一種無公害的水產(chǎn)養(yǎng)殖抗菌殺蟲制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明是一種應用于水產(chǎn)養(yǎng)殖領域的防治寄生蟲和細菌性病害的制劑及其制備方法。其特征在于含印楝素干粉1～45％，溶菌酶干粉1～25％，潤濕劑1～10％，分散劑1～8％，崩解劑1～5％，乳化劑1～10％，黏結劑0.01～2％，填充劑適量的能速溶水的粒劑。本發(fā)明屬于水分散粒劑，利用印楝素與溶菌酶間的協(xié)同增效作用，殺蟲與抗菌消炎同步進行，治療效果明顯。制劑PH4～6保證了活性物質(zhì)穩(wěn)定，保質(zhì)期長。天然殺蟲和抗菌物質(zhì)復配克服了抗藥性，且具有廣譜、高效、低毒、無污染、無殘留的優(yōu)點，從而可以代替?zhèn)鹘y(tǒng)的化學殺蟲劑和抗生素，為無公害的水產(chǎn)養(yǎng)殖模式創(chuàng)造了有利的條件，保護生態(tài)環(huán)境和消費者的食品安全。
【專利說明】一種無公害的水產(chǎn)養(yǎng)殖抗菌殺蟲制劑及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖所使用的防治寄生蟲細菌性病害的藥物制劑的制備方法，特別涉及一種以印楝素和溶菌酶復配驅(qū)殺水產(chǎn)動物體內(nèi)寄生蟲與抗菌消炎同步進行，一劑雙效的創(chuàng)新制劑的制備方法及其在水產(chǎn)養(yǎng)殖領域的應用。
【背景技術】
[0002]魚類寄生蟲病是魚類養(yǎng)殖業(yè)中的主要病害之一，其流行區(qū)域廣、時間長，可引起魚的大量死亡。以往水產(chǎn)養(yǎng)殖上使用農(nóng)藥、重金屬鹽類防治魚類寄生蟲病效果不錯，但隨著時間的推移，抗藥性不斷呈現(xiàn)。同時這類藥物對水產(chǎn)生物具有蓄積殘留效應，可引發(fā)水產(chǎn)品質(zhì)量問題。出口產(chǎn)品藥殘超標、屢遭禁運，使人們重新認識到化學殺蟲劑帶來的諸多問題，當前大力推廣的健康無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖模式迫切需要尋求一種新型的無公害防治藥物。生物制劑由于具有純天然、無公害、針對性強，對人畜安全，無毒害，不污染環(huán)境，也不易產(chǎn)生抗性等優(yōu)點，受到世界各國農(nóng)藥研究和開發(fā)者們的高度關注。發(fā)展生物農(nóng)藥是我國發(fā)展綠色水產(chǎn)業(yè)、增強水產(chǎn)品國際競爭力的一條重要途徑。植物源殺蟲劑是生物農(nóng)藥的重要組成部分，印楝作為世界公認的最有潛力的殺蟲植物，以其殺蟲的廣譜性、效果顯著性等特點，成為當今世界最受重視的殺蟲植物，印楝無公害生物農(nóng)藥的制備是當今國際上無公害生物農(nóng)藥創(chuàng)新的熱點。
[0003]印楝素是從印楝樹中提取的三萜化合物，屬于高度氧化的檸檬素類。印楝素對昆蟲具有拒食、忌避，調(diào)節(jié)生長和絕育等多種作用，在農(nóng)業(yè)上作為殺蟲劑使用已取得了良好的效果，但印楝素作為魚類寄 生蟲病防治藥物在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)上應用這個領域的研究很少，現(xiàn)有的技術都是照搬了印楝素在種植業(yè)等其他農(nóng)業(yè)領域的應用方法，如已經(jīng)公開的中國專利申請“水產(chǎn)動物殺蟲劑”(公布號CN102429896A)，是將印楝素浸膏、氯氰菊酯苯油、高氯乳化劑、二甲基酰胺、二甲苯復配成乳化液，采用全池潑灑的方式防治水產(chǎn)寄生蟲，實際效果并不理想，實際上還是化學藥在起作用，而且極易對水體造成二次污染。特別是菊酯類藥物對蝦等甲殼類水產(chǎn)動物產(chǎn)生毒害，副作用太大。因此，由于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的特殊性，不能照搬普通種植業(yè)使用的防治害蟲經(jīng)驗，對印楝素等植物源殺蟲劑作為水產(chǎn)藥物進入水體后的毒理試驗是非常必要的，對復配劑型的選擇也是非常關鍵的。
[0004]寄生蟲對魚類的影響顯著時可引起宿主生長發(fā)育緩慢，抵抗力下降，甚至造成死亡。有時寄生蟲的影響并不顯著，養(yǎng)殖者則不予重視。但從實際生產(chǎn)情況看，水產(chǎn)動物的細菌性疾病主要是細菌性體表病,而寄生蟲造成的損傷則是引起這類疾病發(fā)生和流行的主要原因，兩者是一體的。在選擇水產(chǎn)殺蟲劑的同時應該選擇抗菌消炎的藥物與之配伍，收到標本兼治的良好效果。為了防治濫用抗生素造成耐藥性，我們選擇了同樣來源于天然的抗菌消炎藥物溶菌酶，與印楝素復配。
[0005]溶菌酶廣泛分布于動物、植物和微生物中，在雞蛋清中含量較高。具有抗菌消炎、抗病毒、增強免疫力、促進雙岐桿菌增殖等作用。溶菌酶能有效地水解細菌細胞壁的肽聚糖，使細胞壁變的松弛，細胞溶解死亡。近年來，溶菌酶在醫(yī)療、食品防腐、畜牧及生物工程中，具有廣泛的應用，因為抗菌力強且純天然、無毒、無害，應用前景非常廣闊。研究發(fā)現(xiàn)溶菌酶能直接水解革蘭氏陽性菌，在分泌型免疫球蛋白A、補體的參與下，還能水解革蘭氏陰性菌如大腸桿菌等。此外，它還可與各種誘發(fā)炎癥的酸性物質(zhì)結合，使其失活，并能增強抗生素和其他藥物的療效，改善組織基質(zhì)的粘多糖代謝，從而達到消炎、修復組織的目的。
[0006]研究表明，印楝素與溶菌酶在水體中的溶解度均非常良好，且兩種物質(zhì)都屬于干粉狀，性狀接近。利用現(xiàn)有成熟的水分散顆粒劑加工技術，可以很容易把兩者復配成水分散粒劑，并應用于水產(chǎn)養(yǎng)殖。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的即在于克服現(xiàn)有技術的缺點，提供一種對水產(chǎn)動物寄生蟲及細菌性病害防治效果理想，克服寄生蟲和細菌抗藥性，廣譜、安全、無公害的抗菌殺蟲天然復合制劑，針對水產(chǎn)養(yǎng)殖的特點，使用方便、起效快、并降低用藥成本。
[0008]本發(fā)明的另一個目的是提供上述天然復合制劑的制作方法。
[0009]本發(fā)明的再一目的是提供上述復合制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中作為殺滅水生動物寄生蟲、治療水產(chǎn)動物皮膚病、腸胃炎等的用途。
[0010]本發(fā)明的目的通過以下技術方案來實現(xiàn):印楝素與溶菌酶復配的抗菌殺蟲水分散粒劑，它包括印楝素干粉，它還包括溶菌酶干粉，潤濕劑、分散劑、崩解劑、乳化劑、粘結劑和填充劑，以上各成分的與總重量比例印楝素1-45%，溶菌酶1_25%，潤濕劑1_10%，分散劑1_8%，崩解劑1_5%，乳化劑1-10%，粘結劑0.01-2%，PH調(diào)節(jié)劑適量、填充劑余量。
[0011]所述的印楝素干粉，為含量達到40%以上的印楝素原藥，可以通過以下步驟取得:取粉碎的印楝種仁，用60-70%的甲醇或乙醇回流提取，調(diào)至醇含20%，，靜止置冷卻，分離除去油層，得到脫油的印楝提取物，通過控制大孔吸附樹脂層析或軸向液相色譜層析，得其中印楝素含量40 %的提取物，提取物脫溶干燥，即為印楝素干粉。印楝素在本發(fā)明水分散顆粒劑的含量為1-45%.[0012]所述的溶菌酶干粉，可以通過以下步驟取得:取雞蛋清，加入2倍量的純凈水稀釋，用醋酸調(diào)節(jié)PH值為3.5，水浴加熱到85。C，攪拌加熱5min，將所得液體3000r/min離心IOmin,收集上清液，將上清液加入處理好的CMS印haroseFF層析柱中，控制流速在200ml/h左右，吸附完畢用純凈水沖洗吸附柱，以除去雜蛋白，用0.lmol/L的氯化鈉溶液洗脫溶菌酶，收集洗脫液，濃縮、干燥即得溶菌酶干粉，酶活性1500u/mg。溶菌酶在本發(fā)明中的含量為1-25%。
[0013]所述的的潤濕劑，可以是蓖麻油聚氧乙烯醚、蔗糖酯、吐溫、烷基醚硫酸鈉，烷基苯磺酸鹽、拉開粉、多山梨醇酯中任何一種或多種，本發(fā)明優(yōu)選為拉開粉。含量1-10%。
[0014]所述的分散劑可以是奈磺酸鹽、木質(zhì)素磺酸鈣、NNO中的一種，本發(fā)明優(yōu)選NNO為分散劑，含量為1-8%.[0015]所述的崩解劑為硫酸銨、低取代羥丙基甲基纖維素、干淀粉、甲基淀粉鈉、泡騰崩解劑中任一種。本發(fā)明中更優(yōu)選為硫酸銨，含量1_5%。
[0016]所述的乳化劑，可以為0P-10，TX-10，020IB，優(yōu)選為020IB，含量為1_10%。
[0017]所述的粘結劑優(yōu)選為淀粉、甲基纖維素、羧甲基纖維素、聚乙烯醇中的一種或多種。優(yōu)選為聚乙烯醇含量為0.01-2%.[0018]所述的PH調(diào)節(jié)劑，可以為有機酸，無機酸、固體酸，本發(fā)明優(yōu)選為固體酸。印楝素與溶菌酶在PH4-6范圍最穩(wěn)定，優(yōu)選為調(diào)PH為5.5。
[0019]所述的填充劑優(yōu)選為膨潤土、高嶺土、輕鈣、白炭黑中的一種或幾種，使用多種時，總使用量不能大于份量的最大值。本發(fā)明中優(yōu)選為白炭黑。
[0020]本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，具有以下優(yōu)點及有益效果:
[0021](I)印楝素與溶菌酶協(xié)同發(fā)揮作用，特別對水產(chǎn)動物寄生蟲引起的皮膚病、腸胃炎有顯著效果，同時也適于防治已產(chǎn)生嚴重抗藥性的多類病害。
[0022](2)采用印楝素與溶菌酶混配水分散粒劑，確立了獲得良好抗菌殺蟲效果的混配比例，降低了印楝素的用量和農(nóng)藥殘留量，對環(huán)境無污染、無殘留，高效、低毒，同時能夠延緩害蟲抗藥性的產(chǎn)生。
[0023](3)減輕水產(chǎn)品的藥物殘留，有利于提高水產(chǎn)品的市場競爭能力，有利于保護人畜安全，保護生態(tài)環(huán)。
[0024](4)制劑的PH值調(diào)節(jié)為弱酸性，可保持印楝素和溶菌酶活性穩(wěn)定，延長了藥劑的保質(zhì)期。
【具體實施方式】
[0025]下面結合優(yōu)選的實例對本發(fā)明作進一步詳細的描述，濕潤劑、粘結劑、崩解劑、填充劑可參照本領域常規(guī)使用，并不因此將發(fā)明限定于以下實施例中。 [0026]實施例1
[0027]生產(chǎn)濃度為18%的印楝素與溶菌酶混配水分散粒劑，各組份配比是:
[0028](I)加入10% (重量)印楝素干粉；
[0029](2)加入8% (重量)溶菌酶干粉
[0030](3)加入2% (重量)的拉開粉
[0031](4)加入 5% (重量)的 NNO
[0032](5)加入3.5% (重量)的硫酸銨
[0033](6)加入 2.5% (重量)的 0201B
[0034](7)加入0.1 (重量)的聚乙烯醇
[0035](8)加入68.9 (重量)預先調(diào)節(jié)PH值為5.5的白炭黑
[0036]將配方混合物進行超細粉碎后造粒、干燥、篩分即得產(chǎn)品。
[0037]實施例2
[0038]生產(chǎn)濃度為3%的印楝素與溶菌酶混配水分散劑，各組份比例是:
[0039](I)加入1.8% (重量)的印楝素干粉
[0040](2)加入1.2% (重量)的溶菌酶干粉
[0041](3)加入10% (重量)吐溫為潤濕劑
[0042](4)加入10% (重量)甲基纖維素為粘結劑
[0043](5)加入15% (重量)干淀粉為崩解劑
[0044](6)加入55% (重量)預先調(diào)節(jié)PH值為5.5的高嶺土為填充劑
[0045]將配方料混合物進行超細粉碎后造粒、干燥、篩分即得產(chǎn)品。
[0046]實施例3[0047]生產(chǎn)濃度為58%的印楝素與溶菌酶混配水分散粒劑，各組分配比是:
[0048](I)加入40% (重量)印楝素干粉
[0049](2)加入18% (重量)溶菌酶干粉
[0050](3)加入11% (重量)蔗糖酯為潤濕劑
[0051](4)加入13% (重量)淀粉為粘結劑
[0052](5)加入8% (重量)甲基淀粉鈉為崩解劑
[0053](6)加入17% (重量)預先調(diào)節(jié)PH值為5.5的膨潤土為填充劑
[0054]將配方料混合物進行超微粉碎后造粒、干燥、篩分即得產(chǎn)品。
[0055]印楝素與溶菌酶水分散粒劑的魚類寄生蟲的殺滅試驗
[0056]采用靜態(tài)室內(nèi)試驗法，在一組水族箱中放入曝氣除氯的自來水，有效體積為50L，PH7.2，DO大于5mg/L，硬度為8.5德國度，試驗水溫為28攝氏度，將感染寄生蟲的病魚移入水族箱中，每箱10條。試驗設置4個濃度組,分別是0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L的印楝素與溶菌酶的混配水分散粒劑，另設空白對照組。用藥后連續(xù)觀察3d，以寄生蟲的生存狀況來反映藥物的殺蟲活性。
[0057]試驗結果
[0058] 試驗3d后，0.2mg/L組病魚腮上的車輪蟲減少了 58%，0.4mg/L處理組車輪蟲數(shù)減少了 81%，0.6mg/L處理組車輪蟲數(shù)減少93%，0.8mg/L處理組車輪蟲減少100%.表明車輪蟲的減少與藥品濃度呈正比關系。
【權利要求】
1.一種無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖抗菌殺蟲制劑及其制備方法，其特征在于，該制劑是一種以印楝素素與溶菌酶混合復配而成的水分散粒劑，具有抗菌和殺蟲的雙重功效，及其制備的方法，其特征在于制劑中含有以下重量百分比的物質(zhì):印楝素I~45%，溶菌酶I~25%，潤濕劑I~10%，分散劑I~8，崩解劑I~5%，乳化劑I~10，粘結劑0.01~2，填充劑為余量，調(diào)節(jié)制劑PH值為4~6。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖抗菌殺蟲制劑，其特征在于以印楝素與溶菌酶復配制備水分散粒劑，還可以是粉劑、水劑、乳劑、片劑和其它劑型，所有以印楝素與溶菌酶混合復配的劑型，均應包括在此創(chuàng)造范圍之內(nèi)。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖抗菌殺蟲制劑及其制備方法，其特征在于加入了 PH值調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)PH值4~6的范圍內(nèi)，保持印楝素與溶菌酶的活性穩(wěn)定。
4.根據(jù)權利要求1所述的一種無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖抗菌制劑及其制備方法，其特征在于，潤濕劑優(yōu)選為拉開粉，占重量百分比I~10%，分散劑優(yōu)選為NNO，占重量百分比I~8%，崩解劑優(yōu)選為硫酸銨，占重量百分比I~5%，乳化劑優(yōu)選為020IB，占重量百分比I~10%，粘結劑優(yōu)選為聚乙烯醇，占重量百分比0.01~2%。
5.根據(jù)權利要求 1所述的一種無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖抗菌殺蟲制劑，本發(fā)明的用途在于治療水產(chǎn)動物疾病，防治水產(chǎn)寄生蟲病，但不限于水產(chǎn)養(yǎng)殖的范圍，畜牧業(yè)、種植業(yè)等農(nóng)業(yè)領域均可使用，也在本專利的保護要求范圍。
【文檔編號】A01N63/02GK103990117SQ201410168370
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年4月25日 優(yōu)先權日:2014年4月25日
【發(fā)明者】徐文中, 董燕聲 申請人:珠海市康益達生物科技有限公司