專利名稱：：全雌美國切片型黃瓜美雌09的培育及應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明全雌美國切片型黃瓜美雌09的培育及應用，屬于生物技術育種領域，專用于培育全雌型黃瓜新品種。二
背景技術：
：黃瓜是全球普遍栽培的主要蔬菜作物之一，其栽培面積在我國保護地蔬菜中居首位，對保證我國蔬菜周年均衡供應方面具有十分重要的作用。黃瓜是雌雄同株異花的一年生植物。在幼苗期就發(fā)生花芽，并進行花芽的性型分化。花一般為單性花，但有的除雌花、雄花外還有完全花。其植株性型有純雌株、雌雄同株、純雄株、、純?nèi)辍⑿廴?、雌雄全同株。其中以純雌株和雌雄同株為?JackE.Staub，MatthewD.Robbins，ToddC.Wehner.VegetablesI.HandbookofPlantBreeding.[M].SpringerNewYork,2008:250)。就品種或株系而言，大致有純雌株系、純強雌株系、雌性系、雌全株系、雄全株系、完全株系、純雌雄株系、純雄株系等.其中雌性系和雌雄株系被廣泛使用。(張春平，何平，曲志才，等.硝酸銀對黃瓜雌性系的誘雄效應.西南大學學報(自然科學版)，2007，29(2):4952)。黃瓜的性型是影響其產(chǎn)量的重要因素，全雌型黃瓜是指植株只開雌花而不開雄花的品系，往往表現(xiàn)出早熟、瓜密、豐產(chǎn)等優(yōu)點。另外，利用全雌型黃瓜制一代雜種無需去雄，節(jié)約了勞動力，降低了制種成本，所制成的一代雜種的純度很高。用全雌型黃瓜作母本配制的一代雜種也多表現(xiàn)早熟、雌花多、采瓜期集中、豐產(chǎn)等優(yōu)點。因此全雌型黃瓜的選育與應用便成為黃瓜育種中一個重要的研究內(nèi)容。但是目前國內(nèi)黃瓜的全雌型品種主要是從國外引進的歐洲溫室型黃瓜，生態(tài)型較為單一，不能滿足生產(chǎn)和育種的需要。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，黃瓜的全雌性狀主要由一對核基因控制，全雌對弱雌為顯性。當全雌性位點處于純合狀態(tài)時，全雌性狀表現(xiàn)穩(wěn)定，不易受到光溫等環(huán)境因素的影響。而當全雌性位點處于雜合狀態(tài)時，其全雌性狀的表現(xiàn)與遺傳背景有著一定的關系，部分生態(tài)類型雜合時表現(xiàn)穩(wěn)定的全雌性，而另外部分生態(tài)類型易受光溫等環(huán)境因素的影響，出現(xiàn)不完全顯性特征，在植株基部出現(xiàn)少量的雄花，但總體的雌性表現(xiàn)均很強。(婁群峰，黃瓜全雌性基因分子標記及ACC合酶基因的克隆與表達研究[M].二零零四屆博士學位論文)所以，通過與雌性系黃瓜雜交、回交、自交的方式，把全雌性基因轉(zhuǎn)育到非全雌性系黃瓜當中，是培育雌性穩(wěn)定的黃瓜新品種，拓寬全雌型黃瓜的生態(tài)型，提高全雌型黃瓜的利用率的有利途徑。三、
發(fā)明內(nèi)容技術問題本發(fā)明是針對當前全雌美國切片型的黃瓜品種資源少，生態(tài)型不夠豐富的現(xiàn)狀，在黃瓜雌性基因為顯性核基因的基礎上，充分利用此基因增加雌性系黃瓜的品種，以提高黃瓜產(chǎn)量、增加育種的親本材料。技術方案全雌美國切片型黃瓜美雌09的培育方法，包括1)全雌型黃瓜由荷蘭RijkZwaan公司購得的黃瓜一代雜種Deltastar，經(jīng)6代自交選育出穩(wěn)定的雌性系EC1，EC1為歐洲溫室型黃瓜，是雌性基因純合的全雌型高代自交系，其長勢中等，主蔓長2-2.5米，節(jié)間長7-9厘米；平均葉面積為20X21厘米，葉綠色，近三角形；商品瓜為綠色，呈圓筒形，瓜長14-16厘米，瓜粗2.5-3厘米，果實表面光滑無剌或極少剌，主側(cè)蔓均可結(jié)瓜，種瓜呈黃綠色；2)雌雄同株型黃瓜627是由黃瓜商品種Poinsett97自交7代得到的穩(wěn)定高代自交系，627為美國切片型黃瓜，雌雄同株，植株長勢強，節(jié)間長9.5-12.5厘米，莖粗0.75-0.9厘米，平均葉面積為22X23厘米，葉片深綠色，呈心形五角，以主蔓結(jié)瓜為主，商品瓜深綠色，瓜條極短，呈圓筒形，瓜剌稀疏白色，瓜長14.5-17.5厘米，寬4.0-4.7厘米;3)全雌基因轉(zhuǎn)育將全雌型黃瓜EC1和雌雄同株型黃瓜627同時進行浸種、催芽、播種、定植及正常的植株管理；在開花期，以EC1為母本，以627為父本，進行雜交得F1，具體操作為在授粉前一天下午，將第二天要開放的EC1的雌花蕾和627的雄花蕾進行套花隔離，開花當天上午8點，將627的雄花花粉授到EC1的雌花柱頭上，3朵雄花授一朵雌花，并繼續(xù)對授粉后的雌花隔離三天；將雜種Fl與627黃瓜回交，然后選擇回交后代中的全雌單株繼續(xù)與627黃瓜回交，至回交3代BC3F1;選BC3F1的全雌單株進行硝酸銀誘雄處理，具體操作為當全雌植株長至5-6片真葉時，未出現(xiàn)花蕾或未出現(xiàn)雄花蕾的植株即為全雌型植株，在下午4點左右用濃度為300mg/L的硝酸銀水溶液對莖尖及葉面噴霧，至葉片布滿小水滴為止，每隔三天處理一次，處理二次，然后將該全雌單株進行自交得BC3F2;在BC3F2中繼續(xù)選擇全雌單株進行誘雄，自交得BC3F3;在BC3F3中選擇全雌型的株系，將植株按1:1誘雄后進行系內(nèi)自交，所收的種子即為全雌型黃瓜新品種美雌09，美雌09植株為全雌型，植株長勢強，節(jié)間長7.5-9.0厘米，莖粗0.55-0.6厘米，葉片深綠色，平均最大葉片面積為21X20.5厘米，第一雌花節(jié)位在6_9節(jié)，以后每節(jié)均有一朵雌花出現(xiàn)，商品瓜極短為圓筒形，瓜色為深綠色，瓜剌稀疏白色，平均瓜長12.5-14.5厘米，粗3.0-3.5厘米，主側(cè)蔓均可結(jié)瓜。全雌單株的選擇標準為全株上下均為雌花，無一朵雄花。全雌型黃瓜新品種美雌09用于黃瓜雜交種培育的方法，包括美雌09與普通栽培黃瓜按3:l種植，并進行正常的植株管理，在開花期進行隔離，然后以美雌09為母本，普通栽培黃瓜為父本進行人工授粉或蜜蜂授粉，采收美雌09的成熟果實，待果實后熟后進行剖瓜洗種子，將種子晾曬烘干，即得到高純度的雜種一代種子。有益效果本發(fā)明全雌美國切片型黃瓜美雌09的培育及其應用方法，與現(xiàn)有技術相比，具有如下優(yōu)點和積極效果本發(fā)明是利用雜交、多代回交及自交的方式將全雌性基因轉(zhuǎn)育到雌雄同株型美國切片型黃瓜627當中。由此獲得的黃瓜新品種美雌09全雌性狀能穩(wěn)定遺傳，且與回交親本627的性狀基本一致。通過此方法，將一雌雄同株型的美國切片型黃瓜轉(zhuǎn)育為穩(wěn)定的全雌切片型黃瓜新品種。由此拓寬了全雌型黃瓜的生態(tài)類型，提高了黃瓜的產(chǎn)量，增加了培育雜種Fl的親本材料。通過田間觀察，黃瓜新品種美雌09為全雌型，植株長勢強，節(jié)間長7.5-9.0厘米，莖粗0.55-0.6厘米，葉片深綠色，平均最大葉片面積為21X20.5厘米，第一雌花節(jié)位在6_9節(jié)，以后每節(jié)均有一朵雌花出現(xiàn)，商品瓜極短為圓筒形，瓜色為深綠色，瓜剌稀疏白色，平均瓜長12.5-14.5厘米，粗3.0-3.5厘米，主側(cè)蔓均可結(jié)瓜。美雌09可作為優(yōu)良的栽培品種，也可作為親本配制雜種一代種子。四圖1全雌美國切片型黃瓜美雌09的培育技術路線圖。生物材料保藏全雌美國切片型黃瓜美雌09，2009年12月17日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCCNO.3541，分類命名為黃瓜(Cucumissativus)。五具體實施例方式全雌美國切片型黃瓜美雌09的培育方法，包括1、親本的來源及性狀(以下性狀描述參考李錫香，朱德蔚，等.黃瓜種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標準[M].北京中國農(nóng)業(yè)出版社，2005.8-34)1)全雌型黃瓜由荷蘭RijkZwaan公司購得的黃瓜一代雜種Deltastar，經(jīng)6代自交選育出穩(wěn)定的雌性系EC1，EC1為歐洲溫室型黃瓜，是雌性基因純合的全雌型高代自交系，其長勢中等，主蔓長2-2.5米；節(jié)間長7-9厘米；平均葉面積為20X21厘米，葉綠色，近三角形，商品瓜為綠色，呈圓筒形，瓜長14-16厘米，瓜粗2.5-3厘米，果實表面光滑無剌或極少剌，主側(cè)蔓均可結(jié)瓜，種瓜呈黃綠色。2)雌雄同株型黃瓜627是由黃瓜商品種Poinsett97(市售品種，楊寅桂等.黃瓜苗期熱害癥狀及其發(fā)生發(fā)展規(guī)律研究[J].中國瓜菜，2007，(05).)自交7代得到的穩(wěn)定高代自交系，627為美國切片型黃瓜，雌雄同株，植株長勢強，節(jié)間長9.5-12.5厘米，莖粗0.75-0.9厘米，平均葉面積為22X23厘米，葉片深綠色，呈心形五角，以主蔓結(jié)瓜為主，商品瓜深綠色，瓜條極短，呈圓筒形，瓜剌稀疏白色，瓜長14.5-17.5厘米，寬4.0-4.7厘米。2、全雌基因的具體轉(zhuǎn)育過程將全雌型黃瓜EC1和雌雄同株型黃瓜627同時進行浸種、催芽、播種、定植及正常的植株管理。在開花期，以EC1為母本，以627為父本，進行雜交得Fl，具體操作為在授粉前5一天下午，將第二天要開放的EC1的雌花蕾和627的雄花蕾進行套花隔離，開花當天上午8點，將627的雄花花粉授到EC1的雌花柱頭上，3朵雄花授一朵雌花，并繼續(xù)對授粉后的雌花隔離三天。將雜種Fl與627黃瓜回交，然后選擇回交后代中的全雌單株繼續(xù)與627黃瓜回交，至回交3代BC3F1。選BC3F1的全雌單株進行硝酸銀誘雄處理，具體操作為當全雌植株長至5-6片真葉時，未出現(xiàn)花蕾或未出現(xiàn)雄花蕾的植株即為全雌型植株，在下午4點左右用濃度為300mg/L的硝酸銀水溶液對莖尖及葉面噴霧，至葉片布滿小水滴為止，每隔三天處理一次，處理二次，然后將該全雌單株進行自交得BC3F2。在BC3F2中繼續(xù)選擇全雌單株進行誘雄，自交得BC3F3。在BC3F3中選擇全雌型的株系，將植株按1:1誘雄后進行系內(nèi)自交，所收的種子即為全雌型黃瓜新品種美雌09。3、全雌型黃瓜新品種美雌09的特性美雌09基本具有美國切片型黃瓜627的性狀，但也具有個別EC1的性狀，及一些中間或超親性狀。美雌09植株為全雌型，植株長勢強，節(jié)間長7.5-9.0厘米，莖粗0.55-0.6厘米，葉片深綠色，平均最大葉片面積為21X20.5厘米，第一雌花節(jié)位在6-9節(jié)，以后每節(jié)均有一朵雌花出現(xiàn)，商品瓜極短為圓筒形，瓜色為深綠色，瓜剌稀疏白色，平均瓜長12.5-14.5厘米，粗3.0-3.5厘米，主側(cè)蔓均可結(jié)瓜。4、全雌型黃瓜新品種美雌09的應用美雌09與配合力高的普通栽培黃瓜按3:l種植，并進行正常的植株管理。在開花期進行隔離，然后以美雌09為母本，普通栽培黃瓜為父本進行人工授粉或蜜蜂授粉。采收美雌09的成熟果實，待果實后熟后進行剖瓜洗種子，將種子晾曬烘干，即得到高純度的雜種一代種子。權利要求全雌美國切片型黃瓜美雌09的培育及應用，包括1)全雌型黃瓜由黃瓜Deltastar經(jīng)6代自交選育出的穩(wěn)定的雌性系EC1，EC1為歐洲溫室型黃瓜，是雌性基因純合的全雌型高代自交系，其長勢中等，主蔓長2-2.5米；節(jié)間長7-9厘米；平均葉面積為20×21厘米，葉綠色，近三角形，商品瓜為綠色，呈圓筒形，瓜長14-16厘米，瓜粗2.5-3厘米，果實表面光滑無刺或極少刺，主側(cè)蔓均可結(jié)瓜，種瓜呈黃綠色；2)雌雄同株型黃瓜627是黃瓜商品種Poinsett97自交7代得到的穩(wěn)定高代自交系，627為美國切片型黃瓜，雌雄同株，植株長勢強，節(jié)間長9.5-12.5厘米，莖粗0.75-0.9厘米，平均葉面積為22×23厘米，葉片深綠色，呈心形五角，以主蔓結(jié)瓜為主，商品瓜深綠色，瓜條極短，呈圓筒形，瓜刺稀疏白色，瓜長14.5-17.5厘米，寬4.0-4.7厘米；3)全雌基因轉(zhuǎn)育將全雌型黃瓜EC1和雌雄同株型黃瓜627同時進行浸種、催芽、播種、定植及正常的植株管理；在開花期，以EC1為母本，以627為父本，進行雜交得F1，具體操作為在授粉前一天下午，將第二天要開放的EC1的雌花蕾和627的雄花蕾進行套花隔離，開花當天上午8點，將627的雄花花粉授到EC1的雌花柱頭上，3朵雄花授一朵雌花，并繼續(xù)對授粉后的雌花隔離三天；將雜種F1與627黃瓜回交，然后選擇回交后代中的全雌單株繼續(xù)與627黃瓜回交，至回交3代BC3F1；選BC3F1的全雌單株進行硝酸銀誘雄處理，具體操作為當全雌植株長至5-6片真葉時，未出現(xiàn)花蕾或未出現(xiàn)雄花蕾的植株即為全雌型植株，在下午4點左右用濃度為300mg/L的硝酸銀水溶液對莖尖及葉面噴霧，至葉片布滿小水滴為止，每隔三天處理一次，處理二次，然后將該全雌單株進行自交得BC3F2；在BC3F2中繼續(xù)選擇全雌單株進行誘雄，自交得BC3F3；在BC3F3中選擇全雌型的株系，將植株按1∶1誘雄后進行系內(nèi)自交，所收的種子即為全雌型黃瓜新品種美雌09，美雌09植株為全雌型，植株長勢強，節(jié)間長7.5-9.0厘米，莖粗0.55-0.6厘米，葉片深綠色，平均最大葉片面積為21×20.5厘米，第一雌花節(jié)位在6-9節(jié)，以后每節(jié)均有一朵雌花出現(xiàn)，商品瓜極短為圓筒形，瓜色為深綠色，瓜刺稀疏白色，平均瓜長12.5-14.5厘米，粗3.0-3.5厘米，主側(cè)蔓均可結(jié)瓜。2.根據(jù)權利要求l所述的方法，其特征在于全雌單株的選擇標準為全株上下均為雌花，無一朵雄花。3.權利要求1或2所述全雌型黃瓜新品種美雌09用于黃瓜雜交種的選育方法，包括美雌09與普通栽培黃瓜按3:l種植，并進行正常的植株管理，在開花期進行隔離，然后以美雌09為母本，普通栽培黃瓜為父本進行人工授粉或蜜蜂授粉，采收美雌09的成熟果實，待果實后熟后進行剖瓜洗種子，將種子晾曬烘干，即得到高純度的雜種一代種子。全文摘要本發(fā)明涉及全雌美國切片型黃瓜美雌09的培育及其應用，屬于生物技術育種領域。將全雌型歐洲溫室型黃瓜EC1與雌雄同株型美國切片型黃瓜627雜交，所得F1與627回交，在回交后代中選擇全雌單株與雌雄同株型黃瓜親本627連續(xù)回交3代，選擇BC3F1的全雌單株自交，在BC3F2中選擇全雌單株繼續(xù)自交，最后選擇BC3F3均為全雌型植株的株系，把該株系黃瓜混合授粉，獲得生長勢強、優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的全雌美國切片型黃瓜新品種美雌09。將美雌09與普通栽培黃瓜雜交可獲得種子純度高且具有較強雜種優(yōu)勢的全雌型黃瓜品種。文檔編號A01H1/02GK101755671SQ20101001767公開日2010年6月30日申請日期2010年1月12日優(yōu)先權日2010年1月12日發(fā)明者婁群峰,張淑霞,錢春桃,陳勁楓申請人:南京農(nóng)業(yè)大學