tǒng)稱基質(zhì))，曬干碾細(xì)、10 20目的篩孔過(guò)篩、加水拌濕(基質(zhì)濕度25% 45%)、裝于塑料袋內(nèi)、封扎袋ロ、85 120°C溫度(袋中心)條件下消毒35 90分鐘，冷卻后置培殖室內(nèi)備用。寄主幼蟲的收集和放養(yǎng)
在幼蟲臨孵化的前I 2天或當(dāng)天，將飼料基質(zhì)在無(wú)菌或有菌條件下裝于養(yǎng)蟲盒內(nèi):飼料、基質(zhì)按I比1.5的比例配置拌勻，姆盒裝拌勻的飼料2.0 4.5kg,蓋好盒蓋備用。
通過(guò)檢查發(fā)現(xiàn)95%以上的幼蟲已發(fā)育健全，并有數(shù)條幼蟲已破殼而出時(shí)，就應(yīng)立即作好投放工作。
在投放卵粒的當(dāng)天早上，將當(dāng)天要投放的卵粒集中放在200 500毫升的小燒杯內(nèi)將卵粒，用55 75%的こ醇液中浸泡2 3分鐘做消毒處理，其間稍作攪動(dòng)，使卵粒的表面充分與消毒液接觸。消毒結(jié)束后，在超凈工作抬上，濾干消毒液，用潔凈水沖洗干凈，緊接著用干燥的濾紙吸水:將沖洗干凈的卵粒攤放在濾紙上，用干燥毛筆將卵分散于紙面，并不時(shí)用毛筆輕輕掃動(dòng)卵粒，使卵的表面不停的與干燥濾紙接觸。待卵表面水分吸至半干后，換用新的干燥濾紙，將半干的卵粒攤放其上，用雙手握住濾紙的左右兩邊在空中輕輕左右篩動(dòng)，不斷變換卵在濾紙上的位置，待全部卵粒能在濾紙上輕松自如翻滾梭動(dòng)后，收集于培養(yǎng)皿或其他容器內(nèi)備用。
將吸干水分(卵殼表面水分)的卵粒，用事先準(zhǔn)備好的量卵器具(準(zhǔn)備有10粒、20粒、50粒、100粒等各種量具)，按每盒飼養(yǎng)幼蟲60 300頭(根據(jù)幼蟲孵化率折算)的標(biāo)準(zhǔn)將其分好后，揭開盒蓋(事先已準(zhǔn)備好飼料、基質(zhì)的養(yǎng)蟲盒)，輕輕而均勻?qū)⒙巡ト鋈牒袃?nèi)飼料與基質(zhì)的表面，此時(shí)再在其表面撒放ー層0.2 1.2cm厚的濕潤(rùn)基質(zhì)，蓋好盒蓋，搬入飼養(yǎng)室內(nèi)，3天左右幼蟲即可全部孵化，并入土取食。
寄主幼蟲的前期飼養(yǎng)
在卵的中后期，將卵洗浄消毒處理好后，將其均勻輕輕的撒播入已布置好飼料和基質(zhì)的養(yǎng)蟲盒內(nèi)，待其孵化即可進(jìn)入基質(zhì)取食。將蟲卵2萬(wàn)枚平均分為2組，其中I組，每盒子可放幼蟲20 80條(以幼蟲孵化率60%折算，下同)作為小盒組；將消毒處現(xiàn)后的卵，攤放在墊有濕潤(rùn)濾紙的培養(yǎng)皿 內(nèi)，置7 13°C的條件下，待其幼蟲孵化后，清點(diǎn)數(shù)量，均勻放養(yǎng)于已布置好飼和基質(zhì)的養(yǎng)蟲盒內(nèi)，每盒20 80頭，待其全部鉆入基質(zhì)后，再在其上撒放一層濕潤(rùn)的細(xì)基質(zhì)。
另外I組，用大的盒子每盒投放100 600頭，先集中飼養(yǎng)20 60天后，再分盒飼養(yǎng)，每盒20 60條，作為大盒組。每盒投放幼蟲60 500條，置5 10°C條件下先集中飼養(yǎng)30 60天后，再分盒(每盒30 50條)飼養(yǎng)。
將大盒組和小盒組，分別置于溫度8 18°C條件下實(shí)行變溫飼養(yǎng)。基質(zhì)濕度35% 45% ;姆天紫外光消毒2 5次,姆次15 30分鐘。姆月2 4次用前述消毒液進(jìn)行室內(nèi)墻壁、地面、養(yǎng)蟲架及養(yǎng)蟲盒表面噴灑或擦拭消毒。飼養(yǎng)期間避免輕易揭開盒蓋和隨意開關(guān)門窗，有必要時(shí)必須穿好工作服、帽、鞋，戴上手套，用已消毒好的工具才能進(jìn)入養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行操作。
前期幼蟲個(gè)體小、活動(dòng)范圍窄，取食量較少，視情況添加I 2次飼料即可。其方法為:經(jīng)檢查，養(yǎng)蟲盒內(nèi)幼蟲原有飼料已取食85% 95%時(shí)，即應(yīng)添加飼料，以圓穗寥珠芽寥等天然飼或紅薯、胡羅卜等代用品飼料均可，質(zhì)量及消毒處理同實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備，加工切碎成塊狀裝袋(每袋I千克)備用；添加前先用前述消毒液對(duì)需添加飼料的養(yǎng)蟲盒進(jìn)行表面擦拭消毒處理，其后，在無(wú)菌工作臺(tái)上掲開盒蓋，用特制工具刮棄養(yǎng)蟲盒內(nèi)I 2cm表層基質(zhì)、撿除腐爛變質(zhì)飼料及取食剩下殘存邊角部分、糞便及其他廢物(此時(shí)要特別小心不要傷及盒內(nèi)幼蟲)后添加新鮮飼料，每盒0.6 2.8千克飼添加)，輕輕均勻平鋪于養(yǎng)蟲盒內(nèi)，再在其上掩蓋1cm左右的濕潤(rùn)基質(zhì)，蓋上盒蓋即可。也可添加實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備中所述的制成的干粉飼料，每盒
0.5 1.3千克。
寄主幼蟲的中后期飼養(yǎng)
在冬蟲夏草寄主幼蟲生長(zhǎng)到4齡時(shí)，將大盒、小盒組的飼養(yǎng)溫度調(diào)整到5 14°C條件下，實(shí)行變溫飼養(yǎng)(所述變溫實(shí)驗(yàn)為在5 14°C )。基質(zhì)濕度控制在25% 45%以內(nèi)；光照強(qiáng)度0.5 10萬(wàn)Ix ;每天紫外光消毒3 4次計(jì):30 60分鐘。每月3次用300 500PPM的次氯酸鈉消毒液進(jìn)行養(yǎng)蟲室內(nèi)墻壁、地面、養(yǎng)蟲架及養(yǎng)蟲盒表面噴灑擦拭消毒。飼養(yǎng)期間避免輕易揭開盒蓋和隨意開關(guān)門窗，有必要時(shí)必須穿好工作服、帽、鞋，戴上手套及已消過(guò)毒的工具才能進(jìn)入養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行操作。
飼料的準(zhǔn)備:飼料的質(zhì)量及消毒處理與實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備相同，加工制作時(shí)切成較蠶豆更大的塊狀，裝袋(每袋I千克)備用。養(yǎng)蟲盒及基質(zhì)的準(zhǔn)備:按實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備的要求分別處理好養(yǎng)蟲盒和基質(zhì)。在養(yǎng)蟲室內(nèi)的工作臺(tái)上，首先在已準(zhǔn)備好的養(yǎng)蟲盒內(nèi)裝入飼料與基質(zhì)(飼料與基質(zhì)的比例為1:1.8)。同時(shí)，用前述消毒液對(duì)將換飼料的養(yǎng)蟲盒的外表進(jìn)行擦拭消毒。
添加時(shí)，先將需換飼料的大盒、小盒組(連同基質(zhì)、幼蟲及殘存的飼)輕輕倒在無(wú)菌的工作臺(tái)上(臺(tái)上墊有滅過(guò)菌的塑料膜)，用滅過(guò)菌攝子輕輕挑撥，將活幼蟲移入新的裝有飼料與基質(zhì)的養(yǎng)蟲盒內(nèi)，均勻分布，姆盒20 60頭。待幼蟲全部進(jìn)入基質(zhì)后,掩蓋ー層濕潤(rùn)基質(zhì)，蓋好盒蓋放回養(yǎng)蟲架上。
在添加飼料過(guò)程中，如發(fā)現(xiàn)病害，遂及時(shí)用無(wú)菌塑料袋密封，并訊速將其移出養(yǎng)蟲室，置專用的病害處理室進(jìn)行處理:將病蟲及其盒中的殘存飼料、基質(zhì)及養(yǎng)蟲盒作滅菌處理，將活幼蟲作單頭飼養(yǎng)，如20 30天內(nèi)未見發(fā)病者，再將其集中飼養(yǎng)。8齡時(shí)統(tǒng)計(jì)存活率，大盒組的冬蟲夏草寄主幼蟲平均存活率達(dá)到62.3%，小盒組的冬蟲夏草寄主幼蟲存活率達(dá)到61.9%。
實(shí)施例2凍土條件處理對(duì)冬蟲夏草寄主幼蟲的生長(zhǎng)的影響
采用實(shí)施例1相同的飼養(yǎng)條件，在0 4齡以內(nèi)寄主幼蟲在溫度8 18°C條件下飼養(yǎng)，基質(zhì)濕度35% 45% ;每天紫外光消毒2 5次，毎次15 30分鐘；每月消毒培養(yǎng)室2 4次；任選寄主幼蟲450頭，均分為3組，分別在寄主幼蟲完成第3次蛻皮后I周(3 4齡期間)，調(diào)整人工氣候室溫度為凍土溫度，第I組控制溫度為-30 -20，第2組控制溫度為-20 -10，第三組控制溫度為-10 -5。凍土溫度為25天。完成凍土條件處理后分別將上述3組置于實(shí)施例1所述的飼養(yǎng)條件繼續(xù)飼養(yǎng)，待到寄主幼蟲8齡時(shí)，統(tǒng)計(jì)寄主幼蟲存活率；具體結(jié)果如表I所示。
表I不同凍土溫度對(duì)冬蟲夏草寄主幼蟲存活率的影響
權(quán)利要求
1.一種冬蟲夏草低海抜人工培殖方法，包括寄主幼蟲孵化前準(zhǔn)備，寄主幼蟲的收集放養(yǎng)，寄主幼蟲控溫飼養(yǎng)和冬蟲夏草有性階段的培殖；其特征在于:所述寄主幼蟲控溫飼養(yǎng)分為人工控溫飼養(yǎng)溫度為8 18°C條件的I 4齡寄主幼蟲前期飼養(yǎng)階段和5 14°C條件5 8齡寄主幼蟲中后期飼養(yǎng)階段。
2.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的冬蟲夏草低海抜人工培殖方法，其特征在于:所述I 4齡寄主幼蟲前期飼養(yǎng)階段中還包括時(shí)間長(zhǎng)度為5 30d的降低培養(yǎng)溫度至_30°C _5°C的凍土低溫休眠飼養(yǎng)階段。
3.根據(jù)權(quán)利要求
2所述的冬蟲夏草低海抜人工培殖方法，其特征在于:所述凍土低溫休眠階段的為蟲齡3 4齡，飼養(yǎng)環(huán)境溫度為-10°C _5°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求
3所述的冬蟲夏草低海拔人工培殖方法，其特征在于:所述寄主幼蟲控溫飼養(yǎng)為: I 4齡以內(nèi)寄主幼蟲在溫度8 18°C條件下飼養(yǎng)，基質(zhì)濕度35% 45% ;每天紫外光消毒2 5次,每次15 30分鐘；姆月消毒培養(yǎng)室2 4次；3 4齡階段中，任選5 30天時(shí)間，降低培養(yǎng)溫度至-10°C _5°C，培養(yǎng)基形成凍土，每天紫外光消毒2 5次，毎次15 30分鐘； 5 8齡寄主幼蟲在溫度5 14°C條件下飼養(yǎng)，基質(zhì)濕度25% 45% ;光照強(qiáng)度0.5 10萬(wàn)Ix ;每天紫外光消毒3 4次計(jì):30 60分鐘；姆月3次用300 500PPM的次氯酸鈉消毒液進(jìn)行養(yǎng)蟲室間消毒。
5.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的冬蟲夏草低海拔人工培殖方法，其特征在于:所述寄主幼蟲的孵化放養(yǎng)為:將95%已經(jīng)發(fā)育成熟的蟲卵，用55 75%的こ醇液或19T7%次氯酸鈉溶液、19T5%甲醛溶液、0.1%的升汞溶液做消毒處理，濾干消毒液，用潔凈水沖洗干凈，吸水，將卵粒攤放在濾紙上，并分散于紙面，待卵表面水分吸至半干后，換用新的干燥濾紙，將半干的卵粒攤放其上左右篩動(dòng)，不斷變換卵在濾紙上的位置，待全部卵粒能在濾紙上自如翻滾梭動(dòng)后，收集于培養(yǎng)皿或其他容器內(nèi)備用；將卵播撒入盒內(nèi)飼料與基質(zhì)的表面，在其表面撒放ー層0.2 1.2cm厚的濕潤(rùn)基質(zhì)。
6.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的冬蟲夏草低海抜人工培殖方法，其特征在于:所述冬蟲夏草有性階段的培殖為:發(fā)現(xiàn)僵蟲后，將其集中移栽入事先布置好基質(zhì)的養(yǎng)蟲盒內(nèi)；僵蟲頭向上，斜植于基質(zhì)中，頭部距土表0.1 1.2cm,白天揭開盒蓋，紫外光照2 4次，毎次10 15分鐘；其余時(shí)間保持0.5 IOOlx的白光光照強(qiáng)度 ，溫度-2 9°C，空氣相對(duì)濕度控制在45% 98%，培養(yǎng)時(shí)間為15 25天。
專利摘要
本發(fā)明提供了一種冬蟲夏草低海拔人工培殖方法，包括寄主幼蟲孵化前準(zhǔn)備，寄主幼蟲的孵化放養(yǎng)，寄主幼蟲的飼養(yǎng)，寄主幼蟲中后期飼養(yǎng)和冬蟲夏草有性階段的培殖；所述寄主幼蟲的飼養(yǎng)寄主幼蟲的飼養(yǎng)為人工控制飼養(yǎng)溫度為-30℃～-5℃的凍土低溫休眠培育和飼養(yǎng)溫度為6℃～18℃的生長(zhǎng)發(fā)育培育兩個(gè)飼養(yǎng)步驟；本發(fā)明申請(qǐng)通過(guò)人工控制溫度、光照等飼養(yǎng)條件，不僅解決了冬蟲夏草寄主低海拔飼養(yǎng)的問(wèn)題；同時(shí)，本發(fā)明方法還縮短了冬蟲夏草寄主幼蟲的生長(zhǎng)時(shí)間；為在低海拔地區(qū)培殖冬蟲夏草創(chuàng)造了條件。
文檔編號(hào)A01K67/033GKCN103081869SQ201210292550
公開日2013年5月8日 申請(qǐng)日期2012年8月16日
發(fā)明者陳仕江, 張德利, 尹定華, 涂永勤, 劉飛, 曾緯, 賀宗毅, 魯增輝, 李黎 申請(qǐng)人:重慶市中藥研究院導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan