本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)病蟲害防治領(lǐng)域，具體是一種高效甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒復(fù)合增效型生物農(nóng)藥。
背景技術(shù)：
用作殺蟲劑的昆蟲病毒主要有屬于桿狀病毒科的核型多角體病毒、顆粒體病毒等。早在19世紀(jì)末就已開始了利用昆蟲病毒防治防害的研究。據(jù)nancy介紹，早在1892年，德國人gehren就利用昆蟲npv防治舞毒蛾（lymantriamonacha）。迄今世界上已有多種昆蟲桿狀病毒殺蟲劑注冊、商品化生產(chǎn)，并用于農(nóng)林害蟲的防治。但桿狀病毒在實(shí)際應(yīng)用中最突出的缺陷是殺蟲速度比較緩慢、宿主單一，但與bt不同的是它不易產(chǎn)生抗性，因而具有及重要的應(yīng)用前景，構(gòu)建桿狀病毒株，或添加生物、化學(xué)物質(zhì)，擬增強(qiáng)桿狀病毒的毒力和提高殺蟲速度，是這一研究領(lǐng)域的重要課題。昆蟲病毒中npv感染性增效成分最早是由tanada在美洲粘蟲顆粒體病毒上發(fā)現(xiàn)的。tanada及其同事采用粘蟲顆粒體病毒和粘蟲核型多角體病毒（punpv）混合感染美洲粘蟲，結(jié)果兩種病毒的混合感染效果優(yōu)于兩種病毒單獨(dú)感染，幼蟲對混合感染的敏感性比單一病毒感染高10倍以上，80℃熱失活的gv混合感染后仍對粘蟲核型多角體病毒有增效作用，而熱失活的粘蟲核型多角體病毒（punpv）并不影響pugv的毒力，他們認(rèn)為pugv中存在增效因子，因此引起了人們的關(guān)注。王曉容等發(fā)現(xiàn)，用芹菜夜蛾核型多角體病毒和菜粉蝶顆粒體病毒的混合懸液感染3齡期菜粉蝶幼蟲，可顯示出良好的增效作用，菜粉蝶顆粒體病毒和芹菜夜蛾核型多角體病毒的混合懸液的毒力倍數(shù)分別為單劑的600倍和400倍以上。兩種病毒不同濃度混合懸液的lt50分別比芹菜夜蛾核型多角體病毒和菜粉蝶顆粒體病毒單劑縮短1.10～2.16d和0.40～1.93d。證明兩種病毒聯(lián)合作用能明顯提高殺蟲效果，縮短幼蟲存活時(shí)間。郭慧芳等測定了多種病毒組合對斜紋夜蛾和甜菜夜蛾的聯(lián)合增效作用，結(jié)果表明，八字地老虎顆粒體病毒、銀錠夜蛾質(zhì)型多角體病毒可明顯提高斜紋夜蛾核型多角體病毒對斜紋夜蛾的殺蟲速度。
甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒（mbnpv）是甘藍(lán)夜蛾的一種主要病原微生物，1960年首次在日本發(fā)現(xiàn)，國內(nèi)蔡秀玉等（1978）初次報(bào)道，俄羅斯和法國利用mbnpv防治甘藍(lán)夜蛾均獲得成效，并制成商品制劑用于生產(chǎn)實(shí)踐。東北農(nóng)業(yè)大學(xué)于1982年在哈爾濱市郊菜地甘藍(lán)夜蛾死蟲體中分離出mbnpv多株，經(jīng)多年篩選測定，明確其殺蟲毒力，作為微生物殺蟲劑有很大發(fā)展?jié)摿Α?/p>
甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒（mbnpv）是環(huán)境中普遍存在的一種病毒，對環(huán)境友好，對多種鱗翅目害蟲有顯著地感染至死亡作用，但是倘若單一使用，它的殺蟲速度與其他桿狀病毒一樣比較緩慢，宿主范圍仍較窄。
本發(fā)明以甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒（mbnpv）為材料與苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒等其他非同源病毒復(fù)合，研究其增效作用，以拓展其殺蟲范圍，提高其殺蟲速度，發(fā)明成果可以為高效、生態(tài)防治甘藍(lán)夜蛾等鱗翅目害蟲提供理論依據(jù)。本發(fā)明研究具有重要的經(jīng)濟(jì)意義和社會意義，必將產(chǎn)生較大的生態(tài)效應(yīng)、社會效應(yīng)和經(jīng)濟(jì)效益。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明為了解決單一使用甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒（mbnpv）時(shí)，它的殺蟲速度緩慢、宿主范圍窄的問題，而提供了一種以甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒（mbnpv）為材料與苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒等其他非同源病毒復(fù)合，研究其增效作用，以拓展其殺蟲范圍、提高其殺蟲速度，發(fā)明成果可以為高效、生態(tài)防治甘藍(lán)夜蛾等鱗翅目害蟲，保護(hù)農(nóng)林作物。
本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒復(fù)合增效型生物農(nóng)藥，其特征在于：先從甘藍(lán)夜蛾死蟲中分離甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒株，飼喂活體增值，分離純化，并與苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒等其它非同源性病毒加工處理，不同條件下接種測定，帥選出有利于擴(kuò)大甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒殺蟲范圍和殺蟲速度的增效因子，并獲得高效甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒復(fù)合增效型生物農(nóng)藥。
高效甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒復(fù)合增效型生物農(nóng)藥的工藝流程，其特征在于：（甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒＋增效病毒及其他增效因子）→處理→接種→重組或復(fù)合病毒→分離→活體試驗(yàn)→篩選→接種→重組或復(fù)合病毒→分離→（樣品＋其它因子）＋活體試驗(yàn)→篩選純化→防效試驗(yàn)→篩選→→→→甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒復(fù)合增效型生物農(nóng)藥。
防治效果：
復(fù)合型體病毒是由甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒（mbnpv）與苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒（acnpv）按0.5∶1復(fù)合而成的。為了掌握其對甘藍(lán)夜蛾的毒殺效果,用蒸餾水將其稀釋成2.0×103、2.0×104、2.0×105、2.0×106、2.0×107pib/ml五個(gè)所需的濃度進(jìn)行測試,甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒復(fù)合劑處理甘藍(lán)夜蛾2齡幼蟲后第2天致死相對死亡率結(jié)果見下表：
結(jié)果表明：單一的甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒對殺滅甘藍(lán)夜蛾2齡幼蟲較緩慢，宿主范圍窄；甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒（mbnpv）與苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒等其他非同源病毒復(fù)合后，殺蟲范圍增大，效果增強(qiáng)，甘藍(lán)夜蛾對復(fù)合劑較敏感，濃度在2.0×106時(shí)，殺蟲效果最好，殺滅率在85%以上。
本發(fā)明的創(chuàng)新是，在防治農(nóng)林害蟲的過程中，能淘汰劇毒農(nóng)藥，有利于環(huán)保，是一個(gè)推廣無公害農(nóng)業(yè)的新思路，也是突破了常規(guī)防治措施的新思路，達(dá)到了環(huán)保的新要求；具有重要的經(jīng)濟(jì)意義和社會意義，必將產(chǎn)生較大的生態(tài)效應(yīng)、社會效應(yīng)和經(jīng)濟(jì)效益；具有一定的新穎性。
具體實(shí)施方式
先從甘藍(lán)夜蛾死蟲中分離甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒株，飼喂活體增值，分離純化，并與苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒等其它非同源性病毒加工處理，不同條件下接種測定，帥選出有利于擴(kuò)大甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒殺蟲范圍和殺蟲速度的增效因子，并獲得高效甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒復(fù)合增效型生物農(nóng)藥。
高效甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒復(fù)合增效型生物農(nóng)藥的工藝流程，其特征在于：（甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒＋增效病毒及其他增效因子）→處理→接種→重組或復(fù)合病毒→分離→活體試驗(yàn)→篩選→接種→重組或復(fù)合病毒→分離→（樣品＋其它因子）＋活體試驗(yàn)→篩選純化→防效試驗(yàn)→篩選→→→→甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒復(fù)合增效型生物農(nóng)藥。