一種平貝母的促生栽培方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種平貝母的促生栽培方法，主要包括外植體的選擇與消毒、材料處理、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、小鱗莖的增殖、生根培養(yǎng)和煉苗移栽土壤管理等步驟。在不同的培養(yǎng)階段的利用不同的激素進行調節(jié)，對培養(yǎng)基配方的精確篩選達到試管苗生長旺盛的優(yōu)良效果，并且結合有效的滅菌技術，達到提高增殖率和減少變異、提高土壤肥力、降低病蟲害的目的。并且在繼代培養(yǎng)后的小鱗莖的增殖過程中適當更換了培養(yǎng)基，更有利于小鱗莖的快速生長。并且通過鱗片不同部位的比較發(fā)現(xiàn)，鱗片繁殖材料最佳選擇為內層鱗片的下部。
【專利說明】一種平貝母的促生栽培方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及ー種組織培養(yǎng)方法，具體涉及到一種平貝母的繁殖方法。
【背景技術】
[0002]平貝母，別名平貝、北貝、貝母，為百合科多年生草本，高達lm。平貝母的干燥鱗莖是我國常用的中藥材，具有清熱潤肺、化痰止咳、散結等功能，在臨床上用于痰熱咳嗽、咳痰帶血、瘰疬瘡瘍腫毒等疾病的治療。近年來，由于過度采挖，資源逐年減少，商品供不應求，價格不斷上漲。
[0003]目前對貝母的組織培養(yǎng)研究已經(jīng)有了一定的規(guī)模，但是鑒于技術的問題一直存在著一些問題，對平貝母的快速繁殖技術也已經(jīng)有一定的研究，但是對平貝母的需求日益增カロ，目前平貝母的繁殖和種植遠遠達不到人們的需求，組織培養(yǎng)可以大大提高平貝母的繁殖率，但是目前組織培養(yǎng)體系尚未充分建立，存在一些技術上的問題，優(yōu)良品種的推廣普及尚未完成，供求矛盾日益加劇，嚴重影響了平貝母的大量繁殖。

【發(fā)明內容】

[0004]本發(fā)明針對目前存在的問題，提供一種能夠快速、有效的利用現(xiàn)有資源繁殖平貝母的方法。
[0005]為了解決上述技術問題，本發(fā)明采用的一個技術方案是:
一種平貝母的促生栽培方法，其特征在于，包括以下步驟:
(1)外植體的選擇與消毒:首先選擇當年生長健壯、無霉爛斑點的新鮮平貝母，剪去根及有傷鱗片，流水沖洗30 m in后放入清水中浸泡15min，再用50 %多菌靈500倍液浸泡2(T30 min或者用50%福美雙粉500倍液浸泡l(Tl5min，然后將種球鱗片剝下，用紫外燈照射10 min,轉入超凈工作臺，再用75%酒精消毒50 S，無菌水沖洗2-3次，再用6%次氯酸鈉溶液消毒10 min，無菌水沖洗2-3次。最后用0.2%的升汞溶液消毒10 min，無菌水沖洗4-5次；
(2)材料處理:首先在超凈工作臺上，在無菌條件下，切去鱗片上部1/3，然后將中、下部分割開來，將鱗片和鱗莖基部分別切成6-8mm的小塊；
(3)初代培養(yǎng):在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在在3/4MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0.8mg/L的6_BA、1.2mg/L的NAA，30_40mg/L的蔗糖和0.4-0.8mg/L的ZT ;培養(yǎng)溫度為24°C，光照時間12 h/d，光照強度2 000 LxjPH為6.5，瓊脂5 g/L,經(jīng)過25-30天形成愈傷組織；
(4)繼代培養(yǎng):將初代培養(yǎng)的愈傷組織切下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0.5mg/L的6-BA、0.3mg/L的IBA、0.3mg/L的KT和20mg/L的蔗糖，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001ux，PH 6.5，經(jīng)過7_12天時間分化出綠點后，即開始下ー階段；
(5)小鱗莖的増殖:將分化出綠點的愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，該培養(yǎng)基是在1/2MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 40mg/L的蔗糖、0.3mg/L的KT、0.4mg/LNAA和0.2mg/L的ZT，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001ux，PH 6.5，經(jīng)10-15天培養(yǎng)便可分化出叢生小鱗莖；
(6)生根培養(yǎng):將分化出來的小鱗莖接種于下列誘導培養(yǎng)基中進行生根誘導:1/2MS培養(yǎng)基、0.3mg/L的KT、lmg/L的活性炭、7_8g/L的瓊脂、0.5mg/L的NAA，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001UX，經(jīng)過8-12天待小鱗莖長至2.5cm高，根系比較發(fā)達吋，即開始下一個階段；
(7)煉苗移栽:先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗6d，然后將長出新根的小鱗莖從培養(yǎng)瓶中取出，在陽光下曬1-2天，在曬的過程中要適當遮光，使光照強度為自然光的60%，溫度在18°C左右；
(8)土壤管理:調節(jié)土壤pH值為7.0-8.2，將硫磺粉過篩后與5倍體積細土混勻后施用，除了用硫磺粉調節(jié)土壌PH值外，硫磺粉與草炭混合施用效果則更佳，或者使用松針配合硫磺粉對土壤進行改良，其中松針、原土、糞肥、硫磺粉按照重量份數(shù)比2:3:1:2，或者土壌中施入鋸未、草炭、苔蘚和硫磺粉進行土壌改良，其中鋸未、草炭、苔蘚和硫磺粉的重量份數(shù)比為1:1:1:2;
增加土壤有機質含量:挖寬50 cm、深40 cm的定植溝,有機質、有機肥、原土按1:1:1的比例進行改土，有機質用酸性草炭，如果用鋸末、樹皮必須先堆放I月以上，完全腐熟分解后再使用，如用人畜糞尿腐熟或植物秸桿葉子腐爛腐熟后形成的天然肥料，注意不要摻入草木灰、石灰堿性物質，含量達到3%-5%以上，以增加土壤的通透性；
土壤覆蓋:土壤覆蓋在苗木定植后即可進行，將覆蓋物均勻覆蓋在床面，寬I米、厚5-10厘米，以后每年再覆蓋2厘米厚，以保持原有厚度，如果應用未腐爛分解的新鋸末，需增施50%的氮肥，腐爛分解好的鋸末，氮肥用量應相應地減少，覆蓋黑地膜可以防止土壌水分蒸發(fā)，控制雜草，提高地溫，最好是在有滴灌設施的果園應用，覆蓋黑地膜與覆蓋有機物相結合效果更佳或者定植前用除草劑殺滅雜草，定植后全墾園地播撒綠肥白三葉、紅三葉等豆科植物，3月后可完全覆蓋園地，又能増加土壌肥力；
當培養(yǎng)基表面成龜裂狀后，取出小苗洗浄根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒上述土壌基質中，溫度控制在15°C左右。
[0006]本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在:
(1)建立了完善的平貝母的離體組織培養(yǎng)快速繁殖的成套技術，達到了高效誘導外植體分化増殖目的，并且保存了母體的全部優(yōu)良性狀，遺傳性狀穩(wěn)定；
(2)縮短了繁殖周期，在保證了成活率的基礎上，提高了繁殖效率，増加了經(jīng)濟效益；
(3)在不同的培養(yǎng)階段的利用不同的激素進行調節(jié)，對培養(yǎng)基配方的精確篩選達到試管苗生長旺盛的優(yōu)良效果，并且結合有效的滅菌技木，達到提高増殖率和減少變異的目的。
[0007](4)在繼代培養(yǎng)后的小鱗莖的增殖過程中適當更換了培養(yǎng)基，更有利于小鱗莖的快速生長。
[0008](5)在移栽煉苗的過程中，采取必要的措施控制了生長的溫度和光照強度、土壤條件，使平貝母在適宜的溫度下進行繁殖，提高了幼苗的質量和成活率、土壌肥力。
【具體實施方式】
[0009]下面對本發(fā)明的較佳實施例進行詳細闡述，以使本發(fā)明的優(yōu)點和特征能更易于被本領域技術人員理解，從而對本發(fā)明的保護范圍做出更為清楚明確的界定。
[0010]實施例1
一種平貝母的促生栽培方法，其特征在于，包括以下步驟:
(I)外植體的選擇與消毒:首先選擇當年生長健壯、無霉爛斑點的新鮮平貝母，剪去根及有傷鱗片，流水沖洗30 min后放入清水中浸泡15min，再用50 %多菌靈500倍液浸泡20min或者用50%福美雙粉500倍液浸泡lOmin，然后將種球鱗片剝下，用紫外燈照射10min,轉入超凈工作臺，再用75%酒精消毒50 S，無菌水沖洗2次，再用6%次氯酸鈉溶液消毒10 min,無菌水沖洗3次。最后用0.2%的升萊溶液消毒10 min,無菌水沖洗4次。
[0011](2)材料處理:首先在超凈工作臺上，在無菌條件下，選擇外層鱗片的中部，切成6-8mm的小塊；
(3)初代培養(yǎng):在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在在3/4MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0.8mg/L的6_BA、1.2mg/L的NAA，30mg/L的蔗糖和
0.4mg/L的ZT ；PH為6.0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照時間12 h/d,光照強度2 OOO Lx,瓊脂5g/L,經(jīng)過30天形成愈傷組織；
(4)繼代培養(yǎng):將初代培養(yǎng)的愈傷組織切下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0.5mg/L的6-BA、0.3mg/L的IBA、0.3mg/L的KT和20mg/L的蔗糖，PH
6.0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001ux，經(jīng)過12天時間分化出綠點后，即開始下ー階段；
(5)小鱗莖的増殖:將分化出綠點`的愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，該培養(yǎng)基是在1/2MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 40mg/L 的蔗糖、0.3mg/L 的 KT、0.4mg/LNAA 和 0.2mg/L 的 ZT，PH 6.0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001UX，經(jīng)15天培養(yǎng)便可分化出叢生小鱗莖；
(6)生根培養(yǎng):將分化出來的小鱗莖接種于下列誘導培養(yǎng)基中進行生根誘導:1/2MS培養(yǎng)基、0.3mg/L的KT、lmg/L的活性炭、7g/L的瓊脂、0.5mg/L的NAA，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001UX，經(jīng)過12天待小鱗莖長至2.5cm高，根系比較發(fā)達吋，即開始下ー個階段；
(7)煉苗移栽:先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗6d，然后將長出新根的小鱗莖從培養(yǎng)瓶中取出，在陽光下曬2天，在曬的過程中要適當遮光，使光照強度為自然光的50%，溫度在15°C左右，當培養(yǎng)基表面成龜裂狀后，取出小苗洗浄根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒的腐殖土:草炭:珍珠巖:蛭石=2: 2:1:3 (重量比)的混合基質中，溫度控制在25°C左右。
[0012]實施例2
將步驟(2)材料處理過程中的材料選擇外層鱗片的下部，其余條件與實施例1相同，結果在初代培養(yǎng)中經(jīng)過27天形成愈傷組織，在繼代培養(yǎng)中經(jīng)過9天時間分化出綠點，在小鱗莖的增殖過程中經(jīng)過12天培養(yǎng)可分化出叢生小鱗莖，在生根培養(yǎng)過程中經(jīng)過11天小鱗莖長至2.5cm，根系比較發(fā)達。
[0013]實施例3
將步驟(2)材料處理過程中的材料選擇外層鱗片的下部，其余條件與實施例1相同，結果在初代培養(yǎng)中經(jīng)過27天形成愈傷組織，在繼代培養(yǎng)中經(jīng)過8天時間分化出綠點，在小鱗莖的增殖過程中經(jīng)過12天培養(yǎng)可分化出叢生小鱗莖，在生根培養(yǎng)過程中經(jīng)過10天小鱗莖長至2.5cm，根系比較發(fā)達。
[0014]實施例4
將步驟(2)材料處理過程中的材料選擇中層鱗片的中部，其余條件與實施例1相同，結果在初代培養(yǎng)中經(jīng)過28天形成愈傷組織，在繼代培養(yǎng)中經(jīng)過10天時間分化出綠點，在小鱗莖的增殖過程中經(jīng)過11天培養(yǎng)可分化出叢生小鱗莖，在生根培養(yǎng)過程中經(jīng)過10天小鱗莖長至2.5cm，根系比較發(fā)達。
[0015]實施例5
將步驟(2)材料處理過程中的材料選擇中層鱗片的下部，其余條件與實施例1相同，結果在初代培養(yǎng)中經(jīng)過26天形成愈傷組織，在繼代培養(yǎng)中經(jīng)過9天時間分化出綠點，在小鱗莖的增殖過程中經(jīng)過13天培養(yǎng)可分化出叢生小鱗莖，在生根培養(yǎng)過程中經(jīng)過10天小鱗莖長至2.5cm，根系比較發(fā)達。
[0016]實施例6
將步驟(2)材料處理過程中的材料選擇內層鱗片的中部，其余條件與實施例1相同，結果在初代培養(yǎng)中經(jīng)過27天形成愈傷組織，在繼代培養(yǎng)中經(jīng)過10天時間分化出綠點，在小鱗莖的增殖過程中經(jīng)過12天培養(yǎng)可分化出叢生小鱗莖，在生根培養(yǎng)過程中經(jīng)過9天小鱗莖長至2.5cm，根系比較發(fā)達。
[0017]實施例7
將步驟(2)材料處理過程中的材料選擇內層鱗片的下部，其余條件與實施例1相同，結果在初代培養(yǎng)中經(jīng)過25天形成愈傷組織，在繼代培養(yǎng)中經(jīng)過7天時間分化出綠點，在小鱗莖的增殖過程中經(jīng)過10天培養(yǎng)可分化出叢生小鱗莖，在生根培養(yǎng)過程中經(jīng)過8天小鱗莖長至2.5cm，根系比較發(fā)達。
[0018]實施例8
將步驟(2)材料處理過程中的材料選擇鱗片的基部，其余條件與實施例1相同，結果在初代培養(yǎng)中經(jīng)過26天形成愈傷組織，在繼代培養(yǎng)中經(jīng)過8天時間分化出綠點，在小鱗莖的增殖過程中經(jīng)過12天培養(yǎng)可分化出叢生小鱗莖，在生根培養(yǎng)過程中經(jīng)過10天小鱗莖長至2.5cm,根系比較發(fā)達。
[0019]通過實施例1至實施例8的對比發(fā)現(xiàn)，內層鱗片的下部是平貝母進行組織培養(yǎng)的最佳材料。
[0020]實施例9
一種平貝母的促生栽培方法，其特征在于，包括以下步驟:
(I)外植體的選擇與消毒:首先選擇當年生長健壯、無霉爛斑點的新鮮平貝母，剪去根及有傷鱗片，流水沖洗30 min后放入清水中浸泡15min，再用50%多菌靈500倍液浸泡30min或者用50%福美雙粉500倍液浸泡15min，然后將種球鱗片剝下，用紫外燈照射10 min,轉入超凈工作臺，再用75%酒精消毒50 S，無菌水沖洗3次，再用6%次氯酸鈉溶液消毒10min,無菌水沖洗3次。最后用0.2%的升萊溶液消毒10 min,無菌水沖洗5次。
[0021](2)材料處理:首先在超凈工作臺上，在無菌條件下，選擇內層鱗片的下部切成6-8mm的小塊；
(3)初代培養(yǎng):在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在在3/4MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0.8mg/L的6_BA、1.2mg/L的NAA，40mg/L的蔗糖和0.8mg/L的ZT ;培養(yǎng)溫度為24°C，光照時間12 h/d，光照強度2 000 Lx, PH為6.5，瓊脂5g/L,經(jīng)過25天形成愈傷組織；
(4)繼代培養(yǎng):將初代培養(yǎng)的愈傷組織切下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0.5mg/L的6-BA、0.3mg/L的IBA、0.3mg/L的KT和20mg/L的蔗糖，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001ux，PH 6.5，經(jīng)過12天時間分化出綠點后，即開始下ー階段；
(5)小鱗莖的増殖:將分化出綠點的愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，該培養(yǎng)基是在1/2MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 40mg/L的蔗糖、0.3mg/L的KT、0.4mg/LNAA和0.2mg/L的ZT，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001ux，PH 6.5，經(jīng)10天培養(yǎng)便可分化出叢生小鱗莖；
(6)生根培養(yǎng):將分化出來的小鱗莖接種于下列誘導培養(yǎng)基中進行生根誘導:1/2MS培養(yǎng)基、0.3mg/L的KT、lmg/L的活性炭、8g/L的瓊脂、0.5mg/L的NAA，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001UX，經(jīng)過10天待小鱗莖長至2.5cm高，根系比較發(fā)達吋，即開始下ー個階段；
(7)煉苗移栽:先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗6d，然后將長出新根的小鱗莖從培養(yǎng)瓶中取出，在陽光下曬2天，在曬的過程中要適當遮光，使光照強度為自然光的60%，溫度在18°C左右，當培養(yǎng)基表面成龜裂狀后，取出小苗洗浄根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒的腐殖土:草炭:珍珠巖:蛭石=2: 2: I:3 (重量比)的混合基質中，溫度控制在15°C左右。
[0022]實施例10:
ー種利用組織培養(yǎng)技術繁殖平貝母的方法，其特征在于，包括以下步驟:
(1)外植體的選擇與消毒 :首先選擇當年生長健壯、無霉爛斑點的新鮮平貝母，剪去根及有傷鱗片，流水沖洗30 min后放入清水中浸泡15min，再用50 %多菌靈500倍液浸泡2(T30 min或者用50%福美雙粉500倍液浸泡l(Tl5min，然后將種球鱗片剝下，用紫外燈照射10 min,轉入超凈工作臺，再用75%酒精消毒50 S，無菌水沖洗2-3次，再用6%次氯酸鈉溶液消毒10 min，無菌水沖洗2-3次。最后用0.2%的升汞溶液消毒10 min，無菌水沖洗4-5次；
(2)材料處理:首先在超凈工作臺上，在無菌條件下，切去鱗片上部1/3，然后將中、下部分割開來，將鱗片和鱗莖基部分別切成6-8mm的小塊；
(3)初代培養(yǎng):在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在在3/4MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0.8mg/L的6_BA、1.2mg/L的NAA，30-40mg/L的蔗糖和0.4-0.8mg/L的ZT ;培養(yǎng)溫度為24°C，光照時間12 h/d，光照強度2 000 LxjPH為6.5，瓊脂5 g/L,經(jīng)過25-30天形成愈傷組織；
(4)繼代培養(yǎng):將初代培養(yǎng)的愈傷組織切下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0.5mg/L的6-BA、0.3mg/L的IBA、0.3mg/L的KT和20mg/L的蔗糖，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001ux，PH 6.5，經(jīng)過7_12天時間分化出綠點后，即開始下ー階段；
(5)小鱗莖的増殖:將分化出綠點的愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，該培養(yǎng)基是在1/2MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 40mg/L的蔗糖、0.3mg/L的KT、0.4mg/LNAA和0.2mg/L的ZT，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001ux，PH 6.5，經(jīng)10-15天培養(yǎng)便可分化出叢生小鱗莖；(6)生根培養(yǎng):將分化出來的小鱗莖接種于下列誘導培養(yǎng)基中進行生根誘導:1/2MS培養(yǎng)基、0.3mg/L的KT、lmg/L的活性炭、7_8g/L的瓊脂、0.5mg/L的NAA，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001UX，經(jīng)過8-12天待小鱗莖長至2.5cm高，根系比較發(fā)達吋，即開始下一個階段；
(7)煉苗移栽:先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗6d，然后將長出新根的小鱗莖從培養(yǎng)瓶中取出，在陽光下曬1-2天，在曬的過程中要適當遮光，使光照強度為自然光的60%，溫度在18°C左右；
(8)土壤管理:調節(jié)土壤pH值為7.0-8.2，將硫磺粉過篩后與5倍體積細土混勻后施用，除了用硫磺粉調節(jié)土壌PH值外，硫磺粉與草炭混合施用效果則更佳，或者使用松針配合硫磺粉對土壤進行改良，其中松針、原土、糞肥、硫磺粉按照重量份數(shù)比2:3:1:2，或者土壌中施入鋸未、草炭、苔蘚和硫磺粉進行土壌改良，其中鋸未、草炭、苔蘚和硫磺粉的重量份數(shù)比為1:1:1:2;
增加土壤有機質含量:挖寬50 cm、深40 cm的定植溝,有機質、有機肥、原土按1:1:1的比例進行改土，有機質用酸性草炭，如果用鋸末、樹皮必須先堆放I月以上，完全腐熟分解后再使用，如用人畜糞尿腐熟或植物秸桿葉子腐爛腐熟后形成的天然肥料，注意不要摻入草木灰、石灰堿性物質，含量達到3%-5%以上，以增加土壤的通透性；
土壤覆蓋:土壤覆蓋在苗木定植后即可進行，將覆蓋物均勻覆蓋在床面，寬I米、厚5-10厘米，以后每年再覆蓋2厘米厚，以保持原有厚度，如果應用未腐爛分解的新鋸末，需增施50%的氮肥，腐爛分解好的鋸末，氮肥用量應相應地減少，覆蓋黑地膜可以防止土壌水分蒸發(fā)，控制雜草，提高地溫，最好是在有滴灌設施的果園應用，覆蓋黑地膜與覆蓋有機物相結合效果更佳或者定植前用除草劑殺滅雜草，定植后全墾園地播撒綠肥白三葉、紅三葉等豆科植物，3月后可完全覆蓋園地，又能増加土壌肥力；
當培養(yǎng)基表面成龜裂狀后，取出小苗洗浄根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒上述土壌基質中，溫度控制在15°C左右。
[0023]測得萌發(fā)率為96%，苗木成活率為100%，土壤肥カ提高13%，病蟲害減少21%。
[0024]以上所述僅為本發(fā)明的實施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說明書內容所作的等效結構或等效流程變換，或直接或間接運用在其他相關的【技術領域】，均同理包括在本發(fā)明的專利保護范圍內。
【權利要求】
1.一種平貝母的促生栽培方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)外植體的選擇與消毒:首先選擇當年生長健壯、無霉爛斑點的新鮮平貝母，剪去根及有傷鱗片，流水沖洗30 min后放入清水中浸泡15min，再用50 %多菌靈500倍液浸泡2(T30 min或者用50%福美雙粉500倍液浸泡l(Tl5min，然后將種球鱗片剝下，用紫外燈照射10 min,轉入超凈工作臺，再用75%酒精消毒50 S，無菌水沖洗2-3次，再用6%次氯酸鈉溶液消毒10 min，無菌水沖洗2-3次,最后用0.2%的升汞溶液消毒10 min，無菌水沖洗4-5次； (2)材料處理:首先在超凈工作臺上，在無菌條件下，切去鱗片上部1/3，然后將中、下部分割開來，將鱗片和鱗莖基部分別切成6-8mm的小塊； (3)初代培養(yǎng):在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在在3/4MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0.8mg/L的6_BA、1.2mg/L的NAA，30_40mg/L的蔗糖和0.4-0.8mg/L的ZT ;培養(yǎng)溫度為24°C，光照時間12 h/d，光照強度2 000 LxjPH為6.5，瓊脂5 g/L，經(jīng)過25-30天形成愈傷組織； (4)繼代培養(yǎng):將初代培養(yǎng)的愈傷組織切下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0.5 mg/L的6-BA、0.3mg/L的IBA、0.3mg/L的KT和20mg/L的蔗糖，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001ux，PH 6.5，經(jīng)過7_12天時間分化出綠點后，即開始下ー階段； (5)小鱗莖的増殖:將分化出綠點的愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，該培養(yǎng)基是在1/2MS常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 40mg/L的蔗糖、0.3mg/L的KT、0.4mg/LNAA和0.2mg/L的ZT，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001ux，PH 6.5，經(jīng)10-15天培養(yǎng)便可分化出叢生小鱗莖；(6)生根培養(yǎng):將分化出來的小鱗莖接種于下列誘導培養(yǎng)基中進行生根誘導:1/2 MS培養(yǎng)基、.0.3mg/L的KT、lmg/L的活性炭、7_8g/L的瓊脂、0.5mg/L的NAA，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強度為22001UX，經(jīng)過8-12天待小鱗莖長至2.5cm高，根系比較發(fā)達吋，即開始下一個階段； (7)煉苗移栽:先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗6d，然后將長出新根的小鱗莖從培養(yǎng)瓶中取出，在陽光下曬1-2天，在曬的過程中要適當遮光，使光照強度為自然光的60%，溫度在18°C左右； (8)土壤管理:調節(jié)土壤pH值為7.0-8.2，將硫磺粉過篩后與5倍體積細土混勻后施用，除了用硫磺粉調節(jié)土壌PH值外，硫磺粉與草炭混合施用效果則更佳，或者使用松針配合硫磺粉對土壤進行改良，其中松針、原土、糞肥、硫磺粉按照重量份數(shù)比2:3:1:2，或者土壌中施入鋸未、草炭、苔蘚和硫磺粉進行土壌改良，其中鋸未、草炭、苔蘚和硫磺粉的重量份數(shù)比為1:1:1:2; 增加土壤有機質含量:挖寬50 cm、深40 cm的定植溝,有機質、有機肥、原土按1:1:1的比例進行改土，有機質用酸性草炭，如果用鋸末、樹皮必須先堆放I月以上，完全腐熟分解后再使用，如用人畜糞尿腐熟或植物秸桿葉子腐爛腐熟后形成的天然肥料，注意不要摻入草木灰、石灰堿性物質，含量達到3%-5%以上，以增加土壤的通透性； 土壤覆蓋:土壤覆蓋在苗木定植后即可進行，將覆蓋物均勻覆蓋在床面，寬I米、厚5-10厘米，以后每年再覆蓋2厘米厚，以保持原有厚度，如果應用未腐爛分解的新鋸末，需增施50%的氮肥，腐爛分解好的鋸末，氮肥用量應相應地減少，覆蓋黑地膜可以防止土壌水分蒸發(fā)，控制雜草，提高地溫，最好是在有滴灌設施的果園應用，覆蓋黑地膜與覆蓋有機物相結合效果更佳或者定植前用除草劑殺滅雜草，定植后全墾園地播撒綠肥白三葉、紅三葉等豆科植物，3月后可完全覆蓋園地，又能増加土壌肥力； 當培養(yǎng)基表面成龜裂狀后，取出小苗洗浄根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒上述土壌基質中，溫度控制在15°C左右。
2.根據(jù)權利要求1所述的ー種平貝母的促生栽培方法，其特征在于，所述的鱗片繁殖材料最佳選擇為內層鱗 片的下部。
【文檔編號】A01G1/00GK103444528SQ201310357743
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2013年8月16日 優(yōu)先權日:2013年8月16日
【發(fā)明者】吳志剛 申請人:蘇州仁成生物科技有限公司