本發(fā)明屬于種質(zhì)資源保存，具體涉及一種清除侵染水螅體的絲狀藻的方法。

背景技術(shù)：

1、刺胞動(dòng)物僅具內(nèi)胚層和外胚層，身體呈輻射對(duì)稱(chēng)，主要包括水母、珊瑚等類(lèi)群，在生命演化過(guò)程中占據(jù)獨(dú)特地位；其中，水母是生物多樣性最高、生活史類(lèi)型最為豐富的刺胞動(dòng)物，研究?jī)r(jià)值很高。

2、枝手水母(cladonema)、美螅水母(clytia)和仙水母(cassiopea)均屬于隸屬于刺胞動(dòng)物門(mén)(cnidaria)，均具有典型的水螅體和水母體兩個(gè)階段，生活史存在世代交替。其中，太平洋枝手水母(cladonema?pacificum)和輻狀枝手水母(cladonema?radiatum)已成為發(fā)育、再生等生物學(xué)和生理學(xué)研究領(lǐng)域的模式生物，主要應(yīng)用到發(fā)育、再生、生物體結(jié)構(gòu)分枝、眼點(diǎn)形成、饑餓的細(xì)胞與分子機(jī)制的研究中。半球美螅水母(clytia?hemisphaerica)已作為模式生物在神經(jīng)發(fā)育、細(xì)胞分化、演化等方面的研究。仙水母(cassiopea)作為海洋館水母展示中的常見(jiàn)種類(lèi)，具有較高的觀賞性和研究?jī)r(jià)值，其中，安朵仙水母(cassiopeaandromeda)和仙水母(cassiopea?xamachana)已經(jīng)作為模式生物開(kāi)展了共生、再生、神經(jīng)發(fā)育等方面的研究。

3、指狀枝手水母、飛白枝手水母、廈門(mén)美螅水母、安朵仙水母等物種飼養(yǎng)簡(jiǎn)單、再生能力強(qiáng)，是良好的實(shí)驗(yàn)生物。然而在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中，枝手水母的水螅群體容易被入侵的絲狀藻擠壓生存空間，最終導(dǎo)致死亡。絲狀藻粘附在水螅體上，需要定期人工挑取未被侵染的水螅體重新擴(kuò)增才能獲得健康、潔凈的水螅群體，工作量較大。此外，絲狀藻還能侵染廈門(mén)美螅水母、安朵仙水母等多種水母的水螅群體，造成一定的損害。因此急需一種簡(jiǎn)單有效的除藻方式來(lái)維持水螅體的正常生長(zhǎng)。

4、銅是高性?xún)r(jià)比的除藻劑。硫酸銅、含銅除藻劑是廣譜型的殺菌劑、除藻劑，因其高效、成本低等優(yōu)勢(shì)，幾十年來(lái)常被用于池塘、養(yǎng)殖水體、水庫(kù)等區(qū)域浮游植物藻華的治理。除浮游植物外，硫酸銅會(huì)影響水綿、轉(zhuǎn)板藻屬及絲藻屬絲狀藻類(lèi)的生長(zhǎng)，對(duì)黃絲藻(tribonemasp.)的72h-ec50為3.66mg/l；含銅除藻劑對(duì)星形石蕊藻(nitellopsis?obtusa)等大型藻類(lèi)也有很好的抑制作用。在眾多含銅除藻劑中，硫酸銅(銅離子)的成本低、除藻效果明顯。銅是生命體所必須的微量元素，但過(guò)量的銅會(huì)對(duì)生物產(chǎn)生危害。目前，銅離子對(duì)刺胞動(dòng)物的影響效應(yīng)研究主要集中在珊瑚、海葵等珊瑚蟲(chóng)綱的生物上，對(duì)水螅蟲(chóng)綱、缽水母綱等水母類(lèi)群的研究較少。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供一種清除侵染水螅體的絲狀藻的方法，適用于能耐受一定濃度銅離子脅迫的水螅體，不僅能有效清除侵染水螅體的絲狀藻，水螅體在銅離子處理后能夠在正常的海水中快速恢復(fù)成健康的水螅群體，并持續(xù)形成和釋放健康的水母體。

2、本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

3、本發(fā)明提供一種清除侵染水螅體的絲狀藻的方法，包括以下步驟：

4、(1)利用海水作為溶劑配制含銅離子的海水，其中，銅離子濃度為100～250μg/l；

5、(2)準(zhǔn)備喂養(yǎng)水螅體的餌料；

6、(3)使用步驟(1)制得的濃度100～250μg/l的含銅離子海水培養(yǎng)被絲狀藻侵染的水螅體以清除絲狀藻，期間每2～3日更換一次含銅離子海水以維持銅離子濃度；

7、(4)絲狀藻被完全清除后，更換為正常海水，水螅群體進(jìn)入恢復(fù)期；恢復(fù)期間，絲狀藻未再次出現(xiàn)，且水螅休眠體在1～16天后長(zhǎng)出新的水螅體。

8、進(jìn)一步地，步驟(1)中在利用海水素和純水配制鹽度為30～35ppt的海水，經(jīng)濾膜過(guò)濾后加入cuso4·5h2o，配制形成含銅離子海水。

9、進(jìn)一步地，步驟(2)中餌料的制備方法如下：將豐年蝦卵與海水混合后倒入豐年蝦的孵化器中，在室溫和自然光照的環(huán)境下曝氣培養(yǎng)24～48h；完成孵化后，停止曝氣，靜置后取出豐年蝦的無(wú)節(jié)幼體，清洗去雜后置于海水中，作為餌料培養(yǎng)水螅體。

10、進(jìn)一步地，在步驟(3)絲狀藻清除期間，每日給水螅體投喂經(jīng)步驟(2)制得的餌料，水螅體退化至休眠根后停止喂食。

11、進(jìn)一步地，在步驟(4)中絲狀藻被完全清除后，保持原銅離子濃度0～15天后更換為正常海水，進(jìn)而保證絲狀藻被完全清除。

12、進(jìn)一步地，在步驟(4)中絲狀藻被完全清除后，每日給復(fù)蘇的水螅群體投喂經(jīng)步驟(2)制得的餌料，進(jìn)而保證水螅群體進(jìn)一步擴(kuò)增，形成并釋放水母。

13、相較于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有如下有益效果：

14、1、本發(fā)明的方法采用濃度為100～250μg/l的含銅離子海水處理侵染水螅體的絲狀藻，不僅能有效清除侵染水螅體的絲狀藻，參與實(shí)驗(yàn)的水螅體在含銅離子海水處理后能在正常海水中快速恢復(fù)成健康的水螅群體，并持續(xù)形成和釋放健康的水母體，大大節(jié)省了水螅體長(zhǎng)期養(yǎng)護(hù)的人力與物力的投入，提高了水螅體種質(zhì)的長(zhǎng)期保存與養(yǎng)護(hù)的效率，還能為銅離子對(duì)刺胞動(dòng)物的致毒機(jī)理、刺胞動(dòng)物對(duì)重金屬的耐受性等研究提供支撐。

15、2、經(jīng)過(guò)本發(fā)明的方法處理后的水螅群體后期復(fù)蘇后干凈無(wú)雜質(zhì)，滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)與生產(chǎn)的需求。此外，與實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期培養(yǎng)的水螅體相比，本發(fā)明處理后的水螅體在長(zhǎng)勢(shì)、水母形成與發(fā)育、水母釋放量上無(wú)明顯差異，本發(fā)明未對(duì)幾種水螅體與水母體的生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生不良的影響。因此，此方法可用于多種水母水螅體的除藻應(yīng)用，對(duì)于不同物種，需要根據(jù)具體物種對(duì)銅離子的敏感度和耐受性來(lái)調(diào)整銅離子的使用濃度和處理時(shí)間。

技術(shù)特征：

1.一種清除侵染水螅體的絲狀藻的方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種清除侵染水螅體的絲狀藻的方法，其特征在于，步驟(1)中在利用海水素和純水配制鹽度為30～35ppt的海水，經(jīng)濾膜過(guò)濾后加入cuso4·5h2o，配制形成含銅離子海水，銅離子濃度為100～250μg/l。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種清除侵染水螅體的絲狀藻的方法，其特征在于，步驟(2)中餌料的制備方法如下：將豐年蝦卵與海水混合后倒入豐年蝦的孵化器中，在室溫和自然光照的環(huán)境下曝氣培養(yǎng)24～48h；完成孵化后，停止曝氣，靜置后取出豐年蝦的無(wú)節(jié)幼體，清洗去雜后置于海水中，作為餌料培養(yǎng)水螅體。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種清除侵染水螅體的絲狀藻的方法，其特征在于，在步驟(3)絲狀藻清除期間，每日給水螅體投喂經(jīng)步驟(2)制得的餌料，水螅體退化至休眠根后停止喂食。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種清除侵染水螅體的絲狀藻的方法，其特征在于，在步驟(4)中絲狀藻被完全清除后，保持原銅離子濃度0～15天后更換為正常海水，進(jìn)而保證絲狀藻被完全清除。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種清除侵染水螅體的絲狀藻的方法，其特征在于，在步驟(4)中絲狀藻被完全清除后，每日給復(fù)蘇的水螅群體投喂經(jīng)步驟(2)制得的餌料，進(jìn)而保證水螅群體進(jìn)一步擴(kuò)增，形成并釋放水母。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)一種清除侵染水螅體的絲狀藻的方法，包括以下步驟：(1)利用人工海水作為溶劑配制濃度為100～250μg/L含銅離子的海水；(2)準(zhǔn)備餌料培養(yǎng)水螅體；(3)使用制得的含銅離子海水培養(yǎng)被絲狀藻侵染的水螅體以清除絲狀藻，期間每2～3日更換一次含銅離子海水以維持銅離子濃度，此時(shí)水螅體會(huì)退化形成水螅休眠體；(4)絲狀藻被完全清除后，更換為正常海水，水螅群體進(jìn)入恢復(fù)期；恢復(fù)期間，絲狀藻未再次出現(xiàn)，且水螅休眠體在1～16天后長(zhǎng)出新的水螅體，水螅體隨后恢復(fù)正常。利用本發(fā)明提供的方法不僅能有效清除侵染水螅體的絲狀藻，水螅體在銅離子處理后能在正常海水中快速恢復(fù)成健康的水螅群體，并持續(xù)形成和釋放健康的水母體。

技術(shù)研發(fā)人員：周孔霖,黃玉香,吳荻,鄭爍,李靖,陳建明
受保護(hù)的技術(shù)使用者：閩江學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30