一種簡易的卵巢體外保存方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種簡易的卵巢體外保存方法。該保存方法是將屠宰場新鮮的動(dòng)物卵巢放入盛生理鹽水的廣口聚丙烯（Polypropylene,簡稱PP）塑料瓶中，蓋上蓋子；將原料活性炭、還原鐵粉、蛭石、NaCl、水按一定比例混合均勻后，密封在用無紡布聚乙烯（polyethylene，簡稱PE）復(fù)合膜制成的三封口袋子中，得原料層；將原料層包裹固定在盛放卵巢的廣口PP塑料瓶外表面后，放入單氣閥自封密閉袋中并抽出其中的空氣，使用的時(shí)候拆開封口即可。本發(fā)明提供的卵巢體外保存方法使用方便、價(jià)格低廉、體積小而且能對(duì)生理鹽水進(jìn)行持續(xù)恒溫加熱，使放置卵巢的生理鹽水穩(wěn)定地保持在30℃～35℃，保溫可長達(dá)8～10h，保溫效果優(yōu)于保溫桶。
【專利說明】一種簡易的卵巢體外保存方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生殖生物學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種簡易的卵巢體外保存方法。
【背景技術(shù)】
[0002]體外受精(IVF)與核移植試驗(yàn)使用的卵母細(xì)胞大都來自屠宰場的卵巢。理論上，動(dòng)物宰殺后，最短的時(shí)間內(nèi)采集卵巢，回收卵母細(xì)胞效果最好。但實(shí)際上，養(yǎng)殖場或屠宰場都與實(shí)驗(yàn)室有一定的距離，需要長距離運(yùn)送，這就存在著卵巢的運(yùn)輸保存方法、溫度和時(shí)間的問題。一般實(shí)驗(yàn)要求將卵巢保存在30-35°C含有雙抗的生理鹽水中，盡快運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。目前大都通過保溫桶運(yùn)輸，即將帶有雙抗的生理鹽水加熱后倒入保溫桶中保存卵巢。用保溫桶不能使生理鹽水持續(xù)恒溫、成本高、攜帶不方便，而且需要人員事先把生理鹽水加熱、測(cè)定溫度后才能保存卵巢，過程繁雜，不便于操作。到現(xiàn)在為止還沒有一種更好的保存卵巢的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的 不足，本發(fā)明的目的在于提供一種簡易的卵巢體外保存方法。該保存方法能對(duì)常溫的生理鹽水進(jìn)行自動(dòng)恒溫加熱來保存卵巢，可持續(xù)恒溫、簡單方便、價(jià)格低廉。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取如下措施:
[0005]本發(fā)明所述簡易的卵巢體外保存方法為:將來自屠宰場的新鮮動(dòng)物卵巢放入盛生理鹽水的廣口聚丙烯(Polypropylene,簡稱PP)塑料瓶中，蓋上蓋子；將原料活性炭、還原鐵粉、蛭石、NaCl、水按一定比例混合均勻后,密封在用無紡布聚乙烯(polyethylene,簡稱PE)復(fù)合膜制成的三封口袋子中，得原料層；將原料層包裹固定在盛放卵巢的廣口 PP塑料瓶外表面后，放入單氣閥自封密閉袋中并抽出其中的空氣，使用的時(shí)候拆開封口即可。
[0006]在上述卵巢體外保存方法中，原料層可對(duì)生理鹽水進(jìn)行自動(dòng)恒溫加熱。原料層自動(dòng)加熱原理是鐵在潮濕空氣中發(fā)生吸氧腐蝕反應(yīng)。即利用鐵氧化反應(yīng)放熱來發(fā)熱?；钚蕴烤哂泻軓?qiáng)的吸附性，在活性炭的疏松結(jié)構(gòu)中儲(chǔ)有水蒸氣，水蒸氣液化成水滴，流出與空氣和鐵粉接觸，在氯化鈉的催化作用下較為迅速的發(fā)生反應(yīng)生成氫氧化鐵，放出熱量。通過鐵粉的緩慢氧化放熱，再通過原電池原理加速氧化，使化學(xué)能轉(zhuǎn)變?yōu)殡娔?，然后利用蛭石來保持溫度，蛭石是?dāng)今世界首屈一指的超級(jí)保溫材料，故能保溫常達(dá)8-10小時(shí)之久，而且整個(gè)過程溫度基本恒定。
[0007]具體地，本發(fā)明所述的卵巢體外保存方法，包括如下步驟:
[0008](I)在廣口 PP塑料瓶中加入1/3-2/3體積的生理鹽水，加入青霉素和鏈霉素，放入屠宰場新鮮的動(dòng)物卵巢，然后蓋上蓋子，得PP塑料瓶I;
[0009](2)將活性炭、還原鐵粉、蛭石、NaCl、水混合均勻后，密封在用無紡布PE復(fù)合膜制成的三封口袋子中，得原料層；
[0010](3)將步驟(2)所得原料層包裹固定在步驟(I)所得PP塑料瓶I的外表面，得PP塑料瓶II;
[0011](4)將步驟(3 )所得PP塑料瓶11放入單氣閥自封密閉袋中，并抽出其中的空氣，使用的時(shí)候拆開封口即可。
[0012]在上述卵巢體外保存方法中，所述步驟(I)中生理鹽水與動(dòng)物卵巢體積之比為10: 2 -8。
[0013]在上述卵巢體外保存方法中，所述步驟(I)中青霉素和鏈霉素的加入量按照每IOOOml生理鹽水加入青霉素和鏈霉素各5-10萬IU計(jì)算。
[0014]在上述卵巢體外保存方法中，所述步驟(2)中活性炭、還原鐵粉、蛭石、NaCl和水的質(zhì)量之比為I-3: 3-4: I-3: I-3: I-2。
[0015]本發(fā)明所述的卵巢體外保存方法適合于一般哺乳動(dòng)物卵巢的體外保存，包括山羊、綿羊、牛、豬、駱駝和鹿等動(dòng)物的卵巢。
[0016]本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明所述簡易的卵巢體外保存方法使用方便、價(jià)格低廉、體積小而且能對(duì)生理鹽水進(jìn)行持續(xù)恒溫加熱，使放置卵巢的生理鹽水穩(wěn)定地保持在30°C-35°C，保溫可長達(dá)8-10h，保溫效果優(yōu)于保溫桶，而且便于攜帶。通過此方法可以為科研上利用屠宰場卵巢提供一種簡便，溫度相對(duì)恒定的運(yùn)輸小環(huán)境，便于卵巢體外操作。
【具體實(shí)施方式】
[0017]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明的
【發(fā)明內(nèi)容】
作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。應(yīng)理解，本發(fā)明的實(shí)施例只用于說明本發(fā)明而非限制本發(fā)明，在不脫離本發(fā)明技術(shù)思想的情況下，根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，做出的各種替換和變更，均應(yīng)包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0018]實(shí)施例1
[0019](I)在直徑為7cm、高度為8cm的廣口 PP塑料瓶中加入1/2體積(150ml)的生理鹽水，向生理鹽水中分別加入青霉素0.8萬IU、鏈霉素0.8萬IU，放入30枚(50ml)來自屠宰場的新鮮山羊卵巢，然后蓋上蓋子，得PP塑料瓶I ;
[0020](2)將還原鐵粉15g、活性炭5g、蛭石10g、NaC15g、水IOmL混合均勻后,密封在用無紡布PE復(fù)合膜制成的長22cm、寬6cm的三封口袋子中，得原料層；
[0021](3)將步驟(2)所得原料層包裹固定在步驟(I)所得PP塑料瓶I的外表面，得PP塑料瓶II;
[0022](4 )將步驟(3 )所得PP塑料瓶11放入單氣閥自封密閉袋中，并抽出其中的空氣，使用的時(shí)候拆開封口即可。
[0023]上述保存方法可使放置卵巢的生理鹽水穩(wěn)定地保持在30°C-35°C，保溫可長達(dá)8h。
[0024]實(shí)施例2
[0025](I)在直徑為8cm、高度為12cm的廣口 PP塑料瓶中加入2/3體積(400ml)的生理鹽水，向生理鹽水中分別加入青霉素4萬IU、鏈霉素4萬IU,放入100枚(IOOml)來自屠宰場的新鮮綿羊卵巢，然后蓋上蓋子，得PP塑料瓶I ;
[0026](2)將還原鐵粉40g、活性炭10g、蛭石10g、NaCllOg、水20mL混合均勻后，密封在用無紡布PE復(fù)合膜制成的長26cm、寬IOcm的三封口袋子中，得原料層；
[0027](3)將步驟(2)所得原料層包裹固定在步驟(I)所得PP塑料瓶I的外表面，得PP塑料瓶II;
[0028](4 )將步驟(3 )所得PP塑料瓶11放入單氣閥自封密閉袋中，并抽出其中的空氣，使用的時(shí)候拆開封口即可。
[0029]上述保存方法可使放置卵巢的生理鹽水穩(wěn)定地保持在30°C-35°C，保溫可長達(dá)10h。
[0030]實(shí)施例3
[0031](I)在直徑為10cm、高度為12cm的廣口 PP塑料瓶中加入1/3積(300ml)的生理鹽水，向生理鹽水中分別加入青霉素2.7萬IU、鏈霉素2.7萬IU，放入60枚(200ml)來自屠宰場的新鮮牛卵巢，然后蓋上蓋子，得PP塑料瓶I ;
[0032](2)將還原鐵粉27g、活性炭9g、蛭石27g、NaC19g、水9mL混合均勻后，密封在用無紡布PE復(fù)合膜制成的長32cm、 寬7cm的三封口袋子中，得原料層；
[0033](3)將步驟(2)所得原料層包裹固定在步驟(I)所得PP塑料瓶I的外表面，得PP塑料瓶II;
[0034](4 )將步驟(3 )所得PP塑料瓶11放入單氣閥自封密閉袋中，并抽出其中的空氣，使用的時(shí)候拆開封口即可。
[0035]上述保存方法可使放置卵巢的生理鹽水穩(wěn)定地保持在30°C-35°C，保溫可長達(dá)10h。
[0036]實(shí)施例4
[0037](I)在直徑為9cm、高度為IOcm的廣口 PP塑料瓶中加入2/5體積(240ml的生理鹽水，向生理鹽水中分別加入青霉素1.7萬IU、鏈霉素1.7萬IU，放入50枚(IOOml)來自屠宰場的新鮮豬卵巢，然后蓋上蓋子，得PP塑料瓶I ;
[0038](2)將還原鐵粉18g、活性炭12g、蛭石6g、NaC112g、水6mL混合均勻后，密封在用無紡布PE復(fù)合膜制成的長28cm、寬6cm的三封口袋子中，得原料層；
[0039](3)將步驟(2)所得原料層包裹固定在步驟(I)所得PP塑料瓶I的外表面，得PP塑料瓶II;
[0040](4 )將步驟(3 )所得PP塑料瓶11放入單氣閥自封密閉袋中，并抽出其中的空氣，使用的時(shí)候拆開封口即可。
[0041]上述保存方法可使放置卵巢的生理鹽水穩(wěn)定地保持在30°C-35°C，保溫可長達(dá)9h。
[0042]本發(fā)明所述的卵巢體外保存方法適合于一般哺乳動(dòng)物卵巢。在上述實(shí)施例中，所采用的動(dòng)物卵巢為山羊、綿羊、牛和豬。但是這些動(dòng)物卵巢并不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍，本發(fā)明還適用于駱駝和鹿等其它動(dòng)物卵巢的體外保存，可使放置卵巢的生理鹽水穩(wěn)定地保持在30°C-35°C，保溫可長達(dá)8-10h，保溫效果明顯優(yōu)于保溫桶。
【權(quán)利要求】
1.一種簡易的卵巢體外保存方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)在廣口聚丙烯塑料瓶中加入1/3-2/3體積的生理鹽水，加入青霉素和鏈霉素，放入屠宰場新鮮的動(dòng)物卵巢，然后蓋上蓋子，得聚丙烯塑料瓶I ; (2)將活性炭、還原鐵粉、蛭石、NaCl、水混合均勻后，密封在用無紡布聚乙烯復(fù)合膜制成的三封口袋子中，得原料層； (3 )將步驟(2 )所得原料層包裹固定在步驟(I)所得聚丙烯塑料瓶I的外表面，得聚丙烯塑料瓶II; (4)將步驟(3)所得聚丙烯塑料瓶II放入單氣閥自封密閉袋中，并抽出其中的空氣，使用的時(shí)候拆開封口即可。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的卵巢體外保存方法，其特征在于:所述步驟(I)中生理鹽水與動(dòng)物卵巢體積之比為10: 2-8。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的卵巢體外保存方法，其特征在于:所述步驟(I)中青霉素和鏈霉素的加入量按照每IOOOml生理鹽水加入青霉素和鏈霉素各5-10萬IU計(jì)算。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的卵巢體外保存方法，其特征在于:所述步驟(2)中活性炭、還原鐵粉、蛭石、NaC l和水的質(zhì)量之比為I-3: 3-4: I-3: I-3: I-2。
【文檔編號(hào)】A01N1/02GK103444700SQ201310398002
【公開日】2013年12月18日 申請(qǐng)日期:2013年9月4日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月4日
【發(fā)明者】趙金紅, 彭海梅, 黃勇富, 邵錦濤, 蔣帥, 徐遠(yuǎn)東, 周鵬, 劉良佳, 蔣安, 孫曉燕, 何瑋, 蔣婧 申請(qǐng)人:重慶市畜牧科學(xué)院