專利名稱：一種檢測(cè)蜂群抗白堊病能力的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蜜蜂養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種檢測(cè)蜂群抗白堊病能力的方法。
背景技術(shù)：
隨著社會(huì)的進(jìn)步，蜜蜂對(duì)人類的價(jià)值越來(lái)越被重視，其授粉作用的不可替代性及相應(yīng)蜂產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值也使得人們?cè)絹?lái)越關(guān)注養(yǎng)蜂業(yè)的發(fā)展，病蟲害一直是威脅養(yǎng)蜂業(yè)發(fā)展的最大問(wèn)題。利用抗生素等化學(xué)藥品在一定程度上控制住疾病，但長(zhǎng)期使用卻削弱了蜜蜂的抵抗力，增強(qiáng)病原的耐藥性，迫使人們不得不加大使用劑量，如此形成惡性循環(huán)，危害了環(huán)境，也造成蜂產(chǎn)品藥物殘留。隨著人們對(duì)食品質(zhì)量要求的不斷提高及環(huán)保意識(shí)的不斷增強(qiáng)，不使用殺蟲劑和抗生素的自然態(tài)抵御蜜蜂病蟲害的方法越來(lái)越受到人們重視。蜜蜂白堊病是由蜜蜂球囊菌iAscosphaera apis)寄生而引起蜜蜂幼蟲死亡的真菌性傳染病，蜂群內(nèi)的傳播主要是蜜蜂球囊菌孢子，孢子的抗性極強(qiáng)，至少能在自然條件下存活35年。菌絲體也能直接侵染幼蟲。白堊病發(fā)病季節(jié)在江浙一帶一般在2-5月份。該病最早由Priss博士在德國(guó)發(fā)現(xiàn)，1963年以前主要發(fā)生在歐洲各國(guó)。1981年在第觀屆國(guó)際養(yǎng)蜂大會(huì)上，將這種蜜蜂真菌病正式定名為蜜蜂球囊菌病——白堊病。1985年在日本召開的世界養(yǎng)蜂大會(huì)特將蜜蜂白堊病列為學(xué)術(shù)會(huì)議的主要議題。后來(lái)，隨著蜜蜂原種的引進(jìn)， 才使此病傳至我國(guó)。自從發(fā)現(xiàn)了這種蜜蜂疾病以后，世界各國(guó)的科研工作者做了大量的研究工作，研究的方面包括病原的生物學(xué)特性，最適培養(yǎng)條件，該病的發(fā)病情況，流行規(guī)律， 病理組織學(xué)，病情的診斷方式以及藥物防治等各個(gè)方面。特別是近幾年，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，一些現(xiàn)代化的研究手段也應(yīng)用于了這種疾病的研究。目前，防治蜜蜂白堊病主要措施包括(1)用干凈的蜂箱、巢脾換出病群的箱、重病脾，用福爾馬林加高錳酸鉀密閉熏蒸消毒；嚴(yán)重的病脾應(yīng)考慮燒毀；(2)病群于晴天用 0. 5%的高錳酸鉀噴霧做成年蜂體表消毒，噴至成蜂體表霧濕狀為止，每天一次，連續(xù)3天； (3)用山梨酸和丙酸鈉摻入花粉中飼喂病群，連續(xù)7天；用二性霉素-B摻入花粉中飼喂病群(2g / 60框蜂)，連續(xù)7天；用左旋咪唑6片加制霉菌素2片碾粉摻入花粉飼喂病群，(治療20框蜂)，連續(xù)7天；用甲苯咪唑2片碾粉摻入花粉飼喂病群(治20框蜂)，連續(xù)7天；均可獲得較好的療效，且不傷蜂；(4)蜂群注意通風(fēng)降濕，以含水量22%以下的蜂蜜作飼料， 并注意及早控制其他病害，春季做好保溫，使蜂箱內(nèi)維持對(duì)蜜蜂發(fā)育有利的溫度。蜜蜂白堊病于上世紀(jì)九十年代在江浙一帶發(fā)生后迅速蔓延到全國(guó)各地，嚴(yán)重危害了我國(guó)養(yǎng)蜂業(yè)，廣大蜂農(nóng)除了采用費(fèi)工費(fèi)錢并有一定副作用的物理和化學(xué)的方法控制白堊病的發(fā)生外，也迫切希望能夠選育出既高產(chǎn)又能抗白堊病的蜂種，有研究表明，不同品種、 品系的蜜蜂，甚至同一品種、品系內(nèi)的不同蜂群，其抗白堊病能力、工蜂發(fā)現(xiàn)病蟲時(shí)間的早、 晚及清除病蟲的能力等特征都存在著遺傳特性上的差異，而這些特征又都和蜂群的抗白堊病能力密切相關(guān)。目前，選育抗白堊病蜂種主要通過(guò)檢測(cè)蜂群的白堊病直接發(fā)生率來(lái)判斷， 蜂群的白堊病直接發(fā)生率通過(guò)檢測(cè)蜂群巢門口和蜂群內(nèi)子脾上的白堊病死尸的個(gè)數(shù)來(lái)計(jì)算，非常麻煩和費(fèi)力，而且在白堊病的非發(fā)病季節(jié)無(wú)法判斷蜂群的抗白堊病能力。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種檢測(cè)蜂群抗白堊病能力的方法， 該方法利用蜜蜂清理死亡幼蟲或蛹的生物學(xué)特性，通過(guò)人為處理封蓋子脾致死，放回蜂群后檢測(cè)蜜蜂對(duì)死亡封蓋子的清除率，以判斷該蜂群的抗白堊病能力。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的一種檢測(cè)蜂群抗白堊病能力的方法，包括如下步驟
(1)從被檢測(cè)蜂群內(nèi)切割一塊;T5X6 8cm封蓋子脾，做好封蓋子脾與對(duì)應(yīng)蜂群的編號(hào)，把切下的封蓋子脾在室溫下用水浸泡20-30h或在-10至-86°C冰箱內(nèi)冷凍5-30h，記錄經(jīng)水泡或冷凍處理的封蓋子脾的封蓋子總數(shù)，放回原蜂群原位；
(2)過(guò)M-4 !，記錄被清除的封蓋子個(gè)數(shù)；
(3)計(jì)算被檢測(cè)蜂群對(duì)水泡或冷凍處理封蓋子的清除率，清除率等于被清除的封蓋子個(gè)數(shù)與封蓋子總數(shù)的比值，清除率高的蜂群的抗白堊病能力強(qiáng)。進(jìn)一步地，蜂群內(nèi)的工蜂幼蟲成長(zhǎng)到6日末，由工蜂將其巢房口封上蠟蓋，封蓋巢房?jī)?nèi)的幼蟲吐絲作繭，然后化蛹，封蓋的幼蟲和蛹統(tǒng)稱為封蓋子，有大部分封蓋子的巢脾叫做封蓋子脾。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有的有益的效果是
1.本發(fā)明是通過(guò)檢測(cè)蜂群對(duì)死亡封蓋子的清理率來(lái)判斷蜂群的抗白堊病能力，精確性和科學(xué)性強(qiáng)。2.本發(fā)明可以在白堊病非發(fā)生季節(jié)檢測(cè)蜂群的抗白堊病能力，克服以往根據(jù)蜂群白堊病發(fā)生率高低來(lái)選擇抗白堊病蜂種，提高選育效率，加快育種進(jìn)程。3.本發(fā)明可以檢測(cè)蜂群的清除率，從而預(yù)測(cè)種用蜂王和雄蜂的抗白堊病能力，提高優(yōu)良蜂王選留和雄蜂配種的準(zhǔn)確性，大大提高蜜蜂抗白堊病育種效率。4.本發(fā)明檢測(cè)蜂群的抗白堊病能力，過(guò)程簡(jiǎn)單，成本較低，適于蜜蜂育種過(guò)程中大面積采用。


圖1是Mh內(nèi)不同方法對(duì)死亡封蓋子的清除率示意圖； 圖2是48h內(nèi)蜜蜂對(duì)死亡封蓋子的清除率示意圖。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的檢測(cè)蜂群抗白堊病能力的方法，步驟如下
1、從被檢測(cè)蜂群內(nèi)切割一塊;Γ5 X 6 8cm封蓋子脾，做好封蓋子脾與對(duì)應(yīng)蜂群的編號(hào)， 把切下的封蓋子脾在室溫下用水浸泡20-30h或在-10至-86°C冰箱內(nèi)冷凍5-30h，記錄經(jīng)水泡或冷凍處理的封蓋子脾的封蓋子總數(shù)，放回原蜂群原位。2、過(guò)M-4 !，記錄被清除的封蓋子個(gè)數(shù)。3、計(jì)算被檢測(cè)蜂群對(duì)水泡或冷凍處理封蓋子的清除率，清除率等于被清除的封蓋子個(gè)數(shù)與封蓋子總數(shù)的比值，清除率高的蜂群的抗白堊病能力強(qiáng)。上述的封蓋子和封蓋子脾是指蜂群內(nèi)的工蜂幼蟲成長(zhǎng)到6日末，由工蜂將其巢房口封上蠟蓋，封蓋巢房?jī)?nèi)的幼蟲吐絲作繭，然后化蛹，封蓋的幼蟲和蛹統(tǒng)稱為封蓋子，有大部分封蓋子的巢脾叫做封蓋子脾。本發(fā)明可以判斷被檢測(cè)蜂群的抗白堊病能力強(qiáng)弱，并用于培育具有抗白堊病性狀的新蜂種。實(shí)施例1 白堊病患群與健康蜂群對(duì)死亡封蓋子的清除率檢測(cè)
在浙江大學(xué)華家池校區(qū)實(shí)驗(yàn)蜂場(chǎng)，選擇群勢(shì)基本一致的三群患白堊病蜂群(實(shí)驗(yàn)組)和三群健康蜂群(對(duì)照組)，每群用特制的巢脾切塊機(jī)切出四塊6. 5*3. 5cm的小封蓋子脾，分別在經(jīng)水泡Mh、-20°C冰凍Mh、液氮、針扎處理后，放回原群，每隔24h觀察記錄一次封蓋子的剩余數(shù)目。連續(xù)觀察三次。采用生統(tǒng)t檢驗(yàn)來(lái)統(tǒng)計(jì)分析不同處理方法的差異顯著性。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組在Mh、48h、72h內(nèi)蜜蜂對(duì)死亡封蓋子的清理百分比。其中，分析實(shí)驗(yàn)處理后共三次觀察統(tǒng)計(jì)得到的封蓋子剩余量發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)處理后24h和48h，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組蜂群對(duì)經(jīng)水泡處理的封蓋子清理能力存在顯著差異，對(duì)冰凍處理后的封蓋子清理能力呈差異顯著，而對(duì)液氮和針扎處理的封蓋子并無(wú)顯著差異(見(jiàn)圖1、2);實(shí)驗(yàn)處理后72h，蜂群對(duì)四種處理后的封蓋子清除效果無(wú)顯著差異。由以上結(jié)果可知，采用水泡或冰凍24h處理封蓋子脾在24h或48小時(shí)內(nèi)統(tǒng)計(jì)蜜蜂對(duì)死亡封蓋子的清除率的方法可以判斷蜂群的抗白堊病能力，并用于培育具有抗白堊病性狀的新蜂種。
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)蜂群抗白堊病能力的方法，其特征在于，包括如下步驟(1)從被檢測(cè)蜂群內(nèi)切割一塊;T5X6 8cm封蓋子脾，做好封蓋子脾與對(duì)應(yīng)蜂群的編號(hào)，把切下的封蓋子脾在室溫下用水浸泡20-30h左右或在-10至-86°C冰箱內(nèi)冷凍5-30h 左右，記錄經(jīng)水泡或冷凍處理的封蓋子脾的封蓋子總數(shù)，放回原蜂群原位；(2)過(guò)Μ-4 !左右，記錄被清除的封蓋子個(gè)數(shù)；(3)計(jì)算被檢測(cè)蜂群對(duì)水泡或冷凍處理封蓋子的清除率，清除率等于被清除的封蓋子個(gè)數(shù)與封蓋子總數(shù)的比值，清除率高的蜂群的抗白堊病能力強(qiáng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測(cè)蜂群抗白堊病能力的方法，其特征在于，蜂群內(nèi)的工蜂幼蟲成長(zhǎng)到6日末，由工蜂將其巢房口封上蠟蓋，封蓋巢房?jī)?nèi)的幼蟲吐絲作繭，然后化蛹，封蓋的幼蟲和蛹統(tǒng)稱為封蓋子，有大部分封蓋子的巢脾叫做封蓋子脾。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種檢測(cè)蜂群抗白堊病能力的方法，該方法是從被檢測(cè)蜂群內(nèi)切割一塊封蓋子脾，水泡或冰凍處理后放回原蜂群原位，過(guò)24h-48小時(shí)計(jì)算被檢測(cè)蜂群對(duì)水泡或冰凍處理后封蓋子的清除率，清除率高的蜂群的抗白堊病能力強(qiáng)，據(jù)此可以篩選出具有抗白堊病能力的蜂群，并用于培育具有抗白堊病性狀的新蜂種。該方法具有重要的應(yīng)用價(jià)值，通過(guò)檢測(cè)蜂群對(duì)水泡或冰凍處理的封蓋子的清除率，預(yù)測(cè)種用蜂王或雄蜂的抗白堊病性能，提高優(yōu)良抗白堊病蜂王選留和雄蜂配種的準(zhǔn)確性，大大提高蜜蜂抗白堊病育種的效率。
文檔編號(hào)A01K67/033GK102524189SQ20121002380
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2012年2月3日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月3日
發(fā)明者戴雙進(jìn), 汪理想, 潘嬌, 蘇松坤, 陳盛祿 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)