一種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，包括如下步驟：A、外植體處理；B、啟動(dòng)培養(yǎng)；C、叢生芽培養(yǎng)；D、壯苗培養(yǎng)：將叢生芽培養(yǎng)的無(wú)菌苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基，白天溫度為25±1℃，夜間22±1℃，光照強(qiáng)度為50μmol·m-2·s-1，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間75天；E、生根培養(yǎng)：白天溫度為25±1℃，夜間22±1℃，光照強(qiáng)度為50μmol·m-2·s-1，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間90天。本發(fā)明不受時(shí)間和季節(jié)環(huán)境的變化，并且大大提高繁殖速率，提高高山杜鵑粉金蝶的觀賞價(jià)值和商業(yè)價(jià)值。
【專利說(shuō)明】一種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，屬于植物栽培【技術(shù)領(lǐng)域】，主要用于高山杜鵑新品種的大批量繁育。
【背景技術(shù)】
[0002]高山杜醇粉金蝶(Rhododendron hybrides “Cosmopolitan”)為杜醇科杜醇屬的雜交栽培品種，常綠灌木和小喬木，花粉紅色，邊緣褪為粉白色，帶有一個(gè)褐色的大紅斑，植株茂密，株型舒展，葉綠色光亮，耐寒且耐熱，_23°C不落葉，抗病力強(qiáng)，具極高的觀賞價(jià)值。高山杜鵑繁殖方法應(yīng)用播種繁殖、扦插繁殖、壓條繁殖、嫁接繁殖等繁殖方法，但是這些技術(shù)受季節(jié)、母株材料等很多因素限制，成活率極低，很難進(jìn)行規(guī)?；a(chǎn)。高山杜鵑組織培養(yǎng)只涉及到馬纟嬰杜醇(Rhododendron delavayi Franch)、小葉杜醇(RhododendronParvifolium Adorns)、牛皮杜醇(Rhododendron Chrysantiuum pall)等幾個(gè)品種，國(guó)內(nèi)外尚未報(bào)道高山杜鵑粉金蝶組織培養(yǎng)整個(gè)繁殖體系的研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提供一種不受外界自然環(huán)境限制的高山杜鵑粉金蝶組織培養(yǎng)方法，以提高繁殖速率和商業(yè)價(jià)值型。
[0004]這種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，包括如下步驟:
[0005]A、外植體處理:選取健壯無(wú)害的高山杜鵑粉金蝶帶芽莖段為外植體，先用75%的酒精浸泡30s，無(wú)菌水沖洗3次后，再用0.1%升汞進(jìn)行滅菌3min，無(wú)菌水沖洗3次；
[0006]B、啟動(dòng)培養(yǎng):將滅菌處理的外植體接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基，白天溫度為25±1°C，夜間22±1°C，光照強(qiáng)度為50μπιο1.m-2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間30天；
[0007]上述的啟動(dòng)培養(yǎng)基以Read培養(yǎng)基為母液，見(jiàn)附表1。添加IBA0.2mg/L,TDZ0.5mg/L,鹿糖25mg/L,瓊脂6.5mg/L,調(diào)pH=5.3,經(jīng)過(guò)1210高壓滅菌20min后備用。
[0008]C、叢生芽培養(yǎng):將啟動(dòng)培養(yǎng)生長(zhǎng)的無(wú)菌苗轉(zhuǎn)接到叢生芽培養(yǎng)基，白天溫度為25±1°C，夜間22±1°C，光照強(qiáng)度為50 μ mo I.m-2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間75天;
[0009]D、壯苗培養(yǎng):將叢生芽培養(yǎng)的無(wú)菌苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基，白天溫度為25土1°C，夜間22±1°C，光照強(qiáng)度為50μπιο1.m-2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間75天；
[0010]E、生根培養(yǎng):白天溫度為25±1°C，夜間22±1°C，光照強(qiáng)度為50 μ mo 1.m_2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間90天。
[0011]所述的高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，步驟D所述壯苗培養(yǎng)基以WPM培養(yǎng)基為母液，見(jiàn)附表2。添加鹿糖25mg/L,瓊脂6.5mg/L,調(diào)pH=5.3,經(jīng)過(guò)121/C高壓滅菌20min
后備用。
[0012]所述的高山杜胃$粉金蝶組培快速繁殖方法,步驟E所述的生根培養(yǎng)基以Anderson培養(yǎng)基為母液，見(jiàn)附表3。添加NAA0.2mg/L, IBA 0.2mg/L,鹿糖25mg/L,瓊脂6.5mg/L,pH=5.3,經(jīng)過(guò)121 °C高壓滅菌20min后備用。[0013]本發(fā)明而利用組織培養(yǎng)繁殖方法研究高山杜鵑粉金蝶，不受時(shí)間和季節(jié)環(huán)境的變化，并且大大提高繁殖速率，提高高山杜鵑粉金蝶的觀賞價(jià)值和商業(yè)價(jià)值。對(duì)保護(hù)優(yōu)異種質(zhì)資源、挖掘創(chuàng)造新種質(zhì)有著重大意義，應(yīng)用前景十分廣闊。
【具體實(shí)施方式】[0014]下面結(jié)合具體實(shí)例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的方法步驟，
[0015]所述高山杜鵑粉金蝶品種09年11月份從比利時(shí)根特引進(jìn)，之后在石家莊市農(nóng)林科學(xué)研究院馴化近4年，這種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，包括如下步驟:
[0016]A、外植體處理:選取健壯無(wú)害的高山杜鵑粉金蝶帶芽莖段為外植體，先用75%的酒精浸泡30s，無(wú)菌水沖洗3次后，再用0.1%升汞進(jìn)行滅菌3min，無(wú)菌水沖洗3次；
[0017]B、啟動(dòng)培養(yǎng):將滅菌處理的外植體接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基，白天溫度為25±1°C，夜間22±1°C，光照強(qiáng)度為50μπιο1.m-2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間30天；
[0018]上述的啟動(dòng)培養(yǎng)基以Read培養(yǎng)基為母液，見(jiàn)附表1。添加IBA0.2mg/L,TDZ0.5mg/L,鹿糖25mg/L,瓊脂6.5mg/L,調(diào)pH=5.3,經(jīng)過(guò)1210高壓滅菌20min后備用。
[0019]C、叢生芽培養(yǎng):將啟動(dòng)培養(yǎng)生長(zhǎng)的無(wú)菌苗轉(zhuǎn)接到叢生芽培養(yǎng)基，白天溫度為25±1°C，夜間22±1°C，光照強(qiáng)度為50ymol.m-2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間75天；
[0020]上述的叢生芽培養(yǎng)基以WPM培養(yǎng)基為母液，見(jiàn)附表2。添加2ip2.5mg/L,NAA0.lmg/L,鹿糖25mg/L,瓊脂6.5mg/L,調(diào)pH=5.3,經(jīng)過(guò)1210高壓滅菌20min后備用。
[0021]D、壯苗培養(yǎng):將叢生芽培養(yǎng)的無(wú)菌苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基，白天溫度為25土1°C，夜間22±1°C，光照強(qiáng)度為50μπιο1.m-2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間75天；
[0022]上述壯苗培養(yǎng)基以WPM培養(yǎng)基為母液，見(jiàn)附表2。添加蔗糖25mg/L，瓊脂6.5mg/L,調(diào)pH=5.3,經(jīng)過(guò)121 °C高壓滅菌20min后備用。
[0023]E、生根培養(yǎng):白天溫度為25±1°C，夜間22±1°C，光照強(qiáng)度為50μπιο1 *m-2 *s-l,每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間90天。
[0024]上述的生根培養(yǎng)基以Anderson培養(yǎng)基為母液，見(jiàn)附表3。添加NAA0.2mg/L,IBA0.2mg/L,鹿糖 25mg/L,瓊脂 6.5mg/L, pH=5.3,經(jīng)過(guò) 121 °C高壓滅菌 20min 后備用。
[0025]附表1:Read培養(yǎng)基母液配制
[0026]
【權(quán)利要求】
1.一種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，包括如下步驟: A、外植體處理:選取健壯無(wú)害的高山杜鵑粉金蝶帶芽莖段為外植體，先用75%的酒精浸泡30s,無(wú)菌水沖洗3次后,再用0.1%升萊進(jìn)行滅菌3min,無(wú)菌水沖洗3次； B、啟動(dòng)培養(yǎng):將滅菌處理的外植體接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基，白天溫度為25±1°C，夜間22±1°C，光照強(qiáng)度為50μmο1.m-2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間30天； C、叢生芽培養(yǎng):將啟動(dòng)培養(yǎng)生長(zhǎng)的無(wú)菌苗轉(zhuǎn)接到叢生芽培養(yǎng)基，白天溫度為25土1°C，夜間22±1°C，光照強(qiáng)度為50μmο1.m-2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間75天； D、壯苗培養(yǎng):將叢生芽培養(yǎng)的無(wú)菌苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基，白天溫度為25土TC，夜間22土 1°C，光照強(qiáng)度為50μmο1.m-2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間75天； E、生根培養(yǎng):白天溫度為25土1°C，夜間22土1°C，光照強(qiáng)度為50ymol.m-2.s_l，每天光照12h，培養(yǎng)時(shí)間90天。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，其特征在于:步驟B所述的啟動(dòng)培養(yǎng)基以Read培養(yǎng)基為母液，添加IBA0.2mg/L, TDZ0.5mg/L,蔗糖25mg/L，瓊脂6.5mg/L,調(diào)pH=5.3,經(jīng)過(guò)121 °C高壓滅菌20min后備用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，其特征在于:步驟C所述的叢生芽培養(yǎng)基以WPM培養(yǎng)基為母液，添加2ip2.5mg/L, NAA0.lmg/L，蔗糖25mg/L，瓊脂6.5mg/L,調(diào)pH=5.3,經(jīng)過(guò)121 °C高壓滅菌20min后備用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，其特征在于:步驟D所述壯苗培養(yǎng)基以WPM培養(yǎng)基為母液，添加蔗糖25mg/L，瓊脂6.5mg/L,調(diào)pH=5.3，經(jīng)過(guò)121°C聞壓滅囷20min后備用。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，其特征在于:步驟E所述的生根培養(yǎng)基以Anderson培養(yǎng)基為母液,添加NAA0.2mg/L, IBA0.2mg/L,鹿糖25mg/L,瓊脂6.5mg/L, pH=5.3,經(jīng)過(guò)121 °C高壓滅菌20min后備用。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103636492SQ201310563498
【公開(kāi)日】2014年3月19日 申請(qǐng)日期:2013年11月14日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月14日
【發(fā)明者】李志斌, 張鐵石, 蔣淑磊, 徐立軍, 白霄霞, 李振勤, 徐秋良, 孫春峰, 姜貴平, 張文芝 申請(qǐng)人:石家莊市農(nóng)林科學(xué)研究院, 石家莊市神州花卉研究所