專利名稱：一種測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用扇貝比色扇的制作方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種測(cè)定海洋貝類總類胡蘿卜素含量用比色工具的制作方法及其應(yīng)用，具體說是一種測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用扇貝比色扇的制作方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
類胡蘿卜素(carotenoids)也稱脂色素，屬于類萜化合物，通常是40碳的碳?xì)浠衔?胡蘿卜素)和它們的氧化衍生物(葉黃素)兩大類色素的總稱，由高等植物、藻類和微生物合成，以黃色、橙紅色或紅色等色素形式存在于自然界，迄今為止已被發(fā)現(xiàn)達(dá)750種。由于類胡蘿卜素分布廣泛，并且具有多樣功能和特殊性質(zhì)，自1831年人們首次從胡蘿卜中分離出黃色的β_胡蘿卜素起，類胡蘿卜素研究就一直是人們最感興趣的領(lǐng)域之一。類胡蘿卜素色澤鮮亮、色價(jià)極高，已被廣泛地應(yīng)用于著色劑、飼料添加劑中；類胡蘿卜素具有生物活性，特別是抗氧化能力強(qiáng)，除了作為功能食品外，它還具有保健和藥用價(jià)值，如清除自由基抗氧化延緩衰老、猝滅單線態(tài)氧防癌抗癌、增加免疫系統(tǒng)中B細(xì)胞的活力增強(qiáng)機(jī)體免疫、作為維生素A的前體治療光敏性疾病和防止白內(nèi)障發(fā)生等等。因此，類胡蘿卜素的應(yīng)用領(lǐng)域也從最初的著色功能逐步轉(zhuǎn)向營(yíng)養(yǎng)食品、保健品及藥品三大領(lǐng)域。軟體動(dòng)物本身不能夠合成類胡蘿卜素，但它們通過攝食富含類胡蘿卜素的藻類而在體內(nèi)不同組織中積累大量的類胡蘿卜素，并作為重要的食物源被魚類、海鳥、海洋哺乳動(dòng)物和人類攝食進(jìn)入脊椎動(dòng)物體內(nèi)(Kantha，1989)。因此，在食物鏈中，軟體動(dòng)物是類胡蘿卜素進(jìn)入人等高等脊椎動(dòng)物體內(nèi)非常重要的一環(huán)。華貴柿孔扇貝(Chlamys nobilis Reeve)為暖水性海產(chǎn)雙殼類(齊鐘彥，1998 ;蔡英亞等，2006)，以營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美、肉質(zhì)細(xì)嫩而著稱，其閉殼肌干制品俗稱“干貝”，是著名的海產(chǎn)八珍之一。自上世紀(jì)七十年代末以來，在我國(guó)南方開始人工養(yǎng)殖華貴櫛孔扇貝，八十年代中后期就發(fā)展成為南方沿海重要的海水養(yǎng)殖種類之一。華貴櫛孔扇貝不僅在貝殼上具有金黃、橙褐、紫褐、淺褐等多種外部顏色，而且在外套膜、閉殼肌等內(nèi)部組織的顏色上也有不同，如褐色個(gè)體的外套膜、閉殼肌全部是白色；而金黃色個(gè)體的外套膜通常為金黃色、2(Γ30%個(gè)體的閉殼肌也為金黃色，這種金黃色的閉殼肌、外套膜等組織富含類胡蘿卜素，并且受到遺傳控制。通過人工選育，不但已培育出了外部色澤美觀且富含天然類胡蘿卜素的金色新品系，而且已在福建、廣東等海域進(jìn)行規(guī)?；B(yǎng)殖。由于這種金色品系的外觀色澤符合我國(guó)廣大消費(fèi)者的習(xí)慣，其高含量的類胡蘿卜素又具有較高的經(jīng)濟(jì)、醫(yī)療和 保健等價(jià)值，因此，產(chǎn)品的價(jià)值遠(yuǎn)高于普通品種。這樣不僅解決了目前華貴櫛孔扇貝養(yǎng)殖業(yè)遭遇的產(chǎn)品價(jià)格賤、產(chǎn)值低等問題，而且也可以進(jìn)一步豐富我國(guó)海水養(yǎng)殖業(yè)的多品種需求。由于這種新品系的主要特征和經(jīng)濟(jì)性狀之一就是其體內(nèi)富含類胡蘿卜素，因此，在生產(chǎn)、市場(chǎng)銷售等過程中，快速簡(jiǎn)便地測(cè)定它們體內(nèi)總類胡蘿卜素含量將成為一個(gè)重要的環(huán)節(jié)。常規(guī)的測(cè)定貝類總類胡蘿卜素含量一直采用如下方法:1)采用活體解剖取其內(nèi)部組織樣品；2)真空冷凍干燥并研磨粉碎:3)按Zheng等(2010)Zheng HP, Liu HL, ZhangT, Wang SQ, Sun Zff, Liu WH, Li YY.Total carotenoid differences in scallop tissuesof Chlamys nobilis(Bivalve:Pectinidae)with regard to gender and shell color.Food Chemistry, 122, 1164-1167.方法用丙酮在暗處過夜，提取樣品中的總類胡蘿卜素；
4)5000rpm離心5min取上清，用分光光度計(jì)進(jìn)行光譜掃描；5)最后參照Z(yǔ)heng等(2010)方法計(jì)算樣品中的總類胡蘿卜素含量。這種方法有許多缺點(diǎn):1)流程復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)，從取樣、干燥、研磨、萃取、離心、分析到測(cè)定完成一般需用I周時(shí)間；2)儀器設(shè)備多且昂貴，包括昂貴的真空冷凍干燥機(jī)、紫外分光光度計(jì)、高速離心機(jī)以及研磨機(jī)、移液器等設(shè)備；3)需用有機(jī)溶劑進(jìn)行化學(xué)提取總類胡蘿卜素，不但成本高，而且容易污染環(huán)境；4)實(shí)用性差:不能夠進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定，必須在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行；方法繁瑣、需要專業(yè)人員才能夠進(jìn)行操作，無(wú)法應(yīng)用于實(shí)踐中。由于華貴櫛孔扇貝是我國(guó)南方海區(qū)重要的養(yǎng)殖貝類，規(guī)模大、產(chǎn)量高。這種富含類胡蘿卜素的新品種在養(yǎng)殖推廣中需要經(jīng)?，F(xiàn)場(chǎng)活體測(cè)定產(chǎn)品的類胡蘿卜素含量。因此，必須有一種快速簡(jiǎn)便而又實(shí)用的方法來測(cè)定總類胡蘿卜素含量。然而，迄今為止，尚未見到任何有關(guān)快速簡(jiǎn)便的測(cè)定貝類總類胡蘿卜素含量的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用扇貝比色扇的制作方法及其應(yīng)用。本發(fā)明的測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用扇貝比色扇包括扇體和扇柄，所述扇體包括顏色區(qū)域和數(shù)值區(qū)域，所述顏色區(qū)域包括10個(gè)從左到右相互隔開的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度；所述數(shù)值區(qū)域包括10個(gè)數(shù)值，分別對(duì)應(yīng)顏色區(qū)域的10個(gè)顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度；所述扇體和扇柄相連。所述顏色區(qū)域的10個(gè)顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度均為單一金黃色，顏色從左到右由淺到深。所述數(shù)值區(qū)域的10個(gè)數(shù)值表示總類胡蘿卜素含量，單位為μ g/g。優(yōu)選地，所述數(shù)值區(qū)域的10個(gè)數(shù)值從左到右分別為10、30、50、70、100、130、160、190、220 和 250，單位為 μ g/g。所述數(shù)值區(qū)域的10個(gè)數(shù)值與其對(duì)應(yīng)的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度相鄰，分別位于與其對(duì)應(yīng)的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度的上方或下方。所述扇貝比色扇的扇柄包括一個(gè)系繩孔。所述扇貝比色扇的高X寬為7cmX7cm-10cmX IOcm,其中所述扇貝比色扇的高和
寬相等。優(yōu)選地，所述扇貝比色扇的高X寬為9cmX9cm。優(yōu)選地，所述扇貝比色扇的形狀為扇貝狀。本發(fā)明的目的是提供一種測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用扇貝比色扇的制作方法，所述方法包括如下步驟:1)挑選貝殼全部為金黃色、閉殼肌顏色由淺黃到深黃不等的華貴櫛孔扇貝活體個(gè)體；2)在同一條件下對(duì)扇貝閉殼肌進(jìn)行拍照，并用Photoshop獲取每個(gè)個(gè)體的三原色值R、G、B值；3)采用常規(guī)方法測(cè)定每個(gè)個(gè)體閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量TCC (TotalCarotenoids Content)；4)采用Matlab軟件將上述R、G、B值與TCC值分別進(jìn)行線性擬合，并將TCC標(biāo)準(zhǔn)值以10為單位梯度遞增獲取標(biāo)準(zhǔn)的R、G、B值；5)將上述數(shù)值輸入Photoshop中，獲取與TCC標(biāo)準(zhǔn)值相對(duì)應(yīng)的顏色塊；6)根據(jù)10個(gè)顏色塊由淺到深制作成一個(gè)扇貝比色扇，所述扇貝比色扇由淺到深有10個(gè)顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度，分別對(duì)應(yīng)10個(gè)表示總類胡蘿卜素含量TCC的數(shù)值，單位為μ g/g。優(yōu)選地，所述10個(gè)表示總類胡蘿卜素含量TCC的數(shù)值分別為10、30、50、70、100、130、160、190、220、250，單位為 μ g/g。優(yōu)選地，所述扇貝比色扇的形狀為扇貝狀。優(yōu)選地，制作扇貝比色扇的材料為塑料或相片紙等。本發(fā)明的另一目的是提供所述制作方法制作的扇貝比色扇在測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量中的應(yīng)用。所述應(yīng)用為一種測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量的方法，所述方法為利用所述扇貝比色扇與華貴櫛孔扇貝閉殼肌顏色進(jìn)行比較，根據(jù)所述扇貝比色扇的10個(gè)顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度對(duì)應(yīng)的總類胡蘿卜素含量就能夠獲得所測(cè)扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。所述方法快速、簡(jiǎn)便、實(shí)用性強(qiáng)。具體的，測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量的方法包括如下步驟:I)取華貴櫛孔扇貝活體，將其兩枚貝殼張開；2)用扇貝比色扇與扇貝閉殼肌顏色比較；3)獲得該扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。其中，所述方法測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌中總類胡蘿卜素含量范圍為10_250μ g/g ;所需時(shí)間為3-5秒。本發(fā)明的測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用扇貝比色扇的制作方法及其應(yīng)用具有如下優(yōu)點(diǎn):1、簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)。本發(fā)明制作測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用扇貝比色扇的方法簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)。2、快速、效率高。本發(fā)明測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量的方法只需要3-5秒鐘即可測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍，快速、效率高。3、簡(jiǎn)便、成本低、易推廣。本發(fā)明測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量的方法不需要任何儀器設(shè)備和藥品，只需要用扇貝比色扇與閉殼肌顏色對(duì)比即可，簡(jiǎn)便、成本低、易推廣。

4、實(shí)用性強(qiáng)。本發(fā)明測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量的方法能夠在生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)快速測(cè)定每個(gè)活體扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍，一般人員只需簡(jiǎn)單的講解后，都能夠應(yīng)用扇貝比色扇，實(shí)用性強(qiáng)。5、環(huán)保性強(qiáng)。本發(fā)明測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量的方法不需要化學(xué)藥品，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，環(huán)保性強(qiáng)。


圖1為本發(fā)明的扇貝比色扇的結(jié)構(gòu)圖；圖中:1為扇體；2為扇柄；3為顏色區(qū)域；4為數(shù)值區(qū)域；5為系繩孔。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明制作的扇貝比色扇作進(jìn)一步詳細(xì)說明。以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。在本發(fā)明的描述中，需要說明的是，術(shù)語(yǔ)“中心”、“”、“橫向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“豎直”、“水平”、“頂”、“底” “內(nèi)”、“外”等指示的方位或位置關(guān)系為基于附
圖所示的方位或位置關(guān)系，僅是為了便于描述本發(fā)明和簡(jiǎn)化描述，而不是指示或暗示所指的裝置或元件必須具有特定的方位、以特定的方位構(gòu)造和操作，因此不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制。此外，術(shù)語(yǔ)“第一”、“第二”、“第三”僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相
對(duì)重要性。在本發(fā)明的描述中，需要說明的是，除非另有明確的規(guī)定和限定，術(shù)語(yǔ)“安裝”、“相連”、“連接”應(yīng)做廣義理解，例如，可以是固定連接，也可以是可拆卸連接，或一體地連接；可以是機(jī)械連接，也可以是電連接；可以是直接相連，也可以通過中間媒介間接相連，可以是兩個(gè)元件內(nèi)部的連通。對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，可以具體情況理解上述術(shù)語(yǔ)在本發(fā)明中的具體含義。

此外，在本發(fā)明的描述中，除非另有說明，“多個(gè)”的含義是兩個(gè)或兩個(gè)以上。實(shí)施例1如圖1所示，本發(fā)明制作的扇貝比色扇包括扇體I和扇柄2，所述扇體I包括顏色區(qū)域3和數(shù)值區(qū)域4，所述顏色區(qū)域3包括10個(gè)從左到右相互隔開的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度；所述數(shù)值區(qū)域4包括10個(gè)數(shù)值，所述數(shù)值從左到右分別為10、30、50、70、100、130、160、190、220和250，單位為μ g/g,分別對(duì)應(yīng)顏色區(qū)域3的10個(gè)顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度；所述扇體I和扇柄2相連。所述顏色區(qū)域3的10個(gè)顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度均為單一金黃色，顏色從左到右由淺到深。所述數(shù)值區(qū)域4的10個(gè)數(shù)值表示總類胡蘿卜素含量，單位為μ g/g。所述數(shù)值區(qū)域4的10個(gè)表示總類胡蘿卜素含量的數(shù)值與其對(duì)應(yīng)的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度相鄰，分別位于與其對(duì)應(yīng)的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度的下方。所述數(shù)值區(qū)域4的10個(gè)表示總類胡蘿卜素含量的數(shù)值與其對(duì)應(yīng)的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度相鄰，分別位于與其對(duì)應(yīng)的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度的上方。所述扇貝比色扇的扇柄2包括一個(gè)系繩孔5，繩穿過系繩孔5，可將所述扇貝比色扇懸掛，使所述扇貝比色扇使用和保管比較方便。所述扇貝比色扇的高X寬為9cmX9cm。優(yōu)選地，所述扇貝比色扇的形狀為扇貝狀。實(shí)施例2:
本發(fā)明的扇貝比色扇的制作方法如下:時(shí)間:2012年5月I)取20個(gè)華貴櫛孔扇貝活體個(gè)體，貝殼全部為金黃色、閉殼肌顏色由淺黃到深黃不等；2)在同一條件下對(duì)扇貝閉殼肌進(jìn)行拍照，并用Photoshop獲取每個(gè)個(gè)體的三原色值R、G、B值；3)采用常規(guī)方法(Zheng等，2010)測(cè)定每個(gè)個(gè)體閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量TCC(Total Carotenoids Content)；4)采用Matlab軟件將上述R、G、B值與TCC值分別進(jìn)行線性擬合，并將TCC標(biāo)準(zhǔn)值以10為單位梯度遞增獲取標(biāo)準(zhǔn)的R、G、B值；5)將上述數(shù)值輸入Photoshop中，獲取與TCC標(biāo)準(zhǔn)值相對(duì)應(yīng)的顏色塊；

6)將10個(gè)顏色塊由淺到深印制在塑料板或彩色打印在相紙上，制作成一個(gè)扇貝形狀的比色扇。所述扇貝比色扇包括扇體和扇柄，所述扇體包括顏色區(qū)域和數(shù)值區(qū)域，所述顏色區(qū)域包括10個(gè)從左到右相互隔開的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度，所述顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度均為單一金黃色，顏色從左到右由淺到深；所述數(shù)值區(qū)域包括10個(gè)表示總類胡蘿卜素含量的數(shù)值，所述數(shù)值從左到右分別為10、30、50、70、100、130、160、190、220和250，單位為μ g/g，分別對(duì)應(yīng)顏色區(qū)域的10個(gè)顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度；所述扇體和扇柄相連。所述數(shù)值區(qū)域的10個(gè)數(shù)值與其對(duì)應(yīng)的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度相鄰，分別位于與其對(duì)應(yīng)的顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度的上方或下方。所述扇貝比色扇的扇柄包括一個(gè)系繩孔。所述扇貝比色扇的高X寬為9cmX9cm。此外，根據(jù)所述方法制作的扇貝比色扇的高和寬相等，其高X寬可以為7cmX 7cm_10cmX 10cm。扇貝比色扇應(yīng)用的實(shí)施例利用所述扇貝比色扇與華貴櫛孔扇貝閉殼肌顏色進(jìn)行比較，根據(jù)扇貝比色扇的10個(gè)顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度對(duì)應(yīng)的總類胡蘿卜素含量就能夠快速地測(cè)定所測(cè)扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿
卜素含量的范圍。實(shí)施例1時(shí)間:2012年 7 月。I)華貴櫛孔扇貝I齡活體I個(gè)(編號(hào)為:#1)，將其兩枚貝殼張開；2)用扇貝比色扇與扇貝閉殼肌的顏色進(jìn)行比較；3)得出#1個(gè)體的總類胡蘿卜素含量為13(Γ 60μ g/g，用時(shí)4秒。對(duì)比例I采用常規(guī)方法測(cè)定閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量:對(duì)#1個(gè)體活體解剖取其閉殼肌，真空冷凍干燥并研磨粉碎，然后按Zheng等(2010)方法提取#1個(gè)體中的總類胡蘿卜素，用UV2501PC型分光光度計(jì)(日本，島津)進(jìn)行光譜掃描，最后參照Z(yǔ)heng等(2010)方法計(jì)算出#1個(gè)體閉殼肌中的總類胡蘿卜素含量為131.3yg/g，用時(shí)I周。實(shí)施例1和對(duì)比例I說明，采用本發(fā)明制作的扇貝比色扇能夠快速地測(cè)定出華貴櫛孔扇貝I齡貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。實(shí)施例2時(shí)間:2012年 7 月。I)華貴櫛孔扇貝I齡活體I個(gè)(編號(hào)為:#2)，將其兩枚貝殼張開；2)用扇貝比色扇與扇貝閉殼肌的顏色進(jìn)行比較；3)得出#2個(gè)體的總類胡蘿卜素含量為5(Γ70μ g/g，用時(shí)5秒。對(duì)比例2采用常規(guī)方法測(cè)定閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量:對(duì)#2個(gè)體活體解剖取其閉殼肌，真空冷凍干燥并研磨粉碎，然后按Zheng等(2010)方法提取#2個(gè)體中的總類胡蘿卜素，用UV2501PC型分光光度計(jì)(日本，島津)進(jìn)行光譜掃描，最后參照Z(yǔ)heng等(2010)方法計(jì)算出#2個(gè)體閉殼肌中的總類胡蘿卜素含量為69.8μ g/g，用時(shí)I周。實(shí)施例2和對(duì)比例2說明，采用本發(fā)明制作的扇貝比色扇能夠快速地測(cè)定出華貴櫛孔扇貝I齡貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。實(shí)施例3時(shí)間:2012年 7 月。I)華貴櫛孔扇貝1.5齡活體I個(gè)(編號(hào)為:#3)，將其兩枚貝殼張開；2)用扇貝比色扇與扇貝閉殼肌的顏色進(jìn)行比較；3)得出#3個(gè)體的總類胡蘿卜素含量為10(Γ 30μ g/g，用時(shí)4秒。對(duì)比例3采用常規(guī)方法測(cè)定閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量:對(duì)#3個(gè)體活體解剖取其閉殼肌，真空冷凍干燥并研磨粉碎，然后按Zheng等(2010)方法提取#3個(gè)體中的總類胡蘿卜素，用UV2501PC型分光光度計(jì)(日本，島津)進(jìn)行光譜掃描，最后參照Z(yǔ)heng等(2010)方法計(jì)算出#3個(gè)體閉殼肌中的總類胡蘿卜素含量為118.5μ g/g，用時(shí)I周。實(shí)施例3和對(duì)比例3說明，采用本發(fā)明制作的扇貝比色扇能夠快速地測(cè)定出華貴櫛孔扇貝1.5齡貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。實(shí)施例4時(shí)間:2012年 7 月。I)華貴櫛孔扇貝1.5齡活體I個(gè)(編號(hào)為:#4)，將其兩枚貝殼張開；2)用扇貝比色扇與扇貝閉殼肌的顏色進(jìn)行比較；3)得出#4個(gè)體的總類胡蘿卜素含量為KKTUOyg/g，用時(shí)5秒。對(duì)比例4采用常規(guī)方法測(cè)定閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量:對(duì)#4個(gè)體活體解剖取其閉殼肌，真空冷凍干燥并研磨粉碎，然后按Zheng等(2010)方法提取M個(gè)體中的總類胡蘿卜素，用UV2501PC型分光光度計(jì)(日本，島津)進(jìn)行光譜掃描，最后參照Z(yǔ)heng等(2010)方法計(jì)算出#4個(gè)體閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量為107.8yg/g，用時(shí)I周。

實(shí)施例4和對(duì)比例4說明，采用本發(fā)明制作的扇貝比色扇能夠快速地測(cè)定出華貴櫛孔扇貝1.5齡貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。實(shí)施例5時(shí)間:2012年 7 月。
I)華貴櫛孔扇貝2齡活體I個(gè)(編號(hào)為:#5)，將其兩枚貝殼張開；2)用扇貝比色扇與扇貝閉殼肌的顏色進(jìn)行比較；3)得出#5個(gè)體的總類胡蘿卜素含量為10(Γ 30μ g/g，用時(shí)3秒。對(duì)比例5采用常規(guī)方法測(cè)定閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量:對(duì)#5個(gè)體活體解剖取其閉殼肌，真空冷凍干燥并研磨粉碎，然后按Zheng等(2010)方法提取#5個(gè)體中的總類胡蘿卜素，用UV2501PC型分光光度計(jì)(日本，島津)進(jìn)行光譜掃描，最后參照Z(yǔ)heng等(2010)方法計(jì)算出#5個(gè)體閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量為103.6μ g/g，用時(shí)I周。實(shí)施例5和對(duì)比例5說明，采用本發(fā)明制作的扇貝比色扇能夠快速地測(cè)定出華貴櫛孔扇貝2齡貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。實(shí)施例6·
時(shí)間:2012年 7 月。I)華貴櫛孔扇貝2齡活體I個(gè)(編號(hào)為:#6)，將其兩枚貝殼張開；2)用扇貝比色扇與扇貝閉殼肌的顏色進(jìn)行比較；3)得出#6個(gè)體的總類胡蘿卜素含量為13(Γ 60μ g/g，用時(shí)3秒。對(duì)比例6采用常規(guī)方法測(cè)定閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量:對(duì)#6個(gè)體活體解剖取其閉殼肌，真空冷凍干燥并研磨粉碎，然后按Zheng等(2010)方法提取#6個(gè)體中的總類胡蘿卜素，用UV2501PC型分光光度計(jì)(日本，島津)進(jìn)行光譜掃描，最后參照Z(yǔ)heng等(2010)方法計(jì)算出#6個(gè)體閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量為139.5μ g/g，用時(shí)I周。實(shí)施例6和對(duì)比例6說明，采用本發(fā)明制作的扇貝比色扇能夠快速地測(cè)定出華貴櫛孔扇貝2齡貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。上述實(shí)施例說明，采用本發(fā)明方法能夠制作出測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用的扇貝比色扇，并且應(yīng)用這種扇貝比色扇能夠快速地測(cè)定出華貴櫛孔扇貝1-2齡貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。本發(fā)明提供的扇貝比色扇測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍為10-250 μ g/g ;所需時(shí)間為3-5秒。另外，凡通過比色扇或顏色卡來測(cè)定貝類體內(nèi)總類胡蘿卜素含量也為本發(fā)明所述創(chuàng)意思想之所及。雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明具體實(shí)施方式
及試驗(yàn)，對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
權(quán)利要求
1.一種測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用扇貝比色扇的制作方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟: 1)挑選貝殼全部為金黃色、閉殼肌顏色由淺黃到深黃不等的華貴櫛孔扇貝活體個(gè)體； 2)在同一條件下對(duì)扇貝閉殼肌進(jìn)行拍照，并用Photoshop獲取每個(gè)個(gè)體的三原色值R、G、B 值； 3)采用常規(guī)方法測(cè)定每個(gè)個(gè)體閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量TCC； 4)采用Matlab軟件將上述R、G、B值與TCC值分別進(jìn)行線性擬合，并將TCC標(biāo)準(zhǔn)值以10為單位梯度遞增獲取標(biāo)準(zhǔn)的R、G、B值； 5)將上述數(shù)值輸入Photoshop中，獲取與TCC標(biāo)準(zhǔn)值相對(duì)應(yīng)的顏色塊； 6)根據(jù)10個(gè)顏色塊由淺到深制作成一個(gè)扇貝比色扇，所述扇貝比色扇由淺到深有10個(gè)顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度，分別對(duì)應(yīng)10個(gè)表示總類胡蘿卜素含量TCC的數(shù)值，單位為μ g/g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述10個(gè)表示總類胡蘿卜素含量TCC的數(shù)值分別為 10、30、50、70、100、130、160、190、220、250，單位為 μ g/g。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述扇貝比色扇的形狀為扇貝狀。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，制作扇貝比色扇的材料為塑料或相片紙。
5.權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述制作方法制作的扇貝比色扇在測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用為一種測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量的方法，所`述方法為利用所述扇貝比色扇與華貴櫛孔扇貝閉殼肌顏色進(jìn)行比較，根據(jù)所述扇貝比色扇的10個(gè)顏色標(biāo)準(zhǔn)梯度對(duì)應(yīng)的總類胡蘿卜素含量，獲得所測(cè)扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量的方法包括如下步驟: I)取華貴櫛孔扇貝活體，將其兩枚貝殼張開； 2 )用扇貝比色扇與扇貝閉殼肌顏色比較； 3)獲得該扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍。
8.根據(jù)權(quán)利要求5-7任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用中測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍為10-250 μ g/g，所需時(shí)間為3-5秒。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用扇貝比色扇的制作方法及其應(yīng)用。利用本發(fā)明制作的扇貝比色扇與扇貝閉殼肌顏色進(jìn)行比較，3-5秒內(nèi)就可得出該扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素的含量范圍。本發(fā)明測(cè)定的華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量范圍為10-250μg/g。本發(fā)明制作測(cè)定扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量用扇貝比色扇的方法簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)。本發(fā)明測(cè)定華貴櫛孔扇貝閉殼肌內(nèi)總類胡蘿卜素含量的方法快速、簡(jiǎn)便、效率高、成本低、易推廣、實(shí)用性強(qiáng)、環(huán)保性強(qiáng)。
文檔編號(hào)A01K61/00GK103070112SQ20131000665
公開日2013年5月1日 申請(qǐng)日期2013年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月8日
發(fā)明者鄭懷平, 李榮宗, 劉合露, 林釗鵬, 楊林鋒, 張濤 申請(qǐng)人:汕頭大學(xué)