本發(fā)明涉及藥用植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域，尤其涉及一種堿性蒲公英快速繁殖培養(yǎng)基。

背景技術(shù)：

堿性蒲公英為藥用蒲公英的一種，為清熱解毒中藥，用于治療乳癰、疔瘡、腫瘤、目赤、喉痛等。藥理實(shí)驗(yàn)表明，蒲公英具有抗菌消炎、利膽保肝和免疫促進(jìn)作用。近年來(lái)的商品藥材調(diào)查表明，堿地蒲公英為蒲公英的主流品種之一。目前主要采用野外采集供應(yīng)市場(chǎng)需求，隨著人們對(duì)堿性蒲公英的不斷研究和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)，必將會(huì)出現(xiàn)供不應(yīng)求的現(xiàn)象。本發(fā)明利用植物組織培養(yǎng)進(jìn)行堿性蒲公英的種苗培養(yǎng)，公開(kāi)了三個(gè)培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基配方，為蒲公英的研究與種苗的生產(chǎn)提供了技術(shù)支持。目前還沒(méi)有堿性蒲公英組織培養(yǎng)的相關(guān)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了達(dá)到堿性蒲公英組織培養(yǎng)快速繁殖的目的，本發(fā)明提供了一種堿地蒲公英快速繁殖的培養(yǎng)基的配方。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

本發(fā)明是一種堿地蒲公英快速繁殖培養(yǎng)基配方，包括以下三個(gè)培養(yǎng)階段所使用的培養(yǎng)基的配方：

a.萌發(fā)培養(yǎng)基：ms+6-ba0.05-0.5mg/l+ga30.2-1.0mg/l+蔗糖10~40g/l

b.增殖培養(yǎng)基：ms+6-ba0.2-0.8mg/l+naa0.05-0.2mg/l+蔗糖15~40g/l

c.生根壯苗培養(yǎng)基：1/2ms+naa0.3-1.0mg/l+ac0.1-0.5g/l+蔗糖20~50g/l。

優(yōu)選的，所述的一種堿地蒲公英快速繁殖培養(yǎng)基配方，包括以下三個(gè)培養(yǎng)階段所使用的培養(yǎng)基的配方：

a.萌發(fā)培養(yǎng)基：ms+6-ba0.1-0.3mg/l+ga30.3-0.8mg/l+蔗糖25-35g/l

b.增殖培養(yǎng)基：ms+6-ba0.4-0.6mg/l+naa0.05-0.15mg/l+蔗糖25~35g/l

c.生根壯苗培養(yǎng)基：1/2ms+naa0.4-0.6mg/l+ac0.2-0.4g/l+蔗糖30~45g/l。

優(yōu)選的，所述的一種堿地蒲公英快速繁殖培養(yǎng)基配方，包括以下三個(gè)培養(yǎng)階段所使用的培養(yǎng)基的配方：

a.啟動(dòng)培養(yǎng)基：ms+6-ba0.2mg/l+ga30.5mg/l+蔗糖30g/l

b.增殖培養(yǎng)基：ms+6-ba0.5mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30g/l

c.生根壯苗培養(yǎng)基：1/2ms+naa0.5mg/l+ac0.3g/l+蔗糖40g/l。

優(yōu)選的：ga3為赤霉素、6-ba為6-芐氨基腺嘌呤、naa為萘乙酸、ac為活性炭。

優(yōu)選的：三個(gè)培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基ph均為6.4-7.0。

優(yōu)選的：?jiǎn)?dòng)培養(yǎng)所使用的外植體為堿地蒲公英種子。

優(yōu)選的：三種培養(yǎng)基均為以瓊脂為支撐物的固體培養(yǎng)基。

本發(fā)明的有益效果是：利用本發(fā)明的培養(yǎng)基配方進(jìn)行堿性蒲公英種苗的生產(chǎn)，具有生產(chǎn)能力強(qiáng)、培養(yǎng)周期短、增殖系數(shù)高、種苗抗性強(qiáng)等特點(diǎn)，由于采用組織培養(yǎng)的無(wú)性繁殖技術(shù)，不但能夠保持母本的優(yōu)良性狀，而且能夠獲得脫毒種苗，可以作為原種使用，所使用的培養(yǎng)基原料市場(chǎng)上較容易采購(gòu)、培養(yǎng)基配制簡(jiǎn)單。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明堿地蒲公英種子萌發(fā)圖。

圖2是本發(fā)明堿性蒲公英增殖培養(yǎng)情況圖。

圖3是本發(fā)明堿性蒲公英在組培瓶中生根情況圖。

具體實(shí)施方式

為了加深對(duì)本發(fā)明的理解，下面將結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述，該實(shí)施例僅用于解釋本發(fā)明，并不對(duì)本發(fā)明的保護(hù)范圍構(gòu)成限定。

如圖1-3所示，本發(fā)明是一種堿地蒲公英快速繁殖培養(yǎng)基配方，培養(yǎng)基配方包括以下三個(gè)培養(yǎng)階段所使用的培養(yǎng)基的配方：

a.萌發(fā)培養(yǎng)基：ms+6-ba0.05-0.5mg/l+ga30.2-1.0mg/l+蔗糖10~40g/l

b.增殖培養(yǎng)基：ms+6-ba0.2-0.8mg/l+naa0.05-0.2mg/l+蔗糖15~40g/l

c.生根壯苗培養(yǎng)基：1/2ms+naa0.3-1.0mg/l+ac0.1-0.5g/l+蔗糖20~50g/l。

其中：所述ga3為赤霉素、6-ba為6-芐氨基腺嘌呤、naa為萘乙酸、ac為活性炭；

所述三個(gè)培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基ph均為5.8~6.0；

所述啟動(dòng)培養(yǎng)所使用的外植體為堿地蒲公英種子；

所述三種培養(yǎng)基均為以瓊脂為支撐物的固體培養(yǎng)基。

實(shí)施例1

（1）外植體：堿性蒲公英種子

（2）萌發(fā)培養(yǎng)：將種子進(jìn)行消毒，消毒采用濃度為75%酒精消毒30s、0.1%升汞8min，消毒后接種到滅菌后的啟動(dòng)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為ms+6-ba0.2mg/l+ga30.5mg/l+蔗糖30g/l+瓊脂5.5g/lph6.4；

（3）增殖培養(yǎng)：將種子萌發(fā)后的小苗1-3厘米去掉種殼和根須，接種到已滅菌了的增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)基配方為ms+6-ba0.5mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30g/l+瓊脂5.5g/lph6.8；

（4）生根培養(yǎng)：壯苗培養(yǎng)25~35d后，將高度1cm以上的單株組培苗接種到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基配方為：1/2ms+naa0.4-0.6mg/l+ac0.2-0.4g/l+蔗糖30~45g/l+瓊脂5.5g/l，ph7.0，45~60d完成生根培養(yǎng)，組培苗的高度3~5cm，根長(zhǎng)2~3cm；

（5）培養(yǎng)環(huán)境條件：光照強(qiáng)度與周期：1800~2000lx、14h/d；溫度25±1℃；濕度40~60%。

實(shí)施例2

（1）外植體：堿性蒲公英種子

（2）萌發(fā)培養(yǎng)：將種子進(jìn)行消毒，消毒采用濃度為75%酒精消毒30s、0.1%升汞8min，消毒后接種到滅菌后的萌發(fā)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為ms+6-ba0.1mg/l+ga30.3mg/l+蔗糖25g/l+瓊脂5.5g/lph6.4；

（3）增殖培養(yǎng)：將種子萌發(fā)后的小苗（1-3厘米）去掉種殼和根須，接種到已滅菌了的增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)基配方為ms+6-ba0.4mg/l+naa0.05mg/l+蔗糖25g/l+瓊脂5.5g/lph6.8；

（4）生根培養(yǎng)：壯苗培養(yǎng)25~35d后，將高度1cm以上的單株組培苗接種到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基配方為：1/2ms+naa0.4mg/l+ac0.2g/l+蔗糖30g/l，ph7.0。45~60d完成生根培養(yǎng)，組培苗的高度3~5cm，根長(zhǎng)2~3cm；

（5）培養(yǎng)環(huán)境條件：光照強(qiáng)度與周期：1800~2000lx、14h/d；溫度25±1℃；濕度40~60%。

實(shí)施例3

（1）外植體：堿性蒲公英種子

（2）萌發(fā)培養(yǎng)：將種子進(jìn)行消毒，消毒采用濃度為75%酒精30s、0.1%升汞8min，消毒后接種到滅菌后的萌發(fā)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為ms+6-ba0.3mg/l+ga30.8mg/l+蔗糖35g/l+瓊脂5.5g/lph6.4；

（3）增殖培養(yǎng)：將種子萌發(fā)后的小苗（1-3厘米）去掉種殼和根須，接種到已滅菌了的增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)基配方為ms+6-ba0.6mg/l+naa0.15mg/l+蔗糖35g/l+瓊脂5.5g/lph6.8；

（4）生根培養(yǎng)：壯苗培養(yǎng)25~35d后，將高度1cm以上的單株組培苗接種到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基配方為：1/2ms+naa0.6mg/l+ac0.4g/l+蔗糖45g/l，ph7.0，45~60d完成生根培養(yǎng)，組培苗的高度3~5cm，根長(zhǎng)2~3cm；

（5）培養(yǎng)環(huán)境條件：光照強(qiáng)度與周期：1800~2000lx、14h/d；溫度25±1℃；濕度40~60%。