專利名稱：一種復(fù)合生物肥料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物復(fù)合肥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種復(fù)合生物肥料及制備方法。
背景技術(shù)：
復(fù)合生物肥料把無機(jī)營養(yǎng)元素、微生物菌有機(jī)結(jié)合于一體，體現(xiàn)普通肥料和微生物肥料的綜合效果，是化解土壤板結(jié)現(xiàn)象，修復(fù)和調(diào)理土壤，提高化學(xué)肥料利用率，減少江河污染，減少病蟲害發(fā)生，增強(qiáng)農(nóng)作物的抗逆能力，提高農(nóng)作物果實(shí)品質(zhì)和產(chǎn)量的有效途徑。復(fù)合生物肥料在農(nóng)作物上推廣應(yīng)用，可以提高化學(xué)肥料的有效利用率，肥料利用率可以提聞10 30 %。復(fù)合生物肥料的功能特點(diǎn)主要有以下幾個(gè)方面一是營養(yǎng)較為全面。能夠?yàn)樽魑锾峁┎糠譅I養(yǎng)元素和有益微生物活性菌；二是肥效具有緩釋的功效，提高肥料的利用率；三是疏松土壤，溶磷解鉀，培肥地力。肥料進(jìn)入土壤后，微生物在無機(jī)營養(yǎng)元素、水分、溫度的協(xié)助下大量繁殖，減少了有害微生物群體的生存空間，從而增加了土壤有益微生物菌的數(shù)量，微生物菌產(chǎn)生大量的有機(jī)酸可以把多年沉積在土壤中的磷鉀元素部分溶解釋放出來供作物再次吸收利用，長期使用后土壤將會(huì)變得越來越疏松和肥沃；四是防病防蟲抗重茬。微生物菌在肥料中處于休眠狀態(tài)，進(jìn)入土壤萌發(fā)繁殖后，分泌大量的幾丁質(zhì)酶、胞外酶和抗生素等物質(zhì)，可以有效裂解有害真菌的孢子壁，線蟲卵壁和抑制有害菌的生長，有效地控制土傳性病蟲害的發(fā)生，起到防病防蟲和抗重茬的功效；五是生根壯苗，降低亞硝酸鹽含量，提高品質(zhì)，增產(chǎn)增收。有益菌在土壤中繁殖后，產(chǎn)生大量的植物激素和有機(jī)酸，刺激根系生長發(fā)育，增強(qiáng)農(nóng)作物的光合強(qiáng)度，作物生長根深葉茂，可有效提高作物果實(shí)的糖度，降低作物產(chǎn)品中硝酸鹽及其它有害物質(zhì)的含量，提高品質(zhì)，促進(jìn)農(nóng)作物增產(chǎn)；六是加速土壤中有機(jī)質(zhì)的降解，不僅為農(nóng)作物生長提供更多有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)，提高農(nóng)作物的抗逆性，同時(shí)還可以減少土壤中一些病源菌的生存空間。盡管有益微生物的作用和效果毋庸置疑，但由于有益菌難以抵御化學(xué)肥料的高 滲透壓脅迫，在復(fù)合生物肥料的生產(chǎn)過程中，極易因外界的高滲環(huán)境而失活，在應(yīng)用中達(dá)不到應(yīng)有的促生長作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種復(fù)合生物肥料及制備方法，可使有益菌免受外界影響。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案—種復(fù)合生物肥料，其由復(fù)合肥和除水芽孢菌球組成，按照質(zhì)量比，所述復(fù)合肥和除水芽孢菌球比為6. 7 16. 7 I ;其中所述除水芽孢球菌為枯草芽孢桿菌制成的除水芽孢菌球和膠凍樣類芽孢桿菌制成的除水芽孢菌球按照I : I. I I. 3質(zhì)量比的混合除水芽孢菌球；所述復(fù)合肥按照質(zhì)量百分比，含氮元素16%，含磷元素16%、含鉀元素16% ；所述混合除水芽孢菌球由菌株芽孢和包埋試劑制成，按體積比計(jì)，菌株芽孢包埋試劑=1 8-1 5，其中菌株芽孢為枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別發(fā)酵生成的芽胞菌液，所述包埋試劑包括第一包埋試劑按照質(zhì)量百分比，海藻酸鈉濃度為2% 4%的水溶液；第二包埋試劑按照質(zhì)量百分比，CaCl2濃度為2% 4%的水溶液。本發(fā)明還提供一種復(fù)合微生物肥的制備方法，其包括I)將枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別在芽孢桿菌發(fā)酵液中發(fā)酵制備成第一芽孢菌液和第二芽孢菌液；通過考察不同的碳源、氮源、無機(jī)鹽、pH、溫度、培養(yǎng)時(shí)間、接種量對(duì)這兩種芽孢桿菌形成芽孢的影響，得出其產(chǎn)芽孢的最佳培養(yǎng)基組成為1 3%麩皮，I 3%大豆蛋白胨，O. 5 2% CaCl2,0. 5 2% NaCl，在此基礎(chǔ)上的最佳培養(yǎng)條件為PH7. O 7. 4，溫度為35 45°C，發(fā)酵時(shí)間為24 72h，接種量為I 4%。2)包埋試劑的配置，通過固定包埋的條件優(yōu)化，得出第一包埋試劑的水溶液中的海藻酸鈉濃度為2 4%，第二包埋試劑的水溶液中的CaCl2濃度為2 4%,CaCl2固定海藻酸鈉的時(shí)間為10 24h ；·
3)將步驟I)制備的第一芽孢菌液和第二芽孢菌液分別加入到步驟2)的第一包埋試劑中，充分混合均勻，將混合后的溶液加入到第二包埋試劑中，即得到粒徑為I 5_的含水芽孢菌球，按體積份數(shù)比計(jì)，菌株芽孢包埋試劑=I : 8 I : 5 ;所制得的I 5mm的含水芽孢菌球在4°C環(huán)境下固定化10 24h,用無菌水清洗除去CaCl2,40°C烘箱中干燥即得到O. 5-2mm的除水芽孢菌球；4)將制成的除水芽孢菌球與復(fù)合肥混合，復(fù)合肥和除水芽孢菌球的比6. 7
16.7 1，枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別制成的除水芽孢菌球比為I : I. I
I.3。通過實(shí)施以上技術(shù)方案，具有以下技術(shù)效果本發(fā)明提供的復(fù)合生物肥料及制備方法，I、該復(fù)合生物肥料的菌株經(jīng)過固定包埋后，實(shí)現(xiàn)了有效活菌數(shù)的長期存放，其穩(wěn)定儲(chǔ)藏期為90天以上。2.該復(fù)合微生物肥施入土壤后，由于海藻酸鈉的固定化包埋，延緩菌株的溶出及萌發(fā)，從而免受化肥初期的高滲透壓影響，之后微生物在無機(jī)營養(yǎng)元素、水分、溫度的協(xié)助下萌發(fā)并大量繁殖，與化肥形成協(xié)同作用，既增強(qiáng)了生物肥料肥效，又極大提高了化學(xué)肥料利用率，從而達(dá)到提高生物肥效，改善化肥品質(zhì)，減少化肥用量，使普通肥料具備緩釋、高效、環(huán)境友好的等特征的多重效果。3.該復(fù)合微生物肥的枯草芽孢桿菌具有降解土壤中有機(jī)磷的功效，可以將土壤中的有機(jī)磷降解成供植物生長發(fā)育所利用的無機(jī)磷，膠凍樣類芽孢桿菌具有很好的解鉀能力，能將土壤中礦物質(zhì)的鉀游離出來，供植物生長發(fā)育所需。
具體實(shí)施例方式為了更好的理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面詳細(xì)描述本發(fā)明提供的實(shí)施例。本發(fā)明實(shí)施例提供一種復(fù)合生物肥料，由復(fù)合肥和除水芽孢菌球組成，按照質(zhì)量t匕，所述復(fù)合肥和除水芽孢菌球比為6. 7 16. 7 1，其中所述除水芽孢球菌為枯草芽孢桿菌制成的除水芽孢菌球和膠凍樣類芽孢桿菌制成的除水芽孢菌球按照I : I. I I. 3質(zhì)量比的混合除水芽孢菌球。
所述復(fù)合肥按照質(zhì)量百分比，含氮元素16%，含磷元素16%、含鉀元素16%。所述除水芽孢菌球由菌株芽孢和包埋試劑制成，按體積比計(jì)，菌株芽孢包埋試劑=1 8-1 5，其中菌株芽孢為枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別發(fā)酵生成的芽胞菌液，所述包埋試劑包括第一包埋試劑按照質(zhì)量百分比，海藻酸鈉濃度為2 4%的水溶液；第二包埋試劑按照質(zhì)量百分比，CaCl2濃度為2 4%的水溶液。所述芽孢桿菌發(fā)酵液將枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別發(fā)酵培養(yǎng)，通過培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的優(yōu)化，使兩種菌株的產(chǎn)芽孢率達(dá)到95%以上。本發(fā)明還提供一種復(fù)合微生物肥的制備方法，實(shí)施例I :I)將枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別在芽孢桿菌發(fā)酵液中發(fā)酵制備成第一芽孢菌液和第二芽孢菌液；其產(chǎn)芽孢的培養(yǎng)基組成為3 %麩皮，3 %大豆蛋白胨，I % CaCl2,1% NaCl，在此基礎(chǔ)上的培養(yǎng)條件為pH7. 4，溫度為40°C，發(fā)酵時(shí)間為48h，接種量為2%產(chǎn)芽孢率達(dá)95%以上。2)包埋試劑的配置，第一包埋試劑的水溶液中的海藻酸鈉濃度為3%，第二包埋試劑的水溶液中的CaCl2濃度為4%，CaCl2固定海藻酸鈉的時(shí)間為18h ；3)將步驟I)制備的第一芽孢菌液和第二芽孢菌液分別加入到步驟2)的第一包埋試劑中，充分混合均勻，將混合后的溶液加入到第二包埋試劑中，即得到粒徑為3_的含水芽孢菌球，按體積份數(shù)比計(jì)，菌株芽孢包埋試劑=I 7，即該菌株芽孢與第一包埋試劑的比例為I : 7，以及該菌株芽孢與第二包埋試劑的比例為I : 7;所制得的3mm的含水芽孢菌球在4°C環(huán)境下固定化18h，用無菌水清洗除去CaCl2,40°C烘箱中干燥即得到O. 8mm的除水芽孢菌球；4)將制成的除水芽孢菌球與復(fù)合肥混合，復(fù)合肥和除水芽孢菌球的比10 I?？莶菅挎邨U菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別制成的除水芽孢菌球比為I : 1.2。上述菌株均由篩選得到，其中枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏地址是北京市朝陽區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，保藏編號(hào)為CGMCC NO. 6041，保藏日期2012年4月23日，膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillus mucilaginosus)在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏地址是北京市朝陽區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，保藏編號(hào)為CGMCC NO. 6030，保藏日期2012年4月23日。實(shí)施例2 I)將枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別在芽孢桿菌發(fā)酵液中發(fā)酵制備成第一芽孢菌液和第二芽孢菌液；其產(chǎn)芽孢的培養(yǎng)基組成為2 %麩皮，2 %大豆蛋白胨，O. 5 %CaCl2,0. 5% NaCl，在此基礎(chǔ)上的培養(yǎng)條件為pH7. 2，溫度為35°C，發(fā)酵時(shí)間為72h，接種量為4%，產(chǎn)芽孢率達(dá)95%以上。2)包埋試劑的配置，第一包埋試劑的水溶液中的海藻酸鈉濃度為2%，第二包埋試劑的水溶液中的CaCl2濃度為3%，CaCl2固定海藻酸鈉的時(shí)間為12h ；3)將步驟I)制備的第一芽孢菌液和第二芽孢菌液分別加入到步驟2)的第一包埋試劑中，充分混合均勻，然后加入到第二包埋試劑中，即得到粒徑為3_的含水芽孢菌球，按體積份數(shù)比計(jì)，菌株芽孢包埋試劑=I 8，即該菌株芽孢與第一包埋試劑的比例為I 8，以及該菌株芽孢與第二包埋試劑的比例為I : 8;所制得的3mm的含水芽孢菌球在4°C環(huán)境下固定化12h，用無菌水清洗除去CaCl2,40°C烘箱中干燥即得到O. 8mm的除水芽孢菌球；4)將制成的除水芽孢菌球與復(fù)合肥混合，復(fù)合肥和除水芽孢菌球的比12 I?？莶菅挎邨U菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別制成的除水芽孢菌球比為I : 1.1。實(shí)施例3該實(shí)施例為復(fù)合生物肥料制備方法的應(yīng)用實(shí)施例。以土壤為實(shí)驗(yàn)材料，采用盆栽的方法檢測復(fù)合生物肥料中芽孢菌球的菌株芽孢在土壤中的溶出時(shí)間。具體方法試驗(yàn)米用20cmX 25cm塑料盆進(jìn)行,每盆裝土 10kg。把放置30天的復(fù)合生物肥料施入土壤中，施入量為15g，施入的菌株芽孢總菌數(shù)為彡2 X IO8個(gè)，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。將菌株芽孢菌液混合噴灑到普通復(fù)合肥上，放置30天，施入土壤中作為對(duì)照。施入后檢測不同時(shí)間的土樣，通過平板計(jì)數(shù)的發(fā)法檢測土壤中菌株芽孢的個(gè)數(shù)，詳見表I。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)合生物肥料，其特征在于，由復(fù)合肥和除水芽孢菌球組成，按照質(zhì)量比，所述復(fù)合肥和除水芽孢菌球比為6. 7 16. 7 I ;其中所述除水芽孢球菌為枯草芽孢桿菌制成的除水芽孢菌球和膠凍樣類芽孢桿菌制成的除水芽孢菌球按照I : I. I I. 3質(zhì)量比的混合除水芽孢菌球； 所述復(fù)合肥按照質(zhì)量百分比，含氮元素16%，含磷元素16%、含鉀元素16% ； 所述混合除水芽孢菌球由菌株芽孢和包埋試劑制成，按體積比計(jì)，菌株芽孢包埋試劑=1 8-1 5，其中菌株芽孢為枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別發(fā)酵生成的芽胞菌液，所述包埋試劑包括第一包埋試劑按照質(zhì)量百分比，海藻酸鈉濃度為2% 4%的水溶液；第二包埋試劑按照質(zhì)量百分比，CaCl2濃度為2 4%的水溶液。
2.一種復(fù)合微生物肥的制備方法，其特征在于，包括 1)將枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別在芽孢桿菌發(fā)酵液中發(fā)酵制備成第一芽孢菌液和第二芽孢菌液； 2)包埋試劑的配置通過固定包埋的條件優(yōu)化，得出第一包埋試劑的水溶液中的海藻酸鈉濃度為2 4%，第二包埋試劑的水溶液中的CaCl2濃度為2 4%,CaCl2固定海藻酸鈉的時(shí)間為10 24h ； 3)將步驟I)制備的第一芽孢菌液和第二芽孢菌液分別加入到步驟2)的第一包埋試劑中，充分混合均勻，將混合后的溶液加入到第二包埋試劑中，即得到粒徑為I 5_第一芽孢菌液和第二芽孢菌液的含水芽孢菌球，按體積份數(shù)比計(jì)，菌株芽孢包埋試劑=I 8 .1:5; 所制得的I 5mm的含水芽孢菌球在4°C環(huán)境下固定化10 24h,用無菌水清洗除去CaCl2,40°C烘箱中干燥即得到O. 5-2mm的除水芽孢菌球； 4)將制成的除水芽孢菌球與復(fù)合肥混合，復(fù)合肥和除水芽孢菌球的比6.7 .16.7 1，枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌分別制成的除水芽孢菌球比為I : I. I .1.3。
全文摘要
本發(fā)明提供一種復(fù)合生物肥料及制備方法，該復(fù)合生物肥料由復(fù)合肥和除水芽孢菌球組成，按照質(zhì)量比，所述復(fù)合肥和除水芽孢菌球比為6.7～16.7∶1。復(fù)合生物肥料可使有益菌免受外界影響。
文檔編號(hào)C05G3/00GK102910968SQ201210126348
公開日2013年2月6日 申請日期2012年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月27日
發(fā)明者慕琦, 甄靜, 王繼雯, 謝寶恩, 楊文玲, 李冠杰, 劉瑩瑩, 周伏忠, 陳國參 申請人:河南省科學(xué)院生物研究所有限責(zé)任公司