專利名稱：一種血液保養(yǎng)液及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于血液保存領(lǐng)域中的血液保養(yǎng)液及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著我國(guó)醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，輸血量也在逐年遞增，我國(guó)2006年用血量為1600 噸，2009年達(dá)到3000噸。輸血在救治失血和貧血病人中發(fā)揮著重要的作用。目前，應(yīng)用的血液保養(yǎng)液主要有ACD、CPD或CPDA，他們的主要功能就是抗凝，并為紅細(xì)胞提供能量。然而，一些研究表明輸庫(kù)存血對(duì)病人的生存和健康存在著很大的威脅，輸血會(huì)引起重癥病人局部器官組織的嚴(yán)重缺血、缺氧和再灌注損傷，尤其是心臟功能不全的病人表現(xiàn)更為明顯。 主要原因是血液在現(xiàn)有保養(yǎng)液中保存時(shí)，一氧化氮急劇下降，導(dǎo)致外周組織的血管不能有效擴(kuò)張，引起組織或器官供血不足。迄今為止，國(guó)內(nèi)關(guān)于改善庫(kù)存血這一缺陷的研究還未見(jiàn)報(bào)道。國(guó)外有研究者用直接沖NO的方法來(lái)增加庫(kù)存血中NO的含量，達(dá)到擴(kuò)張血管，增加組織供氧的目的。但是直沖NO要開(kāi)放性操作，增加了細(xì)菌污染的幾率，同時(shí)，很難控制S-亞硝基血紅蛋白(SNO-Hb)的生成量，導(dǎo)致NO含量過(guò)多，從而引起多器官衰竭等多種嚴(yán)重的副作用。

發(fā)明內(nèi)容
為解決現(xiàn)有血液保養(yǎng)液只具有提供能量和抗凝的功能，且對(duì)血液副作用大(使血液中一氧化氮含量急劇下降，從而導(dǎo)致組織或器官供血不足)的缺陷，本發(fā)明提供了一種可提高庫(kù)存血的乏氧性血管舒張功能，輸注時(shí)提高血管舒張活性，增加組織灌流量，改善組織的缺血缺氧(增加組織供血供氧)，從而提高臨床輸血安全性和有效性的血液保養(yǎng)液。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案一種血液保養(yǎng)液，是包含以下摩爾濃度組分的PH 5. 5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20) 88. 85-90. OOmmo 1/L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 15. 10-16. 20mmol/L,無(wú)水葡萄糖 136. 50-146. 60mmol/L,磷酸二氫鈉 (NaH2PO4 ·Η20) 14. 00-14. 31mmol/L,腺嘌呤 5. 30-5. 58mmol/L, L-精氨酸 2. 20-3. OOmmol/L0優(yōu)選的本發(fā)明血液保養(yǎng)液的配方是包含以下摩爾濃度組分的pH 5. 5的水溶液 枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20)89. 40mmol/L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 15. 56mmol/L,無(wú)水葡萄糖 141. 50mmol/L,磷酸二氫鈉(NaH2PO4 · H2O) 14. 20mmol/L,腺嘌呤 5. 46mmol/L, L-精氨酸 2.60mmol/L。另一優(yōu)選的本發(fā)明血液保養(yǎng)液的配方是包含以下摩爾濃度組分的pH 5. 5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20) 88. 85mmol/L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 15. 10mmol/L,無(wú)水葡萄糖 136. 50mmol/L，磷酸二氫鈉(NaH2PO4 · H2O) 14. 00mmol/L，腺嘌呤 5. 30mmol/L, L-精氨酸 2. 20mmol/Lo再一優(yōu)選的本發(fā)明血液保養(yǎng)液的配方是包含以下摩爾濃度組分的pH 5. 5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20)89. 2mmol/L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 15. 36mmol/L,無(wú)水葡萄糖 139. 10mmol/L,磷酸二氫鈉(NaH2PO4 · H2O) 14. lmmol/L,腺嘌呤 5. 38mmol/L, L-精氨酸2.40mmol/L。還一優(yōu)選的本發(fā)明血液保養(yǎng)液的配方是包含以下摩爾濃度組分的pH 5. 5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20)89. 7mmol/L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 15. 91mmol/L,無(wú)水葡萄糖 143. 10mmol/L，磷酸二氫鈉(NaH2PO4 · H2O) 14. 25mmol/L，腺嘌呤 5. 52mmol/L, L-精氨酸 2.80mmol/Lo又一優(yōu)選的本發(fā)明血液保養(yǎng)液的配方是包含以下摩爾濃度組分的pH 5. 5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20)90. Ommo 1/L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 16. 20mmol/L,無(wú)水葡萄糖 146. 60mmol/L，磷酸二氫鈉(NaH2PO4 · H2O) 14. 31mmol/L，腺嘌呤 5. 58mmol/L, L-精氨酸 3.00mmol/Lo本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種上述血液保養(yǎng)液的制備方法。本發(fā)明所提供的血液保養(yǎng)液的制備方法，可包括以下步驟1)按上述配方將濃度換算成重量稱取各組分；2)將步驟1)中的各組分混合均勻后用醫(yī)用水溶解，定容，調(diào)pH值至5. 5，得到血液保養(yǎng)液。具體來(lái)講，制備IL本發(fā)明血液保養(yǎng)液的方法，可包括以下步驟1)按配方稱取各組分如按實(shí)施例3的組配，稱取枸櫞酸鈉 (Na3C6H5O7 · 2H20) 26. 29g,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 2. 99g，無(wú)水葡萄糖 25. 49g，磷酸二氫鈉 (NaH2PO4 · H2O) 1. 70g，腺嘌呤 0. 74g，L-精氨酸 0. 45g ；2)將步驟1)中的各組分混合均勻后用醫(yī)用水溶解，定容至1L，調(diào)pH值至5.5，得到IL血液保養(yǎng)液。本發(fā)明另一目的是提供所述血液保養(yǎng)液在庫(kù)存血保存中的應(yīng)用。本發(fā)明血液保養(yǎng)液的使用方法為將14mL保養(yǎng)液與采集的100 士 IOmL血液混合，在血液采集過(guò)程中，要不斷輕搖混勻，確保血液保養(yǎng)液與血液充分混合。本發(fā)明還以目的是提供L-精氨酸的一種新功用，即其在制備庫(kù)存血的血液保養(yǎng)液中的應(yīng)用，該應(yīng)用是在現(xiàn)有血液保養(yǎng)液中加入2. 20-3. 00mmol/L的L-精氨酸?，F(xiàn)有血液保養(yǎng)液包括本發(fā)明中具體列舉的和那些沒(méi)有具體列舉的。本發(fā)明以上技術(shù)方案，是利用紅細(xì)胞自身的內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)，通過(guò)添加NO合成底物L(fēng)-arg的方法，提高庫(kù)存血Hb-NO的含量，使庫(kù)存血液重新亞硝基化，從而達(dá)到恢復(fù)庫(kù)存血舒張血管活性的目的。該新型血液保養(yǎng)液在保持血液質(zhì)量的同時(shí)還能夠維持血液保存期間NO的含量，與現(xiàn)有的血液保養(yǎng)液保存的紅細(xì)胞相比，能夠保持其舒張血管的活性，減少受血者的組織缺氧狀況，提高臨床輸血的安全性和有效性。本發(fā)明將從根本上改變血液保養(yǎng)液只為維持紅細(xì)胞攜氧功能的目的，賦予了庫(kù)存血擴(kuò)張血管和增加局部血液量的新功能，是血液保存和血液質(zhì)量控制的一次革命，有望替代現(xiàn)有的血液保養(yǎng)液，并將產(chǎn)生巨大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益，應(yīng)用前景廣闊。下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。


圖1為^festern Blotting鑒定紅細(xì)胞膜上的NOS蛋白結(jié)果圖2為紅細(xì)胞膜上NOS的WB鑒定結(jié)果的灰度分析結(jié)果
圖3為紅細(xì)胞膜上的NOS的免疫熒光法鑒定結(jié)果圖4為不同保存時(shí)間的庫(kù)存血的NOS活性檢測(cè)結(jié)果圖5為光解-化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血液中NO含量的示意6為L(zhǎng)-arg對(duì)血管舒張功能影響的檢測(cè)結(jié)果圖7為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液pH值影響的檢測(cè)結(jié)果圖8為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液K+影響的檢測(cè)結(jié)果圖9為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液Na+影響的檢測(cè)結(jié)果圖10為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液Cl_影響的檢測(cè)結(jié)果
圖11為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液ME影響的檢測(cè)結(jié)果圖12為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫鹽(酸堿代謝指標(biāo)之一)影響的檢測(cè)結(jié)果圖13為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液實(shí)際碳酸氫鹽(酸堿代謝指標(biāo)之一)影響的檢測(cè)結(jié)果圖14為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液影響的檢測(cè)結(jié)果圖15為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液P(X)2影響的檢測(cè)結(jié)果圖16為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液影響的檢測(cè)結(jié)果圖17為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液紅細(xì)胞變形性影響的檢測(cè)結(jié)果圖18為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液紅細(xì)胞聚集性影響的檢測(cè)結(jié)果圖19為本發(fā)明血液保養(yǎng)液和對(duì)照CPDA對(duì)庫(kù)存血液游離血紅蛋白影響的檢測(cè)結(jié)果
具體實(shí)施例方式本發(fā)明是為解決現(xiàn)有血液保養(yǎng)液的缺陷，提供了一種保持血液質(zhì)量的同時(shí)還能夠維持血液保存期間NO的含量，從而可提高庫(kù)存血的乏氧性血管舒張功能，輸注時(shí)提高血管舒張活性，增加組織灌流量，增加組織供血供氧，從而提高臨床輸血安全性和有效性的血液保養(yǎng)液。本發(fā)明的血液保養(yǎng)液，是包含以下摩爾濃度組分的pH 5.5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20)88. 85-90. OOmmo 1/L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 15. 10-16. 20mmol/L,無(wú)水葡萄糖 136. 50-146. 60mmol/L,磷酸二氫鈉(NaH2PO4 · H2O) 14. 00-14. 31mmol/L,腺嘌呤 5. 30-5. 58mmol/L，L-精氨酸2. 20-3. OOmmol/L0其中，枸櫞酸鈉、枸櫞酸、無(wú)水葡萄糖、磷酸二氫鈉和腺嘌呤的組合使用為較為經(jīng)典的現(xiàn)有血液保養(yǎng)液，具有基礎(chǔ)的抗凝功能，并能為紅細(xì)胞提供能量；L-精氨酸(L-arg)是本發(fā)明精心篩選確定的功能組分，本發(fā)明設(shè)計(jì)利用紅細(xì)胞自身的內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOQ，通過(guò)添加NO合成底物L(fēng)-arg的方法來(lái)提高血液中Hb-NO的含量，使庫(kù)存血液重新亞硝基化，而不是使用直接加入NO的方式。本發(fā)明血液保養(yǎng)液組配中各組分功能為葡萄糖紅細(xì)胞代謝的底物；枸櫞酸與鈣離子能形成一種難于解離的可溶性絡(luò)合物，因而降低了血中鈣離子濃度，使血液凝固受阻；枸櫞酸鹽抗凝，減少乳酸產(chǎn)生；磷酸鹽緩沖物，穩(wěn)定血液保養(yǎng)液的pH值；
鈉離子減少葡萄糖消耗，降低乳酸的形成，延長(zhǎng)保存時(shí)間，穩(wěn)定紅細(xì)胞膜；腺嘌呤生成ATP，為紅細(xì)胞的新陳代謝提供能量，并且是eNOS的激動(dòng)劑；L-精氧酸做為內(nèi)皮型一氧化氮合酶的底物，生成N0，使血液重新亞硝基化。實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過(guò)程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例。下述實(shí)施例中所用方法如無(wú)特別說(shuō)明均為常規(guī)方法。試驗(yàn)例1、紅細(xì)胞膜上的eNOS蛋白的鑒定、分析(1)方法采用免疫印跡和免疫熒光技術(shù)對(duì)紅細(xì)胞的NOS進(jìn)行鑒定、分析，具體操作方法參照《免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》；采用南京建成公司的一氧化氮合酶檢測(cè)試劑盒，對(duì)紅細(xì)胞的NOS活力進(jìn)行了檢測(cè)，具體操作方法見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū)；采用碧云天公司的一氧化氮熒光探針，結(jié)合單一類型的NOS抑制劑，鑒定分析了紅細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用的NOS類型，具體操作方法見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū)。(2)結(jié)果①^festern Blotting法鑒定紅細(xì)胞膜上的NOS庫(kù)存去除白細(xì)胞的紅細(xì)胞懸液(紅細(xì)胞個(gè)數(shù)3.5X 109-5.5X 109個(gè)/mL)分別在 4°C保存 0d、7d、14d、21dJ8d、35d 后進(jìn)行免疫印跡(WB)鑒定，一抗為 mouse anti-eNOS，二抗為goat anti-mouse IgG，陰性對(duì)照為人紅細(xì)胞(實(shí)驗(yàn)時(shí)不加一抗)，陽(yáng)性對(duì)照為人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，以α-Tublin為內(nèi)參。鑒定結(jié)果如圖1所示，表明紅細(xì)胞內(nèi)含有N0S，且從保存開(kāi)始至保存期末均能檢測(cè)出N0S，與新鮮紅細(xì)胞(Od)相似。②紅細(xì)胞膜上的NOS的半定量分析用LabWorks軟件對(duì)上述紅細(xì)胞膜上NOS的WB鑒定結(jié)果的圖像進(jìn)行灰度分析。結(jié)果如圖2所示(橫坐標(biāo)表示時(shí)間，縱坐標(biāo)表示eNOS/Tubulin ；a表示分別與新鮮血兩兩比較的結(jié)果)，方差分析結(jié)果顯示，時(shí)間因素對(duì)于NOS/Tubulin灰度的影響沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F = 0. 67，P > 0. 05)；在各保存時(shí)間點(diǎn)，NOS/Tubulin灰度分析結(jié)果與新鮮血(Od)差異不顯著 (P > 0. 05)，從而說(shuō)明隨庫(kù)存血保存時(shí)間的延長(zhǎng)，NOS含量保持穩(wěn)定。③免疫熒光法鑒定紅細(xì)胞膜上的NOS及其類型免疫熒光鑒定紅細(xì)胞膜上NOS的結(jié)果如圖3所示，a幅為紅細(xì)胞，可見(jiàn)圓盤(pán)狀綠色光壞，與紅細(xì)胞形狀一致，表明結(jié)果為陽(yáng)性；b幅為陰性對(duì)照，未發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞熒光物質(zhì)，結(jié)果為陰性；c幅為陽(yáng)性對(duì)照(臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)，陽(yáng)性對(duì)照細(xì)胞的檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。以上檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步表明紅細(xì)胞膜上確實(shí)存在NOS蛋白，類型為eNOS。④不同保存時(shí)間的庫(kù)存血的eNOS活性檢測(cè)庫(kù)存血液在4°C分別保存0d、10d、20d、35d時(shí)檢測(cè)NOS活性(U/gHb)。檢測(cè)結(jié)果如圖4所示(橫坐標(biāo)表示時(shí)間，縱坐標(biāo)表示eNOS活性；a表示分別與新鮮血兩兩比較的結(jié)果)， 分別為 31. 28士8. 97,36. 95士9. 44,36. 13士3. 9,37. 93士5. 14，方差分析結(jié)果顯示，時(shí)間對(duì) eNOS活性的影響沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0. 05)，各組之間的eNOS活性與新鮮血(Od)比較沒(méi)有顯著性差異(P > 0. 05)。檢測(cè)結(jié)果表明庫(kù)存血的eNOS活性沒(méi)有隨保存時(shí)間的延長(zhǎng)而發(fā)生改變。試驗(yàn)例2、L-Arg對(duì)庫(kù)存血液NO含量的影響L-精氨酸(L-arg)臨床應(yīng)用已經(jīng)比較普遍，它作為一種半必需氨基酸，是尿素、鳥(niǎo)
6氨酸及肌丁胺的直接前體，是合成肌肉素的重要原素，且被用作聚胺、瓜氨酸及谷氨酰胺的合成，在細(xì)胞分裂、傷口愈合、免疫功能、分泌激素等過(guò)程中都起到重要的作用。目前，L-精氨酸作為氨基酸類藥物，也是嬰幼兒生長(zhǎng)必需的氨基酸，并且常用其鹽酸鹽。L-精氨酸能參與體內(nèi)鳥(niǎo)氨酸循環(huán)，促進(jìn)尿素生成而降低血氨，對(duì)外科燒傷、肝功能不全所致的高氨血癥及肝性腦病患者有效。同時(shí)，精氨酸是精子蛋白的主要成分，口服能增加精子的數(shù)量和活動(dòng)力，因而可用于治療男性不育癥。此外，靜脈注射精氨酸能刺激垂體釋放生長(zhǎng)激素，因而還可用于輔助測(cè)定垂體功能。本發(fā)明在庫(kù)存血中加入L-arg的目的，與其上述藥理作用完全不同。在血液中加入L-arg后，利用紅細(xì)胞自身的eNOS，來(lái)生增加庫(kù)存血中NO的含量，使總Hb-NO含量增加， 來(lái)改善血液舒張血管的功能，從而改善組織或局部器官的灌流量，提高血液的運(yùn)氧功能。(1)方法發(fā)明人分析得知，L-Arg可作為合成NO的底物，為了保持庫(kù)存血中NO的含量，加入不同濃度的L-Arg來(lái)提高總Hb-N0(與Hb結(jié)合的NO)的含量，具體方法為庫(kù)存血液在 4°C保存前，分另Ij力口入 0 μ mol/L、3 μ mol/L、30 μ mol/L、300 μ mol/L、3000 μ mo/L 的 L-Arg, 在0d、3d、7d、14d、21cU8d、35d時(shí)檢測(cè)總Hb-NO的含量。采用光解-化學(xué)發(fā)光法(圖5)對(duì)血液中的NO含量進(jìn)行檢測(cè)，具體步驟如下①打開(kāi)氦氣瓶開(kāi)關(guān)，將與之相聯(lián)的橡膠管一端放入水中，用來(lái)調(diào)節(jié)氣體流量。用微調(diào)旋鈕緩慢調(diào)節(jié)氣體壓力，以每分鐘100左右個(gè)氣泡為宜。②接通蠕動(dòng)泵電源，打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，調(diào)整蠕動(dòng)泵轉(zhuǎn)速，以25rpm為宜，速度過(guò)快會(huì)影響紫外線照射檢測(cè)樣本的時(shí)間。③接通紫外光分解器電源，先打開(kāi)風(fēng)扇，然后打開(kāi)紫外燈開(kāi)關(guān)，用紫外光強(qiáng)度測(cè)定儀檢測(cè)紫外線強(qiáng)度，紫外線強(qiáng)度要大于1000 μ ff/cm2,達(dá)不到要求的，需更換紫外燈燈管。④按圖5所示，用不同直徑橡膠管連接好各個(gè)儀器，詳細(xì)檢查管路的連接是否漏氣，漏氣會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。⑤打開(kāi)每個(gè)儀器和三通開(kāi)關(guān)，用氦氣充分置換管路中的空氣15min，去除管路中的氧氣，氧氣存在會(huì)與NO反應(yīng)生成可溶于水的Ν02_+Ν03_，影響NO的檢測(cè)。⑥關(guān)閉氦氣管路，讓Hb樣品隨蠕動(dòng)泵運(yùn)動(dòng)通過(guò)三通，進(jìn)入管路，注意不要讓空氣通過(guò)三通，即刻停止進(jìn)樣，進(jìn)樣量為10mL。⑦關(guān)閉待檢樣品進(jìn)樣管路，打開(kāi)氦氣管路，讓氦氣緩慢推動(dòng)樣品前進(jìn)，進(jìn)入紫外光分解器。⑧此時(shí)，氦氣推動(dòng)Hb溶液不斷進(jìn)入封閉的細(xì)口瓶?jī)?nèi)，沉入底部。與Hb相聯(lián)的NO 氣體分子通過(guò)紫外線照射后產(chǎn)生的NO也一并進(jìn)入瓶?jī)?nèi)，氣體中的水分由于瓶?jī)?nèi)接近0°C而凝結(jié)，氦氣和NO通過(guò)封閉細(xì)口瓶上端的另一個(gè)管路出口，進(jìn)入到氣體留樣袋內(nèi)。⑨先將氮氧化物檢測(cè)儀開(kāi)機(jī)預(yù)熱30min，用氦氣置換檢測(cè)儀內(nèi)的空氣，待檢測(cè)儀穩(wěn)定，再將留樣袋內(nèi)的氣體通過(guò)樣品采集泵進(jìn)入氮氧化物檢測(cè)儀內(nèi)，記錄最大檢測(cè)結(jié)果值。⑩每次實(shí)驗(yàn)完成后要去離子水反復(fù)沖洗管路，去除管路內(nèi)的殘留蛋白，保持管路通風(fēng)和干燥，下次實(shí)驗(yàn)前再?zèng)_洗。(2)結(jié)果檢測(cè)結(jié)果及方差分析結(jié)果如表1所示(F = 88. 77，P < 0. 01 ；與同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組
7比較aP < 0.01, bP > 0. 05)，L-Arg能對(duì)庫(kù)存血中總Hb-NO含量的影響具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.01) ；L-Arg在300 μ mol/L和3000 μ mo/L濃度時(shí)，與同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組比較，總Hb-NO含量均明顯增加(P < 0.01)，3000 μ mo/L增加最明顯。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，L-Arg對(duì)提高庫(kù)存血中總Hb-NO的含量有明顯作用。表IL-Arg對(duì)總Hb-NO含量的影響(n = 4單位ppb)
權(quán)利要求
1.L-精氨酸在制備庫(kù)存血的血液保養(yǎng)液中的應(yīng)用，是在現(xiàn)有血液保養(yǎng)液中加入 2. 20-3. OOmmol/L 的 L-精氨酸。
2.一種血液保養(yǎng)液，是包含以下摩爾濃度組分的pH 5.5的水溶液枸櫞酸鈉 (Na3C6H5O7 · 2H20) 88. 85-90. OOmmo 1/L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 15. 10-16. 20mmol/L,無(wú)水葡萄糖 136. 50-146. 60mmol/L,磷酸二氫鈉(NaH2PO4 · H2O) 14. 00-14. 31mmol/L,腺嘌呤 5. 30-5. 58mmol/L, L-精氨酸 2. 20-3. OOmmol/L0
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血液保養(yǎng)液，其特征在于所述血液保養(yǎng)液的配方是包含以下摩爾濃度組分的PH 5. 5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20) 89. 40mmol/ L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 15. 56mmol/L,無(wú)水葡萄糖 141. 50mmol/L,磷酸二氫鈉 (NaH2PO4 · H2O) 14. 20mmol/L,腺嘌呤 5. 46mmol/L, L-精氨酸 3. OOmmol/L0
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血液保養(yǎng)液，其特征在于所述血液保養(yǎng)液的配方是包含以下摩爾濃度組分的PH 5. 5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20) 88. 85mmol/ L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 15. 10mmol/L,無(wú)水葡萄糖 136. 50mmol/L,磷酸二氫鈉 (NaH2PO4 · H2O) 14. OOmmol/L,腺嘌呤 5. 30mmol/L, L-精氨酸 2. 20mmol/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血液保養(yǎng)液，其特征在于所述血液保養(yǎng)液的配方是包含以下摩爾濃度組分的PH 5. 5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20)89. 2mmol/L,枸櫞酸 (C6H8O7 ·Η20) 15. 36mmol/L，無(wú)水葡萄糖 139. 10mmol/L，磷酸二氫鈉(NaH2PO4 ·Η20) 14. Immo 1/ L,腺嘌呤 5. 38mmol/L, L-精氨酸 2. 40mmol/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血液保養(yǎng)液，其特征在于所述血液保養(yǎng)液的配方是包含以下摩爾濃度組分的PH 5. 5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20) 89. 7mmol/ L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 15. 91mmol/L,無(wú)水葡萄糖 143. 10mmol/L,磷酸二氫鈉 (NaH2PO4 · H2O) 14. 25mmol/L,腺嘌呤 5. 52mmol/L, L-精氨酸 2. 80mmol/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血液保養(yǎng)液，其特征在于所述血液保養(yǎng)液的配方是包含以下摩爾濃度組分的PH 5. 5的水溶液枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7 · 2H20) 90. Ommo 1/ L,枸櫞酸(C6H8O7 · H2O) 16. 20mmol/L,無(wú)水葡萄糖 146. 60mmol/L,磷酸二氫鈉 (NaH2PO4 · H2O) 14. 31mmol/L,腺嘌呤 5. 58mmol/L, L-精氨酸 3. OOmmol/L0
8.一種制備權(quán)利要求2-7任一項(xiàng)所述血液保養(yǎng)液的方法，包括以下步驟1)按配方將各組分濃度換算成重量，稱取各組分；2)將步驟1)中的各組分混合均勻后用醫(yī)用水溶解，定容，調(diào)pH值至5.5，得到血液保養(yǎng)液。
9.權(quán)利要求2-7任一項(xiàng)所述的血液保養(yǎng)液在庫(kù)存血保存中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于在所述應(yīng)用中，14重量份保養(yǎng)液與采集的100士 10重量份血液充分混合。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種血液保養(yǎng)液及其制備方法。該血液保養(yǎng)液是包含以下摩爾濃度組分的pH5.5的水溶液枸櫞酸鈉88.85-90.00mmol/L，枸櫞酸15.10-16.20mmol/L，無(wú)水葡萄糖136.50-146.60mmol/L，磷酸二氫鈉(NaH2PO4·H2O)14.00-14.31mmol/L，腺嘌呤5.30-5.58mmol/L，L-精氨酸2.20-3.00mmol/L。本發(fā)明從根本上改變血液保養(yǎng)液只為維持紅細(xì)胞攜氧功能的目的，賦予了庫(kù)存血擴(kuò)張血管和增加局部血液量的新功能，輸注時(shí)提高血管舒張活性，增加組織灌流量，增加組織供血供氧，從而提高臨床輸血安全性和有效性，是血液保存和血液質(zhì)量控制的一次革命。
文檔編號(hào)A01N1/02GK102422835SQ201110320549
公開(kāi)日2012年4月25日 申請(qǐng)日期2011年10月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月20日
發(fā)明者馮雙利, 卓海龍, 杜為, 王全立, 陸穎, 陳廷友, 陳民才, 韓穎 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院