專利名稱：：安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及人工栽培養(yǎng)食用菌的主培養(yǎng)基料，特別是指一種安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料的制作方法。
背景技術(shù)：
：目前在食用菌生產(chǎn)中，主要是利用農(nóng)作物秸桿及農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物作為主培養(yǎng)基料，但絕大多數(shù)農(nóng)作物秸桿和農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物如棉桿、棉子殼、稻草、玉米桿等，木質(zhì)素、纖維素含量高，難于被食用菌代謝利用，造成生物轉(zhuǎn)化率低、生產(chǎn)周期長(zhǎng)；另一方面是農(nóng)作物秸桿和農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物中存在較高的農(nóng)藥殘留，給食用菌生產(chǎn)帶來了極大的產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是針對(duì)目前人工栽培食用菌主培養(yǎng)基料在生產(chǎn)前不作脫毒和降解處理，而直接在生產(chǎn)中使用所帶來的農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)及生物轉(zhuǎn)化率低、可降解資源浪費(fèi)嚴(yán)重的問題進(jìn)行創(chuàng)新，利用生物工程技術(shù)對(duì)粗纖維、木質(zhì)素含量高的農(nóng)作物秸桿及農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物進(jìn)行生物酶解和生物降解農(nóng)藥殘留而制作的安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料。本發(fā)明制作方法包括以下步驟(1)選備料選取潔凈、干燥的原料，將原料粉碎處理完后裝入發(fā)酵裝置，然后加入原料重量40-60%的自來水，攪拌均勻。(2)生物酶解高分子物質(zhì)將制備好的復(fù)合粗酶液，按上述原料重量10%的用量加入裝有原料的發(fā)酵裝置中，并攪拌均勻，45。C保溫酶解8-12hrs，經(jīng)檢測(cè)其粗纖維、木質(zhì)素含量在15-20%即可。(3)生物降解農(nóng)藥殘留經(jīng)第(2)步驟生物酶解完畢后，向發(fā)酵裝置中充入蒸汽，當(dāng)料溫升至10(TC時(shí)，保溫45-60mins，后冷凝至35i:，再按原料重量10%加入已制備好的降解農(nóng)藥殘留復(fù)合菌種，在30-35。C保溫發(fā)酵36-48hrs，期間間歇補(bǔ)入無菌氧，使D0》4.5，并不斷攪拌，其轉(zhuǎn)速為120-160轉(zhuǎn)/min。(4)干燥得成品將經(jīng)過第(3)步驟發(fā)酵好的料液取出，置于干燥設(shè)施中于8(TC溫度下，通風(fēng)干燥至含水量低于13%，經(jīng)檢測(cè)合格后即得成品。本發(fā)明復(fù)合粗酶液的制備包括以下步驟(1)菌種制備復(fù)合粗酶液選用的菌種為黃孢原毛平革菌和褐色絲膜菌、糙皮側(cè)耳，其比例為1:1:1。(2)制種用培養(yǎng)基PDB液體培養(yǎng)基，g卩PDA培養(yǎng)基去掉瓊脂粉成份。(3)發(fā)酵用固體培養(yǎng)基a、培養(yǎng)基組成30%棉子殼、30%棉桿、6%谷殼、15%稻草、18.8%麩皮、0.1%酵母膏和0.1%的硫酸銨。b、培養(yǎng)基配置將棉桿、稻草粉碎至2cm左右，再按比例稱取除酵母膏和硫酸銨以外的各成份混合均勻后膨化處理，將膨化后的原料加入其重量50%的自來水，其中醇母膏和硫酸銨成份溶解在水中，攪勻，蒸煮60分鐘。(4)發(fā)酵用菌種制作a、一級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)取各菌種的試管斜面種，按比例挑取l-2環(huán)，接入500ml三角瓶中，其中三角瓶中裝滅菌PDB液100ml，35。C，搖床培養(yǎng)5-7天。b、二級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)5L三角瓶裝1L培養(yǎng)液，滅菌冷卻后按10。/。種量接入一級(jí)搖瓶種子35。C搖床培養(yǎng)3天。c、種子罐種子培養(yǎng)50升種子罐，裝35升PDB培養(yǎng)液，滅菌冷卻后按1(F。種量接入二級(jí)搖瓶種子35'C下，通氣、攪拌，其中通氣量為l:0.3，攪拌轉(zhuǎn)速為160-180轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)48小時(shí)。d、發(fā)酵培養(yǎng)500L發(fā)酵裝置裝PDB培養(yǎng)液350L，滅菌冷卻后，按10%種量接入種子罐種子。35'C下通氣、攪拌培養(yǎng)48小時(shí)即得固體發(fā)酵用菌種，其中通氣量為1:0.3，攪拌轉(zhuǎn)速為160-180轉(zhuǎn)/分。(5)固體發(fā)酵制備復(fù)合酶按(3)配好的固體培養(yǎng)基冷卻至35'C后，按10%種量接入已制備的發(fā)酵用菌種，35'C下培養(yǎng)8-12hrs，期間攪拌，轉(zhuǎn)速120-160轉(zhuǎn)/分，后升溫至38-4(TC下，靜置培養(yǎng)120-140hrs。(6)復(fù)合粗酶液提取發(fā)酵完成后，向發(fā)酵裝置中注入無菌去離子水，其量與發(fā)酵料比為1.5:1，攪拌提取2-3hrs，靜置，取清液即得復(fù)合粗酶液；其中復(fù)合粗酶液中經(jīng)測(cè)定其成分及其組成為木質(zhì)素酶》50%、纖維素酶》25%、半纖維素酶》20%，果膠酶》3%;其中木質(zhì)素酶酶活力單位》1500u/L。本發(fā)明降解農(nóng)藥殘留復(fù)合菌種的制備包括以下步驟(1)復(fù)合菌種及其組成比光合細(xì)菌cds-1:eayf-i:bsyf-2:施氏假單胞菌=2-5:i:i:i:i;(2)復(fù)合菌種生長(zhǎng)培養(yǎng)基復(fù)合菌生長(zhǎng)培養(yǎng)基(g/L)(NH4)2S041.25、CH4C00Na3H203.0、K2HP040.5、C6H1206H202.0、蛋白胨0.5、酵母膏0.2、C6H5Na307H202.0、MgS040.3、NaCl1.0、NaHC031.0、可溶性淀粉6.0、PH7.0-7.5(3)復(fù)合菌種制備a、搖瓶種子培養(yǎng)將各試管保存的液體種，按比例量取接入500ml三角瓶中，其中三角瓶中含已滅菌200ml培養(yǎng)液，總接種量5%，于往復(fù)式搖床上30。C培養(yǎng)3-4天，振蕩頻率為60-80次/分。b、小種子罐種子培養(yǎng)將搖瓶種子按3。/。種量接入到10L小種子罐，其中裝已滅菌7L培養(yǎng)液，攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為80-120轉(zhuǎn)/分，3(TC培養(yǎng)3天。c、發(fā)酵培養(yǎng)將小種子罐種子按5。/。種量接入到500L發(fā)酵罐中攪拌發(fā)酵，其罐中裝已滅菌350L培養(yǎng)液，攪拌，其轉(zhuǎn)速為140-160轉(zhuǎn)/分，3(TC發(fā)酵2天，即得復(fù)合菌種，此復(fù)合菌細(xì)菌總數(shù)》50X108cfu/ml。本發(fā)明所述的原料為農(nóng)作物秸桿及農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物皮、殼、屑、葉中的一種或者至少二種以上的混和物，其中原料粉碎至2cm或者20目。本發(fā)明所述的生物酶解法降解原料中的粗纖維轉(zhuǎn)化為多糖、單糖分子，或其它有機(jī)小分子，其中生物酶為以木質(zhì)素酶、纖維素酶為主的復(fù)合粗酶液。本發(fā)明所述的復(fù)合菌種培養(yǎng)發(fā)酵中所用菌種為光合細(xì)菌、CDS-1、EAYF-1、BSYF-2和施氏假單胞菌，其組成比為3:i:i:i:i。本發(fā)明的主要成份基礎(chǔ)成份總碳》40%粗纖維《20%總糖》20%還原糖》10%農(nóng)藥殘留六六六不得檢出DDT不得檢出多菌靈《0.2ppm敵敵畏不得檢出百菌清《0.3ppm本發(fā)明食用菌主培養(yǎng)基料原料及其組成原料農(nóng)作物秸桿及其農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物(皮、殼、屑、葉等)，如棉桿、棉子殼、玉米桿、稻草等。成份組成單一種或二種以上(含二種)，按任意比例混和。其粗纖維含量》25%。本發(fā)明涉及的主培養(yǎng)基料制作原料為富含木質(zhì)素和纖維素的廢棄農(nóng)作物秸桿及農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物(皮、殼、屑、葉等)。本發(fā)明所制作食用菌的主培養(yǎng)基料中纖維素和木質(zhì)素含量降解為15-20%，總糖含量增加10-25%及以上，特別是還原糖含量增加8-20%及以上，農(nóng)藥殘留可被降解70-95%及以上，其含量低于食用菌國(guó)標(biāo)規(guī)定的最大殘留量。本發(fā)明從食用菌培養(yǎng)基料安全、高效著手，利用生物工程技術(shù)，對(duì)粗纖維、木質(zhì)素含量高的農(nóng)作物秸桿及農(nóng)副產(chǎn)品加工產(chǎn)物(皮、殼、屑、葉等)一方面進(jìn)行生物酶解，提高其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，同時(shí)又對(duì)其進(jìn)行農(nóng)藥殘留生物降解，制作成安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料。既降低食用菌生產(chǎn)成本，提高食用菌生物轉(zhuǎn)化率，又降低食用菌培養(yǎng)基中農(nóng)藥殘留，提高食用菌產(chǎn)品質(zhì)量安全。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)及有益效果1、對(duì)粗纖維、木質(zhì)素含量高的農(nóng)作物秸桿中粗纖維、木質(zhì)素及農(nóng)藥殘留降解效果顯著。發(fā)明人對(duì)岳陽君山2008年收獲的棉桿材料測(cè)定，其中粗纖維平均含量為41.8%。農(nóng)藥殘留中多菌靈為0.85卯m，DDT含量為O.15卯m。通過本發(fā)明工藝處理后，測(cè)定處理后棉桿成份粗纖維、木質(zhì)素含量17.3%，降解率達(dá)58.6%;多菌靈含量0.06卯m，DDT未檢測(cè)出，降解效率達(dá)93%及以上。2、利用本發(fā)明食用菌主培養(yǎng)基料進(jìn)行食用菌生產(chǎn)試驗(yàn)表明能促進(jìn)食用菌生長(zhǎng)，提高生物轉(zhuǎn)化率，增加產(chǎn)量，縮短食用菌生長(zhǎng)周期等。將干稻草40份配棉餅粉3份，用本發(fā)明制作方法制作成雙孢蘑菇主培養(yǎng)基料，與同樣配比不作處理的主培養(yǎng)基料對(duì)比試驗(yàn)試驗(yàn)組產(chǎn)量比對(duì)照組產(chǎn)量提高了21%;收獲提前了13天；對(duì)照組生物轉(zhuǎn)化率為51%，而試驗(yàn)組生物轉(zhuǎn)化率為61.7%。圖l為本發(fā)明工藝流程圖圖2為本發(fā)明生物酶解工藝流程圖圖3為本發(fā)明生物降解農(nóng)藥殘留工藝流程圖具體實(shí)施例方式實(shí)施例以2008年岳陽君山區(qū)良心堡鎮(zhèn)收獲的棉桿和華容縣三封寺鎮(zhèn)的稻草分別按本次發(fā)明制作方法制作成食用菌主培養(yǎng)基料。(1)選備料選取潔凈、干燥的原料棉桿和稻草，將棉桿和稻草粉碎粉碎至2cm左右(如皮、殼、屑、葉等則粉碎至20目)，將粉碎后的原料裝入發(fā)酵裝置，然后加入原料重量50%的自來水，攪拌均勻。(2)生物酶解高分子物質(zhì)將制備好的復(fù)合粗酶液，按上述原料重量10%的用量加入裝有原料棉桿和稻草的發(fā)酵裝置中，并攪拌均勻，45'C保溫酶解10hrs，經(jīng)檢測(cè)其粗纖維、木質(zhì)素含量在18%即可。(3)生物降解農(nóng)藥殘留經(jīng)第(2)步驟生物酶解完畢后，向發(fā)酵裝置中充入蒸汽，當(dāng)料溫升至10(TC時(shí)，保溫50mins，后冷凝至35i:，再按原料重量10%加入已制備好的降解農(nóng)藥殘留復(fù)合菌種，在32'C保溫發(fā)酵40hrs，期間間歇補(bǔ)入無菌氧，使D0》4.5，并不斷攪拌，其轉(zhuǎn)速為140轉(zhuǎn)/min。(4)干燥得成品將經(jīng)過第(3)步驟發(fā)酵好的料液取出，置于干燥設(shè)施中于8(TC溫度下，通風(fēng)干燥至含水量低于13%，經(jīng)檢測(cè)合格后即得成品。其中復(fù)合粗酶液的制備包括以下步驟(1)菌種制備復(fù)合粗酶液選用的菌種為黃孢原毛平革菌和褐色絲膜菌、糙皮側(cè)耳，其比例為1:1:1。(2)制種用培養(yǎng)基PDB液體培養(yǎng)基，g卩PDA培養(yǎng)基去掉瓊脂粉成份。(3)發(fā)酵用固體培養(yǎng)基a、培養(yǎng)基組成30%棉子殼、30%棉桿、6%谷殼、15%稻草、18.8%麩皮、0.1%酵母膏和0.1%的硫酸銨。b、培養(yǎng)基配置將棉桿、稻草粉碎至2cm左右，再按比例稱取除酵母膏和硫酸銨以外的各成份混合均勻9后膨化處理，將膨化后的原料加入其重量50%的自來水，其中醇母膏和硫酸銨成份溶解在水中，攪勻，蒸煮60分鐘。(4)發(fā)酵用菌種制作a、一級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)取各菌種的試管斜面種，按比例挑取2環(huán)，接入500ml三角瓶中，其中三角瓶中裝滅菌PDB液100ml，35。C，搖床培養(yǎng)6天。b、二級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)5L三角瓶裝1L培養(yǎng)液，滅菌冷卻后按10。/。種量接入一級(jí)搖瓶種子35。C搖床培養(yǎng)3天。c、種子罐種子培養(yǎng)50升種子罐，裝35升PDB培養(yǎng)液，滅菌冷卻后按1(F。種量接入二級(jí)搖瓶種子35'C下，通氣、攪拌，其中通氣量為l:0.3，攪拌轉(zhuǎn)速為170轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)48小時(shí)。d、發(fā)酵培養(yǎng)500L發(fā)酵裝置裝PDB培養(yǎng)液350L，滅菌冷卻后，按10%種量接入種子罐種子。35'C下通氣、攪拌培養(yǎng)48小時(shí)即得固體發(fā)酵用菌種，其中通氣量為1:0.3，攪拌轉(zhuǎn)速為170轉(zhuǎn)/分。(5)固體發(fā)酵制備復(fù)合酶按(3)配好的固體培養(yǎng)基冷卻至35'C后，按10%種量接入已制備的發(fā)酵用菌種，35'C下培養(yǎng)10hrs，期間攪拌，轉(zhuǎn)速140轉(zhuǎn)/分，后升溫至39。C下，靜置培養(yǎng)130hrs。(6)復(fù)合粗酶液提取發(fā)酵完成后，向發(fā)酵裝置中注入無菌去離子水，其量與發(fā)酵料比為1.5:1，攪拌提取2hrs，靜置，取清液即得復(fù)合粗酶液；其中復(fù)合粗酶液中經(jīng)測(cè)定其成分及其組成為木質(zhì)素酶》50%、纖維素酶》25%、半纖維素酶》20%，果膠酶》3%;其中木質(zhì)素酶酶活力單位》1500u/L。降解農(nóng)藥殘留復(fù)合菌種的制備包括以下步驟(1)復(fù)合菌種及其組成比光合細(xì)菌cds-1:eayf-i:bsyf-2:施氏假單胞菌=3:i:i:i:i。(2)復(fù)合菌種生長(zhǎng)培養(yǎng)基復(fù)合菌生長(zhǎng)培養(yǎng)基(g/L)(NH4)2S041.25、CH4C00Na3H203.0、K2HP040.5、C6H1206H202.0、蛋白胨0.5、酵母膏0.2、C6H5Na307H202.0、MgS040.3、NaCl1.0、NaHC031.0、可溶性淀粉6.0、PH7.0—7.5。(3)復(fù)合菌種制備a、搖瓶種子培養(yǎng)將各試管保存的液體種，按比例量取接入500ml三角瓶中，其中三角瓶中含已滅菌200ml培養(yǎng)液，總接種量5%，于往復(fù)式搖床上3CTC培養(yǎng)3天，振蕩頻率為70次/分。b、小種子罐種子培養(yǎng)將搖瓶種子按3。/。種量接入到10L小種子罐，其中裝已滅菌7L培養(yǎng)液，攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)/分，3(TC培養(yǎng)3天。c、發(fā)酵培養(yǎng)將小種子罐種子按5。/。種量接入到500L發(fā)酵罐中攪拌發(fā)酵，其罐中裝已滅菌350L培養(yǎng)液，攪拌，其轉(zhuǎn)速為150轉(zhuǎn)/分，3CTC發(fā)酵2天，即得復(fù)合菌種，此復(fù)合菌細(xì)菌總數(shù)》50X108cfu/ml。實(shí)施例說明一食用菌主培養(yǎng)基料制作及成份分析通過對(duì)二種食用菌主培養(yǎng)基料制作前和制作后基礎(chǔ)成份和殘留農(nóng)藥成份檢測(cè)，結(jié)果表明:二種農(nóng)作物秸桿制作前后總碳損失1.5%以內(nèi)，粗纖維降解率均大于55%，總糖增加15%以上，還原糖增加10%以上，農(nóng)藥殘留成份降解率為80-95%及以上，其殘留量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于食用菌國(guó)標(biāo)允許的農(nóng)藥殘留量(見下表)。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實(shí)施例說明二食用菌主培養(yǎng)基料生長(zhǎng)試驗(yàn)試驗(yàn)組將干稻草與棉子餅按40:3比例混合均勻后，按本發(fā)明食用菌主培養(yǎng)基料的制作方法制作成雙孢蘑菇主培養(yǎng)基料。對(duì)照組干稻草與棉籽餅同樣按40:3比例混合，但不作處理。雙孢蘑菇栽培配方干牛糞55%干稻草40%棉子餅3%石膏1%過磷酸鈣1%水(約160%左右)試驗(yàn)組與對(duì)照組栽培結(jié)果如下表所示:<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>從上表數(shù)據(jù)看出，實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組產(chǎn)量提高了21%，生物轉(zhuǎn)化率增加了10.7%，生長(zhǎng)周期縮短13天，農(nóng)殘含量均低于對(duì)照組。本發(fā)明所述的實(shí)施例僅僅是對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式進(jìn)行的描述，并非對(duì)本發(fā)明構(gòu)思和范圍進(jìn)行限定，在不脫離本發(fā)明設(shè)計(jì)思想的前題下，本領(lǐng)域中工程技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作出的各種變型和改進(jìn)，均應(yīng)落入本發(fā)明的保護(hù)范圍，本發(fā)明請(qǐng)求保護(hù)的技術(shù)內(nèi)容，已經(jīng)全部記載在權(quán)利要求書中。權(quán)利要求1.一種安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料的制作方法，其特征在于包括以下步驟(1)選備料選取潔凈、干燥的原料，將原料粉碎處理完后裝入發(fā)酵裝置，然后加入原料重量40-60％的自來水，攪拌均勻；(2)生物酶解高分子物質(zhì)將制備好的復(fù)合粗酶液，按上述原料重量10％的用量加入裝有原料的發(fā)酵裝置中，并攪拌均勻，45℃保溫酶解8-12hrs，經(jīng)檢測(cè)其粗纖維、木質(zhì)素含量在15-20％即可；(3)生物降解農(nóng)藥殘留經(jīng)第(2)步驟生物酶解完畢后，向發(fā)酵裝置中充入蒸汽，當(dāng)料溫升至100℃時(shí)，保溫45-60mins，后冷凝至35℃，再按原料重量10％加入已制備好的降解農(nóng)藥殘留復(fù)合菌種，在30-35℃保溫發(fā)酵36-48hrs，期間間歇補(bǔ)入無菌氧，使DO≥4.5，并不斷攪拌，其轉(zhuǎn)速為120-160轉(zhuǎn)/min；(4)干燥得成品將經(jīng)過第(3)步驟發(fā)酵好的料液取出，置于干燥設(shè)施中于80℃溫度下，通風(fēng)干燥至含水量低于13％，經(jīng)檢測(cè)合格后即得成品。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料的制作方法，其特征在于所述的復(fù)合粗酶液的制備包括以下步驟(1)菌種制備復(fù)合粗酶液選用的菌種為黃孢原毛平革菌和褐色絲膜菌、糙皮側(cè)耳，其比例為1:1:1;(2)制種用培養(yǎng)基PDB液體培養(yǎng)基，S卩PDA培養(yǎng)基去掉瓊脂粉成份；(3)發(fā)酵用固體培養(yǎng)基a、培養(yǎng)基組成30%棉子殼、30%棉桿、6%谷殼、15%稻草、18.8%麩皮、0.1%酵母膏和0.1%的硫酸銨b、培養(yǎng)基配置將棉桿、稻草粉碎至2cm左右，再按比例稱取除酵母膏和硫酸銨以外的各成份混合均勻后膨化處理，將膨化后的原料加入其重量50%的自來水，其中醇母膏和硫酸銨成份溶解在水中，攪勻，蒸煮60分鐘；(4)發(fā)酵用菌種制作a、一級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)取各菌種的試管斜面種，按比例挑取l-2環(huán)，接入500ml三角瓶中，其中三角瓶中裝滅菌PDB液100ml，35。C，搖床培養(yǎng)5-7天；b、二級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)5L三角瓶裝1L培養(yǎng)液，滅菌冷卻后按10。/。種量接入一級(jí)搖瓶種子35。C搖床培養(yǎng)3天；c、種子罐種子培養(yǎng)50升種子罐，裝35升PDB培養(yǎng)液，滅菌冷卻后按1(F。種量接入二級(jí)搖瓶種子35'C下，通氣、攪拌，其中通氣量為l:0.3，攪拌轉(zhuǎn)速為160-180轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)48小時(shí)。d、發(fā)酵培養(yǎng)500L發(fā)酵裝置裝PDB培養(yǎng)液350L，滅菌冷卻后，按10%種量接入種子罐種子。35'C下通氣、攪拌培養(yǎng)48小時(shí)即得固體發(fā)酵用菌種，其中通氣量為1:0.3，攪拌轉(zhuǎn)速為160-180轉(zhuǎn)/分(5)固體發(fā)酵制備復(fù)合酶按(3)配好的固體培養(yǎng)基冷卻至35'C后，按10%種量接入已制備的發(fā)酵用菌種，35°C下培養(yǎng)8-12hrs，期間攪拌，轉(zhuǎn)速120-160轉(zhuǎn)/分，后升溫至38-4(TC下，靜置培養(yǎng)120-140hrs。(6)復(fù)合粗酶液提取發(fā)酵完成后，向發(fā)酵裝置中注入無菌去離子水，其量與發(fā)酵料比為1.5:1，攪拌提取2-3hrs，靜置，取清液即得復(fù)合粗酶液；其中復(fù)合粗酶液中經(jīng)測(cè)定其成分及其組成為木質(zhì)素酶》50%、纖維素酶》25%、半纖維素酶》20%，果膠酶》3%;其中木質(zhì)素酶酶活力單位》1500u/L。3.根據(jù)權(quán)利要求l所述的安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料的制作方法，其特征在于所述的降解農(nóng)藥殘留復(fù)合菌種的制備包括以下步驟(1)復(fù)合菌種及其組成比光合細(xì)菌cds-i:eayf-i:bsyf-2:施氏假單胞菌=2-5:i:i:i:i;(2)復(fù)合菌種生長(zhǎng)培養(yǎng)基復(fù)合菌生長(zhǎng)培養(yǎng)基(g/L)(NH4)2S041.25、CH4C00Na3H203.0、K2HP040.5、C6HL206H202.0、蛋白胨O.5、酵母膏0.2、C6H5Na307H200、MgS040.3、NaCl1.0、NaHC031.0、可溶性淀粉6.0、PH7.0-7.5(3)復(fù)合菌種制備a、搖瓶種子培養(yǎng)將各試管保存的液體種，按比例量取接入500ml三角瓶中，其中三角瓶中含已滅菌200ml培養(yǎng)液，總接種量5%，于往復(fù)式搖床上30。C培養(yǎng)3-4天，振蕩頻率為60-80次/分；b、小種子罐種子培養(yǎng)將搖瓶種子按3。/。種量接入到10L小種子罐，其中裝已滅菌7L培養(yǎng)液，攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為80-120轉(zhuǎn)/分，30。C培養(yǎng)3天；c、發(fā)酵培養(yǎng)將小種子罐種子按5。/。種量接入到500L發(fā)酵罐中攪拌發(fā)酵，其罐中裝已滅菌350L培養(yǎng)液，攪拌，其轉(zhuǎn)速為140-160轉(zhuǎn)/分，3(TC發(fā)酵2天，即得復(fù)合菌種，此復(fù)合菌細(xì)菌總數(shù)》50X108cfu/ml。4.根據(jù)權(quán)利要求l所述的安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料的制作方法，其特征在于所述的原料為農(nóng)作物秸桿及農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物皮、殼、屑、葉中的一種或者至少二種以上的混和物，其中原料粉碎至2cm或者20目。5.根據(jù)權(quán)利要求l所述的安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料的制作方法，其特征在于所述的生物酶解法降解原料中的粗纖維、木質(zhì)素轉(zhuǎn)化為多糖、單糖分子或其它有機(jī)小分子，其中生物酶為以木質(zhì)素酶、纖維素酶為主的復(fù)合粗酶液。6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料的制作方法，其特征在于所述的復(fù)合菌種培養(yǎng)發(fā)酵中所用菌種為光合細(xì)菌、cds-1、eayf-1、bsyf-2和施氏假單胞菌，其組成比為3:i:i:i:i。全文摘要本發(fā)明涉及人工栽培養(yǎng)食用菌的主培養(yǎng)基料，特別是指一種安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料的制作方法。本發(fā)明制作方法包括以下步驟首先選備料，然后經(jīng)過生物酶解高分子物質(zhì)和生物降解農(nóng)藥殘留，最后干燥得成品。本發(fā)明從食用菌培養(yǎng)基料安全、高效著手，利用生物工程技術(shù)，對(duì)粗纖維、木質(zhì)素含量高的農(nóng)作物秸桿及農(nóng)副產(chǎn)品加工產(chǎn)物皮、殼、屑、葉等一方面進(jìn)行生物酶解，提高其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，同時(shí)又對(duì)其進(jìn)行農(nóng)藥殘留生物降解，制作成安全、高效食用菌主培養(yǎng)基料。既降低食用菌生產(chǎn)成本，提高食用菌生物轉(zhuǎn)化率，又降低食用菌培養(yǎng)基中農(nóng)藥殘留，提高食用菌產(chǎn)品質(zhì)量安全。文檔編號(hào)C05F11/00GK101665373SQ20091030786公開日2010年3月10日申請(qǐng)日期2009年9月28日優(yōu)先權(quán)日2009年9月28日發(fā)明者王光文申請(qǐng)人:王光文