一種提高樟子松苗木抗逆性的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種提高樟子松苗木抗逆性的方法，(1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng)，(2)菌劑制作，(3)種子處理，(4)無(wú)菌土制備，(5)播種，(6)菌劑接種。本發(fā)明提高樟子松苗木生長(zhǎng)及抗逆水平，采用打孔灌根及間隔接種的方式，對(duì)出苗1個(gè)月的樟子松苗木接種褐環(huán)乳牛肝菌發(fā)酵液，生長(zhǎng)1個(gè)月后，采用同樣的方式接種綠木霉發(fā)酵液。180天苗木高生長(zhǎng)提高42.3％，地徑提高66.7％，過(guò)氧化物酶提高268.3％，超氧化物歧化酶提高66.18％，接種苗木無(wú)病害發(fā)生。CGMCC No:924620140604CGMCC No：926420140604
【專利說(shuō)明】一種提高樟子松苗木抗逆性的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種提高樟子松苗木抗逆性的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]樟子松是北方主要的造林樹(shù)種，其良好的耐旱抗逆性使其在植被恢復(fù)、生態(tài)修復(fù)和園林綠化方面都發(fā)揮了重要作用。苗木質(zhì)量是造林成功與否的關(guān)鍵。引入植物根際有益微生物(如菌根菌和木霉菌)有利于改善苗圃土壤環(huán)境，可以有效促進(jìn)苗木生長(zhǎng)、增強(qiáng)苗木抗逆性和預(yù)防病害的發(fā)生。以多種微生物復(fù)合接種來(lái)提高苗木的抗逆性可以得到良好的效果，提高苗木的成活率。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于克服上述技術(shù)中存在的不足之處，提供一種提高樟子松苗木生長(zhǎng)和抗逆性的根際益生菌的接種方法。
[0004]為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
[0005](1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng):采用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，馬鈴薯180-2508，葡萄糖18-20&磷酸二氫鉀38，硫酸鎂1.58，水10000匕將制作好的培養(yǎng)基裝入500此的三角瓶中，裝液量200-3001111/5001111，置于1211:高壓滅菌鍋中滅菌20-11,在無(wú)菌條件下接種褐環(huán)乳牛肝菌和綠木霉，接種量10% -15%，將接種后的三角瓶置于轉(zhuǎn)速120-14017^111,溫度2500 -271:的搖床培養(yǎng)，發(fā)酵天數(shù)褐環(huán)乳牛肝菌20(1-30(1，綠木霉3(1-5(1,
[0006](2)菌劑制作:將褐環(huán)乳牛肝菌、綠木霉發(fā)酵液在無(wú)菌條件下粉碎，加入無(wú)菌水配成發(fā)酵液:無(wú)菌水濃度為1: 5，
[0007](3)種子處理:將供試種子用0.5%高錳酸鉀消毒30-1清水沖洗數(shù)次后，用滅菌濕紗布包裹保濕，在人工氣候箱中，置于251:下催芽，每天早晚用無(wú)菌水各沖洗一次，直至出芽，
[0008](4)無(wú)菌土制備:將草炭土、蛭石和河沙按2: 1: 1的比例配制混合土，置高溫高壓滅菌器中1211下滅菌2卜，裝入直徑巧挪※高13(^1營(yíng)養(yǎng)缽中，
[0009](5)播種:將經(jīng)催芽的樟子松種子播入營(yíng)養(yǎng)缽中，每缽30顆種子，上覆2挪厚無(wú)菌土，澆透水后放入大棚中培養(yǎng)，待幼苗出土后，定苗至每缽15株，進(jìn)行常規(guī)的日常管護(hù)，
[0010](6)菌劑接種:采取打孔灌根接種的方式，在出苗30(1進(jìn)行接種，每盆接種褐環(huán)乳牛肝菌菌劑404-5()111匕待苗木生長(zhǎng)30(1后，以同樣的方式接種綠木霉菌劑。
[0011]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:
[0012](1)提高樟子松苗木生長(zhǎng)及抗逆水平；
[0013](2)采用打孔灌根及間隔接種的方式，對(duì)出苗1個(gè)月的樟子松苗木接種褐環(huán)乳牛肝菌發(fā)酵液，生長(zhǎng)1個(gè)月后，采用同樣的方式接種綠木霉發(fā)酵液。180天苗木高生長(zhǎng)提高42.3%^地徑提高66.7 %，過(guò)氧化物酶提高268.3 %，超氧化物歧化酶提高66.18 %，接種苗木無(wú)病害發(fā)生。 保藏單位:中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研宄所保藏日期:2014年6月4日保藏編號(hào):9246 ⑶94) 9264 (143)
分類命名:褐環(huán)乳牛肝菌，811111118 1111:6118 ；綠木霉

【具體實(shí)施方式】
[0014]下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0015]實(shí)施例1、
[0016](1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng):采用的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，馬鈴薯1808，葡萄糖188，磷酸二氫鉀38，硫酸鎂1.58，水10000匕將制作好的培養(yǎng)基裝入50011^的三角瓶中，裝液量2001111/5001111，置于121。0高壓滅菌鍋中滅菌20111111，在無(wú)菌條件下接種褐環(huán)乳牛肝菌和綠木霉，接種量10%，將接種后的三角瓶置于轉(zhuǎn)速12017111111，溫度251:的搖床培養(yǎng)，發(fā)酵天數(shù)褐環(huán)乳牛肝菌20(1，綠木霉3(1，
[0017](2)菌劑制作:將褐環(huán)乳牛肝菌、綠木霉發(fā)酵液在無(wú)菌條件下粉碎，加入無(wú)菌水配成發(fā)酵液:無(wú)菌水濃度為1: 5，
[0018](3)種子處理:將供試種子用0.5%高錳酸鉀消毒30-1清水沖洗數(shù)次后，用滅菌濕紗布包裹保濕，在人工氣候箱中，置于251:下催芽，每天早晚用無(wú)菌水各沖洗一次，直至出芽，
[0019]⑷無(wú)菌土制備:將草炭土、蛭石和河沙按2: 1: 1的比例配制混合土，置高溫高壓滅菌器中1211下滅菌2卜，裝入直徑巧挪※高13(^1營(yíng)養(yǎng)缽中，
[0020](5)播種:將經(jīng)催芽的樟子松種子播入營(yíng)養(yǎng)缽中，每缽30顆種子，上覆2挪厚無(wú)菌土，澆透水后放入大棚中培養(yǎng)，待幼苗出土后，定苗至每缽15株，進(jìn)行常規(guī)的日常管護(hù)，
[0021](6)菌劑接種:采取打孔灌根接種的方式，在出苗30(1進(jìn)行接種，每盆接種褐環(huán)乳牛肝菌菌劑400匕待苗木生長(zhǎng)30(1后，以同樣的方式接種綠木霉菌劑。
[0022]實(shí)施例2、
[0023](1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng):采用的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，馬鈴薯2108，葡萄糖198，磷酸二氫鉀38，硫酸鎂1.58，水10000匕將制作好的培養(yǎng)基裝入50011^的三角瓶中，裝液量2601111/5001111，置于121。0高壓滅菌鍋中滅菌20111111，在無(wú)菌條件下接種褐環(huán)乳牛肝菌和綠木霉，接種量12%，將接種后的三角瓶置于轉(zhuǎn)速13017111111，溫度261:的搖床培養(yǎng)，發(fā)酵天數(shù)褐環(huán)乳牛肝菌25(1，綠木霉4(1，
[0024](2)菌劑制作:將褐環(huán)乳牛肝菌、綠木霉發(fā)酵液在無(wú)菌條件下粉碎，加入無(wú)菌水配成發(fā)酵液:無(wú)菌水濃度為1: 5，
[0025](3)種子處理:將供試種子用0.5%高錳酸鉀消毒30-1清水沖洗數(shù)次后，用滅菌濕紗布包裹保濕，在人工氣候箱中，置于251:下催芽，每天早晚用無(wú)菌水各沖洗一次，直至出芽，
[0026]⑷無(wú)菌土制備:將草炭土、蛭石和河沙按2: 1: 1的比例配制混合土，置高溫高壓滅菌器中1211下滅菌2卜，裝入直徑巧挪※高13(^1營(yíng)養(yǎng)缽中，
[0027](5)播種:將經(jīng)催芽的樟子松種子播入營(yíng)養(yǎng)缽中，每缽30顆種子，上覆2挪厚無(wú)菌土，澆透水后放入大棚中培養(yǎng)，待幼苗出土后，定苗至每缽15株，進(jìn)行常規(guī)的日常管護(hù)，
[0028](6)菌劑接種:采取打孔灌根接種的方式，在出苗30(1進(jìn)行接種，每盆接種褐環(huán)乳牛肝菌菌劑450匕待苗木生長(zhǎng)30(1后，以同樣的方式接種綠木霉菌劑。
[0029]實(shí)施例3、
[0030](1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng):采用的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，馬鈴薯2508，葡萄糖208，磷酸二氫鉀38，硫酸鎂1.58，水10000匕將制作好的培養(yǎng)基裝入50011^的三角瓶中，裝液量3001111/5001111，置于121。0高壓滅菌鍋中滅菌20111111，在無(wú)菌條件下接種褐環(huán)乳牛肝菌和綠木霉，接種量15%，將接種后的三角瓶置于轉(zhuǎn)速14017111111，溫度271:的搖床培養(yǎng)，發(fā)酵天數(shù)褐環(huán)乳牛肝菌30(1，綠木霉5(1，
[0031](2)菌劑制作:將褐環(huán)乳牛肝菌、綠木霉發(fā)酵液在無(wú)菌條件下粉碎，加入無(wú)菌水配成發(fā)酵液:無(wú)菌水濃度為1: 5，
[0032](3)種子處理:將供試種子用0.5%高錳酸鉀消毒30-1清水沖洗數(shù)次后，用滅菌濕紗布包裹保濕，在人工氣候箱中，置于251:下催芽，每天早晚用無(wú)菌水各沖洗一次，直至出芽，
[0033]⑷無(wú)菌土制備:將草炭土、蛭石和河沙按2: 1: 1的比例配制混合土，置高溫高壓滅菌器中1211下滅菌2卜，裝入直徑巧挪※高13(^1營(yíng)養(yǎng)缽中，
[0034](5)播種:將經(jīng)催芽的樟子松種子播入營(yíng)養(yǎng)缽中，每缽30顆種子，上覆2挪厚無(wú)菌土，澆透水后放入大棚中培養(yǎng)，待幼苗出土后，定苗至每缽15株，進(jìn)行常規(guī)的日常管護(hù)，
[0035](6)菌劑接種:采取打孔灌根接種的方式，在出苗30(1進(jìn)行接種，每盆接種褐環(huán)乳牛肝菌菌劑500匕待苗木生長(zhǎng)30(1后，以同樣的方式接種綠木霉菌劑。
【權(quán)利要求】
1.一種提高樟子松苗木抗逆性的方法，其特征在于: (1)菌絲體發(fā)酵液培養(yǎng):采用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，馬鈴薯180-250g，葡萄糖18-20g，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5g，水lOOOmL，將制作好的培養(yǎng)基裝入500mL的三角瓶中，裝液量200-300mL/500mL，置于121°C高壓滅菌鍋中滅菌20min，在無(wú)菌條件下接種褐環(huán)乳牛肝菌和綠木霉，接種量10% -15%，將接種后的三角瓶置于轉(zhuǎn)速120-140r/min，溫度25°C -27°C的搖床培養(yǎng)，發(fā)酵天數(shù)褐環(huán)乳牛肝菌20d-30d，綠木霉3d-5d， (2)菌劑制作:將褐環(huán)乳牛肝菌、綠木霉發(fā)酵液在無(wú)菌條件下粉碎，加入無(wú)菌水配成發(fā)酵液:無(wú)菌水濃度為1: 5， (3)種子處理:將供試種子用0.5%高錳酸鉀消毒30min，清水沖洗數(shù)次后，用滅菌濕紗布包裹保濕，在人工氣候箱中，置于25°C下催芽，每天早晚用無(wú)菌水各沖洗一次，直至出芽， (4)無(wú)菌土制備:將草炭土、蛭石和河沙按2: I: I的比例配制混合土，置高溫高壓滅菌器中121°C下滅菌2h，裝入直徑15cmX高13cm營(yíng)養(yǎng)缽中， (5)播種:將經(jīng)催芽的樟子松種子播入營(yíng)養(yǎng)缽中，每缽30顆種子，上覆2cm厚無(wú)菌土，澆透水后放入大棚中培養(yǎng)，待幼苗出土后，定苗至每缽15株，進(jìn)行常規(guī)的日常管護(hù)， (6)菌劑接種:采取打孔灌根接種的方式，在出苗30d進(jìn)行接種，每盆接種褐環(huán)乳牛肝菌菌劑40mL-50mL，待苗木生長(zhǎng)30d后，以同樣的方式接種綠木霉菌劑。
【文檔編號(hào)】A01C1/00GK104396707SQ201410275883
【公開(kāi)日】2015年3月11日 申請(qǐng)日期:2014年6月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月19日
【發(fā)明者】宋瑞清, 尹大川, 鄧勛 申請(qǐng)人:東北林業(yè)大學(xué), 宋瑞清, 尹大川