本發(fā)明涉及獼猴桃新品系的培育方法，尤其涉及一種超高維生素c獼猴桃新品系的培育方法。

背景技術(shù)：

維生素c（vitaminc，vc）是生物體內(nèi)必需的抗氧化劑和酶的輔因子，與植物生長(zhǎng)發(fā)育、抗逆及人類(lèi)健康密切相關(guān)。但人類(lèi)已經(jīng)喪失了合成vc的能力，必須從新鮮水果、蔬菜中獲取vc。獼猴桃果實(shí)富含vc，被稱(chēng)為‘vc之王’，是一種廣受消費(fèi)者歡迎的營(yíng)養(yǎng)保健水果。然而，商品化的獼猴桃品種間營(yíng)養(yǎng)成分差異化巨大，如中華獼猴桃（actinidiachinensiscomplex）不同品種vc含量差異顯著：50-420mg/100g鮮果重。目前，消費(fèi)群體對(duì)獼猴桃果品提出了更高的營(yíng)養(yǎng)健康需求，如何利用獼猴桃屬植物所具有的高vc含量的特點(diǎn)，拓展育種方法，開(kāi)發(fā)出更高維生素c含量的新品系，是獼猴桃科研及育種領(lǐng)域所關(guān)注的重點(diǎn)。

研究表明，獼猴桃屬植物物種間和物種內(nèi)果實(shí)vc含量表現(xiàn)出顯著的差異：①物種內(nèi)不同品種果實(shí)的vc含量呈現(xiàn)一定幅度波動(dòng)，例如不同類(lèi)型軟棗獼猴桃果實(shí)vc含量從37-385mg/100g鮮果重不等；②物種間果實(shí)vc含量差異極其顯著，例如闊葉獼猴桃（a.latifolia，671-2140mg/100g鮮果重）和毛花獼猴桃（a.eriantha，500-1379mg/100g鮮果重）的果實(shí)vc含量，與蒙自獼猴桃（a.henryi）、山梨獼猴桃（a.rufa）及糙葉獼猴桃（a.rudis）（小于10mg/100g鮮果重）等相差可達(dá)500倍。③目前商業(yè)化的獼猴桃品種屬于中華獼猴桃復(fù)合體，具有味道甜美、果實(shí)大的特點(diǎn)，但果實(shí)vc含量不如毛花獼猴桃等物種突出。

獼猴桃物種果實(shí)vc含量的多樣化特征（物種種性特征）為選育高vc新品種提供了材料基礎(chǔ)。申請(qǐng)人所在課題組基于獼猴桃國(guó)家種質(zhì)資源圃平臺(tái)，開(kāi)展了獼猴桃物種vc含量的綜合評(píng)價(jià)，在此基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)收集的毛花獼猴桃中具有很高的維生素c含量（500-1379mg/100g鮮果重），但同時(shí)毛花獼猴桃具有特殊的氣味（如青草氣味），不被消費(fèi)者所喜好；此外，現(xiàn)有中華獼猴桃味道甜美，但維生素c含量介于30-250mg/100g鮮果重之間，仍有很大提高空間。因此，本發(fā)明擬開(kāi)發(fā)出一種新的育種方法，培育出兼具美味（無(wú)特殊氣味）和高營(yíng)養(yǎng)含量的獼猴桃新品系，為大幅度改善獼猴桃性狀，創(chuàng)新獼猴桃育種提供技術(shù)支撐。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的就在于克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點(diǎn)和不足，提供一種超高維生素c獼猴桃新品系的培育方法，應(yīng)用于創(chuàng)制新的獼猴桃品系，推動(dòng)我國(guó)獼猴桃育種創(chuàng)新。

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的。

具體地說(shuō)，本方法包括下列步驟：

①確定第一代雜交親本

選定大果型、高維生素c的物種—毛花獼猴桃為母本，其典型特征為維生素c含量是600mg/100g鮮果重，是普通獼猴桃的十倍；選定中華獼猴桃雄株為父本，其雜交后代具有果實(shí)較大，大于60g,果實(shí)無(wú)毛且味道甜美的特點(diǎn)；

②開(kāi)展第一代種間雜交

收集父本中華獼猴桃的花粉，與毛花獼猴桃母本開(kāi)展種間雜交，獲得雜交種子，進(jìn)一步在中國(guó)科學(xué)院武漢植物園開(kāi)展雜交種子播種和培育，經(jīng)過(guò)3年培育獲得了f1代群體；

③f1代高維生素c的雄株選育

通過(guò)測(cè)定f1代實(shí)生群體葉片和部分果實(shí)維生素c含量，發(fā)現(xiàn)f1代群體的維生素c含量出現(xiàn)了分離；我們從中選育出的高維生素c含量、長(zhǎng)勢(shì)旺盛的雄株f1-ch；

④開(kāi)展種間回交

采用高維生素c含量的雄株f1-ch作為父本，與中華獼猴桃品種‘豐悅’開(kāi)展雜交，獲得雜交種子，在四川育種基地播種，經(jīng)過(guò)三年培育，獲得f2代群體；

⑤f2代群體系統(tǒng)評(píng)測(cè)

對(duì)獲得的f2代群體結(jié)果株開(kāi)展評(píng)測(cè)，具體包括獼猴桃果實(shí)的維生素c含量及涉及風(fēng)味的指標(biāo)（糖、酸和可溶性固形物等）測(cè)定；

⑥獲得超高維生素c新品系f2-ec。

評(píng)測(cè)f2代結(jié)果群體，獲得超高維生素c新品系f2-ec，其所述特定性狀為：果實(shí)的維生素c含量為500mg/gfw以上，為普通獼猴桃品種的5-10倍；

超高維生素c新品系f2-ec保存在農(nóng)業(yè)部國(guó)家獼猴桃種質(zhì)資源圃（武漢），

保存號(hào)為：kiwi20150635。

所述的中華獼猴桃和毛花獼猴桃為獼猴桃屬的兩個(gè)物種，其中中華獼猴桃品種‘豐悅’是目前商業(yè)化栽培的種，其果皮無(wú)毛、果肉黃色、味道甜美；毛花獼猴桃是獼猴桃屬中可作為育種應(yīng)用的一個(gè)種，長(zhǎng)勢(shì)旺盛、維生素c含量極高。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有下列優(yōu)點(diǎn)和積極效果：

①因獼猴桃為雌雄異株，雄性植株無(wú)果實(shí)，導(dǎo)致種內(nèi)雜交父本選擇盲目性高、育種效率極低和品種改良極其緩慢；本發(fā)明基于獼猴桃不同物種的vc含量差異，根據(jù)雜交后代vc分離變異穩(wěn)定的遺傳特征為依據(jù)，開(kāi)展高vc種間雜交育種技術(shù)創(chuàng)新和育種體系構(gòu)建，克服了雌雄異株植物的育種障礙。

②與傳統(tǒng)雜交相比，本方法大幅提高獼猴桃果實(shí)維生素c含量，是獼猴桃育種的創(chuàng)新，對(duì)今后獼猴桃育種具有極大的借鑒意義。

③本方法利用獼猴桃物種高維生素c特點(diǎn)，采用種間雜交和回交的辦法，培育品質(zhì)優(yōu)良、超高維生素c含量的獼猴桃新品系，是突破我國(guó)獼猴桃傳統(tǒng)育種局限、實(shí)現(xiàn)獼猴桃性狀多樣化的重要方法，對(duì)我國(guó)獼猴桃育種具有重大價(jià)值。

④適用于定向選育果實(shí)高vc含量的獼猴桃品系。

附圖說(shuō)明

圖1是本方法的步驟流程圖；

圖2是f1代高維生素c的雄株f1-ch圖片；

圖3是f2代種間雜交群體果實(shí)表型圖片；

圖4是f2代群體維生素c分布坐標(biāo)圖；

圖5是超高維生素c新品系f2-ec圖片。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和實(shí)施例詳細(xì)說(shuō)明：

如圖1，本方法的步驟流程是：

①選定第一代雜交親本

毛花獼猴桃果實(shí)維生素c含量高，但果實(shí)較小且具有青氣味；而中華獼猴桃的果實(shí)較大，味道甜美，但維生素c含量比毛花獼猴桃低。本發(fā)明首先通過(guò)測(cè)定國(guó)家獼猴桃資源圃中收集的獼猴桃資源，選定果實(shí)大于40g、果實(shí)維生素c含量超過(guò)600mg/100g鮮果重的毛花獼猴桃為母本，花期較長(zhǎng)且長(zhǎng)勢(shì)旺盛的中華獼猴桃為父本。

②開(kāi)展第一代種間雜交

收集中華獼猴桃的花粉，對(duì)毛花獼猴桃雌株授粉，在當(dāng)年11月收集成熟的果子，洗種并保存；

第二年2月對(duì)種子播種，培育成小苗，轉(zhuǎn)移到大田；經(jīng)3-5年培育，獲得成年的f1代種間雜交群體。

③f1代高維生素c的雄株選育

因?yàn)楂J猴桃果實(shí)vc含量跟葉片vc含量存在相關(guān)性，通過(guò)測(cè)定f1代實(shí)生群體葉片和部分果實(shí)維生素c含量，發(fā)現(xiàn)其中有部分植株外部形態(tài)主要像母本毛花獼猴桃，但長(zhǎng)勢(shì)比毛花獼猴桃強(qiáng)得多，枝條萌發(fā)率高，多年生老枝也能抽生枝條，易于更新復(fù)壯。其中特別是代號(hào)f1-ch的植株（見(jiàn)圖2），花色（紅色）艷麗，長(zhǎng)勢(shì)旺盛，葉片維生素c含量與母本毛花獼猴桃相近；因此選定為下一代雜交父本。

④開(kāi)展種間回交：

收集高維生素c含量的雄株f1-ch的花粉，對(duì)中華獼猴桃品種‘豐悅’(vc：163毫克/100克)授粉，在當(dāng)年9月底收集成熟的果子，洗種并保存；

第二年2月對(duì)種子播種，培育成小苗，轉(zhuǎn)移到大田；經(jīng)3-5年培育，獲得成年的f2代種間雜交群體（見(jiàn)圖3）。

⑤f2代群體系統(tǒng)評(píng)測(cè)

調(diào)查f2代群體，收集群體中每個(gè)結(jié)果株的果實(shí)，對(duì)獼猴桃果實(shí)的維生素c含量，糖、酸、青氣味等多個(gè)指標(biāo)開(kāi)展系統(tǒng)測(cè)定；

調(diào)查發(fā)現(xiàn)f2代群體維生素c分化明顯，變異范圍為261-627mg/100g鮮果重（見(jiàn)圖4），其中部分個(gè)體不存在顯著顯著青氣味，且果實(shí)味道甜，可溶性固形物高于16%。

⑥通過(guò)3年系統(tǒng)評(píng)估，最終獲得超高維生素c新品系f2-ec，其所述特定性狀為：果實(shí)的維生素c含量為573.1mg/100g鮮果重，果實(shí)味道甜美，果實(shí)大于60g，且無(wú)顯著青氣味（見(jiàn)圖5）。