本發(fā)明涉及中藥材人工種植技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種苦參的良種培育方法。
背景技術(shù)：
苦參，又叫苦骨、牛參、川參，為豆科植物苦參（sophora flavescens ait.）的干燥根。具有清熱、燥濕、殺蟲、利尿之功效，治療熱毒血痢、腸風(fēng)下血、黃疽尿閉、赤白帶下、陰腫陰癢、小兒肺炎、疳積、急性扁桃體炎、痔滿、脫肛、濕疹、濕瘡、皮膚瘙癢、疥癬麻風(fēng)、陰瘡濕癢、瘰疬、燙傷等。由于人們對該類藥物的需求不斷增長，而野生資源又不足，因此，采取人工種植的方法培育加工苦參是一種有效途徑。
人工栽培苦參有利用種子進(jìn)行有性繁殖方式和利用植物細(xì)胞的全能性無性繁殖方式，無性繁殖方式能保存優(yōu)質(zhì)品種和縮短栽培時(shí)間，但是由于缺乏品種的提純復(fù)壯，病毒累積嚴(yán)重，使得苦參的病蟲害發(fā)生率上升，產(chǎn)量下降。所以需要對苦參進(jìn)行無害化處理，培育出良種苦參進(jìn)行栽培。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供一種苦參的良種培育方法，它可以解決苦參由于長期無性繁殖引起的病毒累積嚴(yán)重的問題。
為了解決上述問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：這種苦參的良種培育方法，包括如下步驟：
A、植株篩選：在苦參成熟時(shí)或者萌芽時(shí)，選擇無病蟲害的植株；
B、預(yù)處理和消毒：取步驟A所得植株的根尖或者子芽1～2cm，用清水清洗干凈，再用70%的酒精漂洗30s，然后用0.1%的HgCl2溶液滅菌3min，無菌水洗3遍及以上；
C、將步驟B所得的子芽置于顯微鏡下，用酒精浸泡后，再用灼燒冷卻的鑷子和剪刀剝離子芽外部葉片，切取帶有1～2個(gè)葉原基的莖尖；或者將步驟B所得的根尖置于顯微鏡下，用酒精浸泡后，再用灼燒冷卻的鑷子和剪刀將根尖分生區(qū)細(xì)胞切成3～7個(gè)根尖小段，再用無菌水清洗3遍及以上；
D、培育：將步驟C所得莖尖放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.0mg/L，等到生長出不定芽后，繼續(xù)在所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)35～40天，至生長出3～4 cm叢生芽，將所述叢生芽剪成2片葉，長約1.5 cm的小段接入增殖培養(yǎng)基，所述增殖培養(yǎng)基是MS全培養(yǎng)基，20天為一個(gè)轉(zhuǎn)接周期，當(dāng)增殖至適當(dāng)?shù)臄?shù)量后，將幼苗分25～30株為一批，分批接入生根培養(yǎng)基中，所述生根培養(yǎng)基是1/2MS+萘乙酸1.0mg/L+多效唑 10mg/L，培養(yǎng)至有白色根系長出；
或者將步驟C所得根尖小段放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)15～25天，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L +萘乙酸1.0mg/L，得到預(yù)生根，將所述預(yù)生根的根尖1～2cm切成3～7個(gè)根尖小段接入所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)15～25天，重復(fù)上述步驟至得到適當(dāng)數(shù)量的預(yù)生根后，將所述預(yù)生根25～30個(gè)為一批，分批接入增殖培養(yǎng)基，所述增殖培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.5mg/L，培養(yǎng)至長出3～4 cm叢生芽；
E、將步驟D所得長葉長根的幼苗放入陽光下3～5天，取出幼苗，將其移栽至育苗床，行距5～6cm、株距5～6cm，開深3～4cm，每處栽種一株幼苗，保持育苗床濕潤；所述育苗床是由甘蔗葉作為基質(zhì)，混合有蔗糖廠濾泥和/或者魚塘淤泥、磷酸氫二鉀、花生麩、腐殖質(zhì)發(fā)酵而得；當(dāng)幼苗長出6～7片復(fù)葉，60%植株出現(xiàn)五出復(fù)葉時(shí)，將其移栽至大田，即可。
上述技術(shù)方案中，更具體的技術(shù)方案還可以是：所述培育階段的培養(yǎng)條件為溫度23～28℃，光照強(qiáng)度1500～1800LUX。
進(jìn)一步的：所述育苗床的各成分比重為甘蔗葉60～75重量份、蔗糖廠濾泥和/或者魚塘淤泥20～25重量份、磷酸氫二鉀5～10重量份、腐殖質(zhì)5～10重量份、花生麩1～2重量份。
由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下有益效果：
1、苦參的莖尖和根尖的分生組織中一般是無毒或僅含極低濃度的病毒粒子，利用細(xì)胞的全能性，通過莖尖或者根尖分裂分化可產(chǎn)生完整的、無病毒的植株。本發(fā)明不僅是通過莖尖培養(yǎng)的方式，還提出了根尖培養(yǎng)的方式，獲得優(yōu)良無病毒的苦參幼苗，將其進(jìn)行種植，植株生長健壯，長勢一致，病蟲害發(fā)生率只有8%左右，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于普通無性繁殖35%左右的病蟲害發(fā)生率。
2、用本發(fā)明培育的苦參的良種幼苗進(jìn)行栽種，苦參的產(chǎn)量能增加30%左右，并能保持野生苦參的所有優(yōu)良特性及有效中藥成分含量。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳述：
實(shí)施例一：
這種苦參的良種培育方法如下：
A、植株篩選：在在9月底至11月上旬苦參成熟時(shí)或者3月份萌芽時(shí)，選擇無病蟲害的植株；
B、預(yù)處理和消毒：取步驟A所得植株的根尖1～2cm，用清水清洗干凈，再用70%的酒精漂洗30s，然后用0.1%的HgCl2溶液滅菌3min，無菌水洗3遍；
C、將步驟B所得的根尖置于顯微鏡下，用酒精浸泡后，再用灼燒冷卻的鑷子和剪刀將根尖分生區(qū)細(xì)胞切成5個(gè)根尖小段，再用無菌水清洗3遍；
D、培育：將步驟C所得根尖小段放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)15天，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L +萘乙酸1.0mg/L，得到預(yù)生根，將所述預(yù)生根的根尖1～2cm切成5個(gè)根尖小段接入所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)15～25天，重復(fù)上述步驟至得到適當(dāng)數(shù)量的預(yù)生根后，將所述預(yù)生根30個(gè)為一批，分批接入增殖培養(yǎng)基，所述增殖培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.5mg/L，培養(yǎng)至長出3～4 cm叢生芽；
以上培養(yǎng)條件為溫度23～28℃，光照強(qiáng)度1500～1800LUX；
E、將步驟D所得長葉長根的幼苗放入陽光下3～5天，取出幼苗，將其移栽至育苗床，行距5～6cm、株距5～6cm，開深3～4cm，每處栽種一株幼苗，保持育苗床濕潤；所述育苗床是由甘蔗葉作為基質(zhì)，混合有濾泥、磷酸氫二鉀、花生麩、腐殖質(zhì)發(fā)酵而得；其中甘蔗葉60～75重量份、魚塘淤泥20～25重量份、磷酸氫二鉀5～10重量份、腐殖質(zhì)5～10重量份、花生麩1～2重量份；當(dāng)幼苗長出6～7片復(fù)葉，60%植株出現(xiàn)五出復(fù)葉時(shí)，將其移栽至大田，即可。
實(shí)施例二：
這種苦參的良種培育方法如下：
A、植株篩選：在在9月底至11月上旬苦參成熟時(shí)或者3月份萌芽時(shí)，選擇無病蟲害的植株；
B、預(yù)處理和消毒：取步驟A所得植株的子芽1～2cm，用清水清洗干凈，再用70%的酒精漂洗30s，然后用0.1%的HgCl2溶液滅菌3min，無菌水洗3遍；
C、將步驟B所得的子芽置于顯微鏡下，用酒精浸泡后，再用灼燒冷卻的鑷子和剪刀剝離子芽外部葉片，切取帶有1～2個(gè)葉原基的莖尖；
D、培育：將步驟C所得莖尖放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.0mg/L，等到生長出不定芽后，繼續(xù)在所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)35天，至生長出3～4 cm叢生芽，將所述叢生芽剪成2片葉，長約1.5 cm的小段接入增殖培養(yǎng)基，所述增殖培養(yǎng)基是MS全培養(yǎng)基，20天為一個(gè)轉(zhuǎn)接周期，當(dāng)增殖至適當(dāng)?shù)臄?shù)量后，將幼苗分30株為一批，分批接入生根培養(yǎng)基中，所述生根培養(yǎng)基是1/2MS+萘乙酸1.0mg/L+多效唑 10mg/L，培養(yǎng)至有白色根系長出；
以上培養(yǎng)條件為溫度23～28℃，光照強(qiáng)度1500～1800LUX；
E、將步驟D所得長葉長根的幼苗放入陽光下3～5天，取出幼苗，將其移栽至育苗床，行距5～6cm、株距5～6cm，開深3～4cm，每處栽種一株幼苗，保持育苗床濕潤；所述育苗床是由甘蔗葉作為基質(zhì)，混合有濾泥、磷酸氫二鉀、花生麩、腐殖質(zhì)發(fā)酵而得；其中甘蔗葉60～75重量份、魚塘淤泥20～25重量份、磷酸氫二鉀5～10重量份、腐殖質(zhì)5～10重量份、花生麩1～2重量份；當(dāng)幼苗長出6～7片復(fù)葉，60%植株出現(xiàn)五出復(fù)葉時(shí)，將其移栽至大田，即可。