專利名稱:美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及植物繁殖領(lǐng)域,具體地說涉及美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)繁殖方法。
背景技術(shù):
美國(guó)紅楓又名紅花槭、北方紅楓、北美紅楓、沼澤楓、加拿大紅楓、紅糖槭、猩紅楓,原產(chǎn)于美國(guó)東北部。其樹姿優(yōu)美,枝葉繁茂,葉型纖秀,葉色秀麗,秋天變色最早,主色鮮紅,副色橘黃,色艷如花,主要用于園林觀賞和庭院綠,也是珍貴的家庭盆栽樹種。美國(guó)紅楓與其他彩葉植物一樣,都可進(jìn)行有性繁殖或無性繁殖。但采用種子繁殖的有性繁殖雖然方法簡(jiǎn)單,但繁殖系數(shù)大,生長(zhǎng)周期長(zhǎng),不利于紅楓的推廣和生產(chǎn)。無性繁殖中采用嫁接繁殖或扦插繁殖,雖然產(chǎn)苗快,成苗快,但生根率始終不高,根系成型差,即使成活了,后期的培養(yǎng)和生長(zhǎng)依然緩慢。
發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明目的本發(fā)明的目的是提供一種增值效果好的組織培養(yǎng)美國(guó)紅楓的方法。技術(shù)方案為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的一種美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)繁殖方法,其特征在于以美國(guó)紅楓帶3飛個(gè)芽的嫩莖作為外植體,消毒后切段并接種到MS+BA+NAA的培養(yǎng)基中,適宜條件下進(jìn)行組織誘導(dǎo)培養(yǎng),光照-黑暗的時(shí)間比例為3:1。本發(fā)明采用MS+BA+NAA的培養(yǎng)基組合,再加上一定的瓊脂和蔗糖,從無機(jī)物、氮源、碳源,以及生長(zhǎng)素各個(gè)條件都滿足組織培養(yǎng)的條件。其中,NAA指萘乙酸。MS培養(yǎng)基是現(xiàn)在組織培養(yǎng)中常用到的無機(jī)物培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基中含有大量的礦物質(zhì),滿足外植體對(duì)無機(jī)物的需求。BA培養(yǎng)基是細(xì)胞生長(zhǎng)素,誘導(dǎo)植物愈傷組織生根,發(fā)芽,分化。所述培養(yǎng)基為MS+2. Omg/L 6-BA+O. 2mg/L NAA培養(yǎng)基,每升培養(yǎng)基中加入20 25g蔗糖和l(Tl5g瓊脂。所述培養(yǎng)菌在加入固化劑前采用121攝氏度高壓蒸汽滅菌20分鐘。其中NAA在蒸汽滅菌之后再加入。所述外植體是以健康的美國(guó)紅楓帶3飛個(gè)芽的嫩莖作為外植體。所述外植體的消毒方法是將外植體方法如4攝氏度50%的丙醇漂洗45 60秒,再用10%次氯酸消毒2 2. 5分鐘,然后用10%雙氧水再消毒2 2. 5分鐘,再用無菌水清洗多遍。所述外植體切段后每段長(zhǎng)0. 5^1. 4cm。作為本發(fā)明的優(yōu)選方案,所述外植體的長(zhǎng)度為 0. 8cm。所述組織誘導(dǎo)培養(yǎng)是在pH 5. 8^6. 2, 22^25 °C的環(huán)境下進(jìn)行,光照強(qiáng)度為1000^2000勒克斯。作為本發(fā)明的優(yōu)選方案,所述pH為6,光照強(qiáng)度為1500勒克斯。有益效果組織培養(yǎng)快繁是一種有效的繁殖方式,本發(fā)明通過建立科學(xué)的培養(yǎng)基,輔以合理的技術(shù)手段,實(shí)現(xiàn)了增值效果好,質(zhì)量高的組織培養(yǎng)繁殖。利用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)外植體不會(huì)出現(xiàn)外植體褐化的情況,從而提高了組織的存活率。具體實(shí)施例方式以美國(guó)紅楓帶3飛個(gè)芽的嫩莖作為外植體,消毒后切段并接種到MS+BA+NAA的培養(yǎng)基中,適宜條件下進(jìn)行組織誘導(dǎo)培養(yǎng),光照-黑暗的時(shí)間比例為3:1。本發(fā)明采用MS+BA+NAA的培養(yǎng)基組合,再加上一定的瓊脂和蔗糖,從無機(jī)物、氮源、碳源,以及生長(zhǎng)素各個(gè)條件都滿足組織培養(yǎng)的條件。培養(yǎng)基為MS+2. Omg/L 6-BA+O. 2mg/L NAA培養(yǎng)基,每升培養(yǎng)基中加入20 25g蔗糖和l(Tl5g瓊脂。培養(yǎng)菌在加入固化劑前采用121攝氏度高壓蒸汽滅菌20分鐘。其中NAA在蒸汽滅菌之后再加入。外植體是以健康的美國(guó)紅楓帶3飛個(gè)芽的嫩莖作為外植體。外植體的消毒方法是將外植體方法如4攝氏度50%的丙醇漂洗45 60秒,再用 10%次氯酸消毒2 2. 5分鐘,然后用10%雙氧水再消毒2 2. 5分鐘,再用無菌水清洗多遍。外植體切段后每段長(zhǎng)0. 5^1. 4cm。作為本發(fā)明的優(yōu)選方案,外植體的長(zhǎng)度為
0.8cm。組織誘導(dǎo)培養(yǎng)是在pH 5. 8飛.2,22^250C的環(huán)境下進(jìn)行,光照強(qiáng)度為1000 2000勒克斯。作為本發(fā)明的優(yōu)選方案,PH為6,光照強(qiáng)度為1500勒克斯。下面通過對(duì)比試驗(yàn)證明本發(fā)明的增值效果。上述實(shí)施例為試驗(yàn)組,對(duì)照組與試驗(yàn)組的步驟相似,每升培養(yǎng)基中加入20g蔗糖和IOg瓊脂,在pH為6,22 25°C環(huán)境下,光照為1500勒克斯,進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng),所不同的在于培養(yǎng)基是 MS+0. 6mg/L 6-BA+O. 3mg/L IAA, IAA 是吲哚乙酸。對(duì)照組經(jīng)過I個(gè)月的培養(yǎng),其中褐化苗數(shù)達(dá)到總量的36%,而本試驗(yàn)組沒有出現(xiàn)褐化苗。另一方面,試驗(yàn)組的生根率為89. 5%,而對(duì)照組的生根率為82. 5%。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式,應(yīng)當(dāng)指出對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說,在不脫離本發(fā)明原理的前提下,還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾,這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)繁殖方法,其特征在于以美國(guó)紅楓帶3飛個(gè)芽的嫩莖作為外植體,消毒后切段并接種到MS+BA+NAA的培養(yǎng)基中,適宜條件下進(jìn)行組織誘導(dǎo)培養(yǎng),光照-黑暗的時(shí)間比例為3:1。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)繁殖方法,其特征在于所述培養(yǎng)基為MS+2. Omg/L 6-BA+O. 2mg/L NAA培養(yǎng)基,每升培養(yǎng)基中加入20 25g蔗糖和10 15g瓊脂。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)繁殖方法,其特征在于所述外植體是以健康的美國(guó)紅楓帶3飛個(gè)芽的嫩莖作為外植體。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或3所述的一種美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)繁殖方法,其特征在于所述外植體的消毒方法是將外植體方法如4攝氏度50%的丙醇漂洗45 60秒,再用10%次氯酸消毒2 2. 5分鐘,然后用10%雙氧水再消毒2 2. 5分鐘,再用無菌水清洗多遍。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)繁殖方法,其特征在于所述外植體切段后每段長(zhǎng)0. 5^1. 4cm0
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)繁殖方法,其特征在于所述組織誘導(dǎo)培養(yǎng)是在pH 5. 8^6. 2,22 25°C的環(huán)境下進(jìn)行,光照強(qiáng)度為1000 2000勒克斯。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)繁殖方法,該方法以美國(guó)紅楓帶3~6個(gè)芽的嫩莖作為外植體,消毒后切段并接種到MS+BA+NAA的培養(yǎng)基中,適宜條件下進(jìn)行組織誘導(dǎo)培養(yǎng),光照-黑暗的時(shí)間比例為3:1。本發(fā)明通過建立科學(xué)的培養(yǎng)基,輔以合理的技術(shù)手段,實(shí)現(xiàn)了增值效果好,質(zhì)量高的組織培養(yǎng)繁殖。利用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)外植體不會(huì)出現(xiàn)外植體褐化的情況,從而提高了組織的存活率。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102715087SQ20121022166
公開日2012年10月10日 申請(qǐng)日期2012年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月30日
發(fā)明者吳昌海 申請(qǐng)人:吳昌海