一種珍珠傘組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種珍珠傘組織培養(yǎng)的快速繁殖方法,包括珍珠傘無菌外植體的獲得、芽的誘導(dǎo)分化、叢生芽的增殖、生根培養(yǎng)、煉苗移栽等步驟,本發(fā)明方法所制備的珍珠傘操作簡(jiǎn)單,周期短,為珍珠傘種質(zhì)資源的開發(fā)和利用提供基礎(chǔ)。
【專利說明】 一種珍珠傘組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及珍珠傘組織培養(yǎng)的快繁方法,屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]珍珠傘,Art/isia maculosa ifez,紫金牛科,灌木,又稱:紫綠果根、小羅傘、天青地紅。根細(xì)長(zhǎng)圓柱形。莖直立,細(xì)枝長(zhǎng)10-17厘米,微帶灰色。葉互生,橢圓狀披針形,長(zhǎng)8-14厘米,寬2.8-4.8厘米,先端略尖,邊緣微波狀;葉柄長(zhǎng)約4?8毫米。傘形花序頂生:通常為兩性花;花梗長(zhǎng)約I厘米;花白色或帶紅色,通常有腺點(diǎn)。核果球形,紅色,頂部有芒刺。種子I顆。花期4?5月。果期冬季。多生于亞熱帶山間、疏林潮濕處。分布我國(guó)中部及南部。全株治骨折、跌打、白喉、咽喉腫痛、胃潰瘍、急性腸炎等癥。舒筋活絡(luò),強(qiáng)筋壯骨,清咽利喉。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種珍珠傘的快速繁殖方法,由該方法所制備的珍珠傘操作簡(jiǎn)單,周期短,為珍珠傘種質(zhì)資源的開發(fā)和利用提供基礎(chǔ)。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實(shí)現(xiàn)的:
取珍珠傘的帶芽莖段,流水沖洗1.5h,超凈工作臺(tái)上70%的酒精處理30s,0.2%的氯化汞處理12min,無菌水沖洗7次,消毒處理過的珍珠傘帶芽莖段接入B5+6_BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L+氰化鉀5mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,pH5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,溫度24°C,濕度75%,誘導(dǎo)出來的腋芽放入培養(yǎng)基1/2B5+6_BA0.5mg/L進(jìn)行增殖培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,pH5.9,光照30001x,溫度24°C,濕度75%,增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基1/2MS+IBA1-1.5mg/L+NAAl-l.5mg/L+AC2_3g/L中進(jìn)行生根誘導(dǎo),附加蔗糖20g/L,瓊脂5.3g/L,pH5.9,光照60001x,溫度25°C,選取苗長(zhǎng)約5cm,根長(zhǎng)約2cm的試管苗,放置于自然光和室溫條件下兩周,然后取出,洗去根部培養(yǎng)基,栽植于蛭石:泥炭=1:1的基質(zhì)中,待長(zhǎng)出新根后噴灑濃度為1.5X10—4農(nóng)用硫酸鏈霉素噴灑防病,500倍IBA溶液澆灌,溫度25 °C,濕度90%。
[0005]采用本發(fā)明制備的珍珠傘成活率高,周期短,產(chǎn)量大,污染小,利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述,但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
取珍珠傘的帶芽莖段,流水沖洗1.5h,超凈工作臺(tái)上70%的酒精處理30s,0.2%的氯化汞處理12min,無菌水沖洗7次,消毒處理過的珍珠傘帶芽莖段接入B5+6_BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L+氰化鉀5mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,pH5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,溫度24°C,濕度75%,誘導(dǎo)出來的腋芽放入培養(yǎng)基1/2B5+6_BA0.5mg/L進(jìn)行增殖培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,pH5.9,光照30001x,溫度24°C,濕度75%,增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基1/2MS+IBA1.0mg/L+NAAl.0mg/L+AC2g/L中進(jìn)行生根誘導(dǎo),附加蔗糖20g/L,瓊脂5.3g/L,pH5.9,光照60001x,溫度25°C,選取苗長(zhǎng)約5cm,根長(zhǎng)約2cm的試管苗,放置于自然光和室溫條件下兩周,然后取出,洗去根部培養(yǎng)基,栽植于蛭石:泥炭=1:1的基質(zhì)中,待長(zhǎng)出新根后噴灑濃度為1.5 X 10_4農(nóng)用硫酸鏈霉素噴灑防病,500倍IBA溶液澆灌,溫度25 °C,濕度90%,成活率89%。
[0008]實(shí)施例2
取珍珠傘的帶芽莖段,流水沖洗1.5h,超凈工作臺(tái)上70%的酒精處理30s,0.2%的氯化汞處理12min,無菌水沖洗7次,消毒處理過的珍珠傘帶芽莖段接入B5+6_BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L+氰化鉀5mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,pH5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,溫度24°C,濕度75%,誘導(dǎo)出來的腋芽放入培養(yǎng)基1/2B5+6_BA0.5mg/L進(jìn)行增殖培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,pH5.9,光照30001x,溫度24°C,濕度75%,增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基1/2MS+IBA1.5mg/L+NAAl.5mg/L+AC3g/L中進(jìn)行生根誘導(dǎo),附加蔗糖20g/L,瓊脂5.3g/L,pH5.9,光照60001x,溫度25°C,選取苗長(zhǎng)約5cm,根長(zhǎng)約2cm的試管苗,放置于自然光和室溫條件下兩周,然后取出,洗去根部培養(yǎng)基,栽植于蛭石:泥炭=1:1的基質(zhì)中,待長(zhǎng)出新根后噴灑濃度為1.5 X 10_4農(nóng)用硫酸鏈霉素噴灑防病,500倍IBA溶液澆灌,溫度25 °C,濕度90%,成活率90%。
[0009]實(shí)施例3
取珍珠傘的帶芽莖段,流水沖洗1.5h,超凈工作臺(tái)上70%的酒精處理30s,0.2%的氯化汞處理12min,無菌水沖洗7次,消毒處理過的珍珠傘帶芽莖段接入B5+6_BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L+氰化鉀5mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,pH5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,溫度24°C,濕度75%,誘導(dǎo)出來的腋芽放入培養(yǎng)基1/2B5+6_BA0.5mg/L進(jìn)行增殖培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,pH5.9,光照30001x,溫度24°C,濕度75%,增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基1/2MS+IBA1.5mg/L+NAAl.5mg/L+AC2g/L中進(jìn)行生根誘導(dǎo),附加蔗糖20g/L,瓊脂5.3g/L,pH5.9,光照60001x,溫度25°C,選取苗長(zhǎng)約5cm,根長(zhǎng)約2cm的試管苗,放置于自然光和室溫條件下兩周,然后取出,洗去根部培養(yǎng)基,栽植于蛭石:泥炭=1:1的基質(zhì)中,待長(zhǎng)出新根后噴灑濃度為1.5 X 10_4農(nóng)用硫酸鏈霉素噴灑防病,500倍IBA溶液澆灌,溫度25 °C,濕度90%,成活率91%。
【權(quán)利要求】
1.一種珍珠傘組織培養(yǎng)的快速繁殖方法,包括珍珠傘無菌外植體的獲得、芽的誘導(dǎo)分化、叢生芽的增殖、生根培養(yǎng)、煉苗移栽,其主要步驟如下: (1)取珍珠傘的帶芽莖段,對(duì)其進(jìn)行消毒處理; (2)取步驟(I)消毒處理過的珍珠傘帶芽莖段接入B5+6-BAl.5mg/L+NAA0.05mg/L+氰化鉀5mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo),附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L,pH5.9,光照ΙΟΟΟΙχ,溫度24°C,濕度75%; (3)取步驟(2)誘導(dǎo)出來的腋芽放入培養(yǎng)基l/2B5+6-BA0.5mg/L進(jìn)行增殖培養(yǎng),附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6.5g/L,ρΗ5.9,光照 30001χ,溫度 24°C,濕度 75% ; (4)取步驟(3)增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基1/2MS+IBA1-1.5mg/L+NAAl-l.5mg/L+AC2-3g/L中進(jìn)行生根誘導(dǎo),附加蔗糖20g/L,瓊脂5.3g/L,pH5.9,光照60001x,溫度25°C; (5)取步驟(4)生根后的試管苗進(jìn)行煉苗移栽。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種珍珠傘組織培養(yǎng)的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(O中所述珍珠傘無菌帶芽莖段的獲得為,取珍珠傘的帶芽莖段,流水沖洗1.5h,超凈工作臺(tái)上70%的酒精處理30s,0.2%的氯化汞處理12min無菌水沖洗7次。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種珍珠傘組織培養(yǎng)的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(2)中珍珠傘幼苗莖段的誘導(dǎo)中附加了氰化鉀,可以控制莖段的褐化。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種珍珠傘組織培養(yǎng)的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(2)中珍珠傘生根培養(yǎng)中附加了 AC,可以促進(jìn)生根并能防止試管苗褐化。
5.按照權(quán)利要求1所述的一種珍珠傘組織培養(yǎng)的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(4)中珍珠傘的煉苗移栽方法為選取苗長(zhǎng)約5cm,根長(zhǎng)約2cm的試管苗,放置于自然光和室溫條件下兩周,然后取出,洗去根部培養(yǎng)基,栽植于蛭石:泥炭=1: I的基質(zhì)中,待長(zhǎng)出新根后噴灑濃度為1.5X 10_4農(nóng)用硫酸鏈霉素噴灑防病,500倍IBA溶液澆灌,溫度25°C,濕度90%。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104255456SQ201410462990
【公開日】2015年1月7日 申請(qǐng)日期:2014年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請(qǐng)人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司