專利名稱：一種動物飼料添加劑及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及動物養(yǎng)殖飼料，具體地說是一種動物飼料添加劑的制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著經(jīng)濟發(fā)展和人民生活水平的提高，人類對高營養(yǎng)價值動物蛋白的需求，極大 的刺激了畜牧業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。單純依靠傳統(tǒng)方式提供豆餅粕、魚粉等優(yōu)質(zhì)蛋白已不能 滿足迅猛增長的飼料市場，因此人們常使用菌體蛋白作為替代品來解決蛋白飼料供應(yīng)的不 足。菌體蛋白又稱單細胞蛋白，通常是指通過培養(yǎng)單細胞微生物而獲得的菌體蛋白 質(zhì)，其中蛋白質(zhì)含量高達40% 80%，同時富含多糖、維生素、礦物質(zhì)以及未知促生長因子 等(熊智輝.單細胞蛋白在飼料業(yè)中的研究進展，養(yǎng)殖與飼料，2006，(7)，11-15)。菌體蛋 白具有適口性好、能增強動物免疫力等作用。在我國，關(guān)于開發(fā)和推廣微生物發(fā)酵生產(chǎn)菌體蛋白的研究，較多集中在使用非食 用資源和廢棄資源上。但由于原料來源有限或轉(zhuǎn)化率低，仍然存在生產(chǎn)成本過高等問題。同 時，由于菌體蛋白在應(yīng)用過程中存在核酸含量過高、氨基酸供應(yīng)不平衡，以及含有不易消化 的甘露聚糖等成分，常對動物健康或飼料消化產(chǎn)生副作用，因而極大的限制了其在動物日 糧中的使用量。某些產(chǎn)油微生物，如細菌、酵母菌、霉菌和藻類等，在特定的條件下，能在胞內(nèi)積累 超過其生物總量20% (w/w)的油脂，尤其是在真核微生物中，某些產(chǎn)油種屬能在胞內(nèi)積累 超過其生物總量70% (w/w)以上的油脂，這些油脂主要以脂肪酸甘油三酯的形式存在，其 組成與一般的動植物油脂相似(Ratledge C, Wynn JP. The biochemistry and molecular biology of lipid accumulation in oleaginous microorganisms. Advances in Applied Microbiology，2002，51，1-52)。眾所周知的以獲取多不飽和脂肪酸(PUFAs)為目的的微生 物油脂生產(chǎn)已在日、美和瑞典等國實現(xiàn)了工業(yè)化。近年來微生物油脂發(fā)酵也逐漸成為生物 柴油產(chǎn)業(yè)和生物經(jīng)濟的重要研究方向。由于微生物油脂是胞內(nèi)產(chǎn)物，在獲取油脂時將伴生大量的菌渣。種類繁多的產(chǎn)油 微生物，無論是真核還是原核微生物，提取油脂后的剩余物都是飼用菌體蛋白的潛在來源。 尤其是高產(chǎn)油脂的酵母、霉菌和微藻等，因其油脂含量和生物安全性都較高，近年來備受關(guān) 注。利用這些產(chǎn)油微生物發(fā)酵各種非糧作物(如菊芋、木薯、甘薯等)、農(nóng)林業(yè)廢棄物(如玉 米秸稈)、工業(yè)廢液及廢棄物等生產(chǎn)微生物油脂的研究也越來越多。工業(yè)上常用的油脂提取方法包括壓榨法、浸出法以及超臨界流體萃取法(ZL 03139630. 5)等。同時，為了提高油脂得率，針對不同的生產(chǎn)菌種也常采用不同的前處理方 法，如先將菌體干燥后再進行蒸炒，或預(yù)先進行酶水解(如自溶法或酶解法)、物理破碎(如 研磨、超聲波破碎、微波法、凍融法或凍干法)或化學(xué)法處理(如用酸熱法、脂溶性有機溶劑 或表面活性劑處理)等方法使菌體破壁。這些破壁方法，有些只適用于實驗室少量樣品的油脂提取，有些則因經(jīng)過劇烈的酸熱處理，或添加某些不易除去的化學(xué)試劑，菌體中的營養(yǎng) 成分受到極大破壞，所得的菌渣應(yīng)用價值較低。因此在大規(guī)模油脂提取過程中選擇合適的 油脂提取方法和菌渣后處理方法非常必要，這不但有利于加快微生物油脂及生物柴油等產(chǎn) 業(yè)的工業(yè)化進程，更能促進資源綜合利用，解決菌體蛋白生產(chǎn)原料的供應(yīng)短缺等問題。微生物油脂發(fā)酵菌渣中除了含有少量油脂外，還含有較多的蛋白質(zhì)和細胞壁成 分。通常情況下，壓榨或超臨界流體萃取法得到的菌渣中無溶劑殘留，可以直接作為菌體蛋 白在飼料應(yīng)用。需要注意的是，微生物油脂發(fā)酵菌渣的細胞壁成分，往往在油脂提取過程中 沒有得到有效水解，不易被動物消化吸收，將顯著影響菌渣的使用量及飼喂效果。通常酵母 菌的細胞壁以葡聚糖和(或)甘露聚糖為主，此外還有一些蛋白質(zhì)和脂類；霉菌的細胞壁主 要由幾丁質(zhì)組成；藻類細胞壁主要由纖維素組成，還含有異多糖、脂類和蛋白質(zhì)。一方面，細 胞壁多糖如甘露聚糖、幾丁質(zhì)、纖維素等多糖，除了消化率低以外，還常常對動物產(chǎn)生較多 負面的生理影響；另一方面，酵母菌細胞壁多糖也可作為飼料添加劑，如葡聚糖具有免疫功 能，甘露寡糖也是很好的“病原菌吸附劑”，常被用于在水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料中。綜上所述，采用微 生物油脂發(fā)酵菌渣作飼用菌體蛋白，如果預(yù)先對其進行適度水解，能起到提高動物免疫力 的作用，拓寬其在動物日糧中的使用范圍，顯著改善飼喂效果。微生物油脂提取過程中，需要對細胞壁等成份進行物理、化學(xué)和/或生物化學(xué)處 理，使胞內(nèi)油脂充分釋放，以提高油脂得率；在菌渣回收和脫溶過程中，也可通過調(diào)整工藝 部分脫除或鈍化其中某些抗營養(yǎng)成份。但這些處理方法，對含有較多細胞壁多糖的產(chǎn)油微 生物菌渣不具有很強的針對性和實用性。本發(fā)明提供了一種動物飼料添加劑及其制備方法，即以微生物油脂提取后的剩余 物為原料，通過水解處理后制得。該動物飼料添加劑可作為菌體蛋白或飼料添加劑在飼料 中應(yīng)用，按固體含量計，添加劑用量可為混合飼料總量的0. 20%。本發(fā)明采用的處理 方法條件溫和，針對性強。不但可以降低微生物油脂的生產(chǎn)成本，解決廢棄菌渣對環(huán)境造成 的污染問題，同時也能降低飼料成本，減少飼料中包括豆粕、魚粉以及油脂等高價格營養(yǎng)成 分的使用量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種動物飼料添加劑及其制備方法，即以微生物油脂提取后的剩 余物為原料，通過水解處理后，直接制成總固形物濃度為10% 60% (w/w)的液態(tài)添加劑 成品或在20°C 100°C干燥制得固態(tài)添加劑成品。該添加劑成品作為菌體蛋白或飼料添加 劑在飼料中應(yīng)用，按固體含量計，添加劑用量可為混合飼料總量的0. 20%。本發(fā)明使用的原料來源于發(fā)酵培養(yǎng)后在胞內(nèi)積累油脂超過其生物總量20% (w/ w)的真核或原核微生物。它們包括但不限于，產(chǎn)油細菌，如ArthrcAacter屬、Iihodococcus 屬或 Mycobacterium 屬等；產(chǎn)油酵母菌，如 Candida 屬、Cryptococcus 屬、Hansenula 屬、 Lipomyces 屬、Rhodosporidium 屬、Rhodotorula 屬、Endomyces 屬、Schwanniomye 屬、 Trichosporon 屬、Sporobolomyces 屬，Trigonopsis 屬或 Yarrowia 屬等；產(chǎn)油霉菌， 如 Mortierella 屬、Cunninghamella 屬、Mucor 屬或 Aspergillus 屬等；產(chǎn)油微藻，如 Crypthecodinium 屬、Botryococcus 屬、Chlorella 屬、Nannochloropsis 屬、Haliphthoros 屬或khizochytrium屬等。這些菌株可以直接從包括中國普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)、美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)以及中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心(CICC) 等菌種保藏機構(gòu)購買或從自然界中分離，也可以使用與原來菌株性狀不同的人工或自然突 變菌株。在上述微生物中優(yōu)選生物安全性高、非致病和非產(chǎn)毒的菌株，如已被廣泛用于 生產(chǎn)GLA和ARA的深黃被孢霉Mortierella isabellina或高山被孢霉Mortierella alpina,生產(chǎn)DHA的寇氏隱甲藻Crypthecodinium cohnii或產(chǎn)油小球藻Chlorella protothecoides等，以及產(chǎn)油紅酵母Rhodosporidium toruloides或斯達氏油脂酵母 Lipomyces starkeyi等，或者使用這些菌株的高產(chǎn)突變株，并在飼喂之前進行相應(yīng)的毒性 試驗。本發(fā)明所使用的油脂提取方法，包括壓榨法、超臨界流體萃取法、有機溶劑萃取 法、酸熱法及其它可有效從產(chǎn)油微生物菌體中分離得到油脂的方法，但優(yōu)選采用包括壓榨 法、超臨界流體萃取法和低毒有機溶劑萃取法。本發(fā)明所提供的微生物油脂發(fā)酵菌渣水解處理方法包括酶水解、酸水解或它們的 必要組合，具體水解條件為(1)酶水解將微生物油脂提取后的剩余物與水混合，使總固形物濃度達到 10% 90% (w/w)，添加水解酶至總的酶濃度達到0. 005% 3% (w/w)，在20°C 90°C下 保溫攪拌10分鐘 40小時。(2)酸水解將微生物油脂提取后的剩余物與水混合，使總固形物濃度達到 10% 90% (w/w)，用酸調(diào)節(jié)PH 1.0 5. 0，在20°C 90°C下保溫攪拌10分鐘 M小時， 再用堿中和至pH 5. 5 7. 5。上述微生物油脂發(fā)酵菌渣水解處理方法中所用的水解酶為葡聚糖酶、甘露聚糖 酶、葡甘露聚糖酶、纖維素酶、蝸牛酶或幾丁質(zhì)酶中的一種或它們的組合，所用的酸為無機 酸或有機酸；所用的堿為無機堿或有機堿。微生物油脂發(fā)酵菌渣按上述方法水解處理后，直接制成總固形物濃度為10% 60% (w/w)的液態(tài)添加劑成品或在20°C 100°C干燥制得固態(tài)添加劑成品。該添加劑成品 可作為菌體蛋白或飼料添加劑在飼料中應(yīng)用，按固體含量計，添加劑用量可為混合飼料總 量的0. 20%。本發(fā)明的有益效果是1)與傳統(tǒng)的菌體蛋白飼料相比，本發(fā)明的微生物油脂發(fā)酵 菌渣，經(jīng)過酶或酸水解，有效降低了菌渣中的粗纖維含量，更有利于動物吸收利用；幻本發(fā) 明的微生物油脂發(fā)酵菌渣中除了富含蛋白質(zhì)、易消化吸收的糖類外，還含有一定量的油脂， 可減少飼料中的油脂添加量，兼顧飼料配方中能量和蛋白質(zhì)的平衡，降低了飼料成本；3) 本發(fā)明的某些微生物油脂發(fā)酵菌渣中還含有一定量的多不飽和脂肪酸，礦物質(zhì)、色素等物 質(zhì)，有助于提高動物的免疫力；4)本發(fā)明的微生物油脂發(fā)酵菌渣可有效降低微生物油脂的 生產(chǎn)成本，減少廢棄菌渣造成的環(huán)境污染，促進資源綜合利用?？傊?，本發(fā)明的制備工藝簡 單，生產(chǎn)原料來源廣，設(shè)備投資少，容易推廣，有利于實現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式以下實施例選取了一些典型的產(chǎn)油微生物菌株，說明了提取油脂后的剩余物制成 動物飼料添加劑的方法及其應(yīng)用效果，這將有助于了解本專利，但不以任何形式限制應(yīng)用其它產(chǎn)油微生物材料實施本專利發(fā)明。實施例1采用擲孢酵母Sporobolomyces reseus AS 2. 618 (菌株來源于中國普通微生物菌 種保藏管理中心，CGMCC)為菌種，采用文獻(熊望賢，楊濤，劉光燁.“擲孢酵母發(fā)酵紅薯 淀粉酶水解液產(chǎn)油脂的發(fā)酵條件”應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報，2008,14 ) =558-561)所述的最 佳培養(yǎng)基和最適發(fā)酵條件培養(yǎng)菌體，培養(yǎng)至發(fā)酵液中還原糖濃度降低到1 %以下時結(jié)束，收 集菌體，干燥后得含油量為40%的干菌體380g。保持溫度為35°C，壓力為50MPa，將干菌體 在榨油機中壓榨5 6小時，再將濾餅進行復(fù)榨，共榨取毛油110g，回收固體菌渣^Og。將 壓榨后的菌渣中加入水調(diào)節(jié)到總固形物濃度為10%，添加按1 1重量比例混合的甘露聚 糖酶和葡聚糖酶，至混合液總酶重量濃度為1%，37°C保溫攪拌40小時。在80°C下干燥，粉 碎得固態(tài)動物飼料添加劑成品275g。該成品為褐色粉末，帶脂香味，含粗脂肪12%，粗蛋白 32 %，粗纖維5 %，灰分5 %，水分9 %。實施例2采用圓紅冬孢酵母Rhodosporidium toruloides AS 2. 1389 (菌種來源于 CGMCC) 為菌種，按照文獻(華艷艷，趙鑫，趙金，張素芳，趙宗保.圓紅冬孢酵母發(fā)酵菊芋塊莖產(chǎn)油 脂的研究，中國生物工程雜志，2007，27 (10) :59-63.)所述的方法，收集發(fā)酵白皮菊芋清液 所獲得的菌體，干燥后可得到含油量為62%的干菌體585g。在研磨機中將干菌體磨成粉 末，按IOOg菌粉加入0. 2L正己烷萃取5小時，固液分離，再加入正己烷重復(fù)萃取兩次。合 并正己烷層去除溶劑后共提取毛油330g，按文獻(何東平，陳濤主編.微生物油脂學(xué)，北 京化學(xué)工業(yè)出版社，2005. 12)所述方法進行脫溶處理，回收固體菌渣255g。將前述菌渣 與適量水混合調(diào)節(jié)到總固形物濃度為90%，用硫酸調(diào)節(jié)pH值為1. 5，在90°C保溫攪拌20 分鐘，冷卻到室溫，用氫氧化鈉溶液中和至PH 5. 5 6. O。繼續(xù)添加水，調(diào)節(jié)到總固形物濃 度為30%，得液態(tài)動物飼料添加劑成品850mL。該成品為褐色懸濁液，略帶香味，含粗脂肪 3.3%，粗蛋白10%，粗纖維2%，灰分1.3%。實施例3采用粘紅酵母Rhodotorula glutinis AS 2. 703 (菌株來源于CGMCC)為菌種，參 照“微生物處理工業(yè)廢棄物的方法和發(fā)酵生產(chǎn)微生物油脂的方法及其專用菌株(專利申請 號200710179996) ”所公開的菌體培養(yǎng)方法，收集利用淀粉廢水培養(yǎng)獲得的菌體細胞，干燥 后得到含油量為35%的干菌體300g。參照“微生物油脂的超臨界二氧化碳萃取的提取方 法(專利號ZL03139630. 5) ”所公開的油脂提取方法，在體積為IL的萃取釜中，萃取壓力為 15MPa，萃取溫度為45°C，解析壓力為5MPa，解析溫度為35°C，達到萃取壓力后總萃取時間 為8 10小時。從解析釜中共萃取毛油95g，剩余菌渣加入水調(diào)節(jié)至總固形物濃度為40%， 添加葡甘露聚糖酶至混合液中總酶濃度為2. 5%，50°C保溫攪拌1小時，得菌渣水解液，在 70°C下干燥，粉碎得固態(tài)動物飼料添加劑成品210g。該成品為粉紅色粉末，帶脂香味，含粗 脂肪3%，粗蛋白32%，粗纖維5%，灰分6%，水分6%。實施例4采用深黃被孢霉Mortierella isabellina AS 3. 3410 (菌株來源于CGMCC)為菌 種，以葡萄糖為發(fā)酵原料，參照ZL 00116051. 6公開的菌體培養(yǎng)和油脂提取方法，將孢子接 種于裝有120L料的種子罐中培養(yǎng)45小時后全部移入1200L的發(fā)酵罐中，培養(yǎng)96小時，在還原糖降低到以下時放罐。采用平板干燥機在80°C下干燥，得到含油量為55%的干菌 絲體50kg。在榨油機中用間接蒸汽在105°C下對干菌體蒸炒20min后壓榨3 4小時，得 到毛油2^g，剩余菌渣24. 5kgo剩余菌渣加入水調(diào)節(jié)至總固形物濃度為30%，添加幾丁質(zhì) 酶至總酶濃度為0. 3%，60°C保溫攪拌10小時，得菌渣水解液，在80°C下干燥，粉碎得固態(tài) 動物飼料添加劑成品26. 5kgo該成品為黃褐色粉末，略帶香味，含粗脂肪6%，粗蛋白22%， 粗纖維11%，粗灰分7 %，水分9 %。實施例5采用高山被孢霉Mortieralla Alpina ATCC 32222 (菌株來源于美國典型培養(yǎng)物 保藏中心，ATCC)為菌種，參照實施例1所述的菌體培養(yǎng)方法，可得到含油量為37%的干菌 絲體34kg。油脂提取方法同實施例1，共榨取毛油11kg。將壓榨后的菌餅中加入水至總固 形物濃度為60%，并添加幾丁質(zhì)酶至酶濃度為0. 005%，20 保溫攪拌10分鐘；再加入水稀 釋至總固形物濃度達到10%，用乙酸調(diào)節(jié)pH 4. 0，20°C保溫攪拌1小時，再用氫氧化鈉溶液 中和至pH 7. 0，得菌渣水解液，在80°C下干燥，粉碎得固態(tài)動物飼料添加劑成品Mkg。該成 品為褐色粉末，帶脂香味，含粗脂肪5 %，粗蛋白30 %，粗纖維8 %，灰分4 %，水分9 %。實施例6采用布朗葡萄藻Botryococcus braunii LB572 (菌株來源于美國德克薩斯大 學(xué)菌種保藏中心)為菌種，參照文獻(Xu H, Miao XL, Wu QY. High quality biodiesel production from a microalga Chlorella protothecoides by heterotrophic growth in fermenters. J Biotechnol, 2006,126 (4) :499-507.)所述培養(yǎng)基和發(fā)酵條件，以葡萄糖 為原料，添加甘氨酸，培養(yǎng)至發(fā)酵液中還原糖濃度降低至1 %以下時結(jié)束，得到細胞干重為 60g/L (含油量55% )的發(fā)酵液10L，收集菌體，油脂提取方法同實施例3，共提取毛油290g， 剩余藻渣305g，將藻渣與水混合，至總固形物濃度為40%，添加纖維素酶至酶濃度為3%， 60°C保溫攪拌12小時。將前述水解液用水稀釋至總固形物濃度為10%，得液態(tài)動物飼料添 加劑成品3. 0L。該成品為深綠色懸濁液，略帶香味，含粗脂肪1. 2%，粗蛋白3. 5%，粗纖維 0. 7%，灰分 0. 4%。實施例7采用寇氏隱甲藻Crypthecodinium cohnii ATCC 30772 (菌株來源于ATCC)為菌 種，以葡萄糖為主要原料，參照CN 1986822A公開的海藻細胞培養(yǎng)方法，接種量為10%，保 持罐溫25°C，罐壓0. 09kPa，攪拌速率150rpm，發(fā)酵120小時。在還原糖降低到0. 5%以下 時放罐。發(fā)酵液經(jīng)濃縮后，得到細胞干重為53g/L(含油量為42%)的發(fā)酵液60L。加入與 濃縮發(fā)酵液體積等量的氯仿，在25°C下攪拌浸提3小時，沉降分離。取下層氯仿層，蒸發(fā)溶 劑后得到毛油1. Ikgo收集上層，離心處理，得到濕藻渣按實施例2的方法脫溶處理，干燥后 得到藻渣2. Skgo將藻渣與水混合至總固形物濃度為50%，用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值為5. 0，加入 纖維素酶至其濃度為0. 03%和蝸牛酶至其濃度為0. 1%，在50°C，保溫攪拌3小時，再用氨 水溶液中和至PH 7.0，在60°C下干燥，粉碎得固態(tài)動物飼料添加劑成品2. ^cg。該成品為褐 色粉末，略帶香味，含粗脂肪7 %，粗蛋白25 %，粗纖維6 %，灰分3 %，水分9 %。實施例8采用圓紅冬孢酵母Rhodosporidium toruloides AS 2. 1389 (菌種來源于 CGMCC) 為菌種，按照文獻(華艷艷，趙鑫，趙金，張素芳，趙宗保.圓紅冬孢酵母發(fā)酵菊芋塊莖產(chǎn)油脂的研究，中國生物工程雜志，2007,27(10) :59-63.)所述的方法，收集發(fā)酵白皮菊芋清液 所獲得的菌體，干燥后可得到含油量為62 %的干菌體585g。在研磨機中將干菌體磨成粉 末，按IOOg菌粉加入0. 2L正己烷萃取5小時，固液分離，再加入正己烷重復(fù)萃取兩次。合 并正己烷層去除溶劑后共提取毛油330g，按文獻(何東平，陳濤主編.微生物油脂學(xué)，北京 化學(xué)工業(yè)出版社，2005. 1 所述方法進行脫溶處理，回收固體菌渣255g。將前述菌渣與適 量水混合調(diào)節(jié)到總固形物濃度為90%，用醋酸調(diào)節(jié)pH值為2. 0，在90°C保溫攪拌40分鐘， 冷卻到室溫，用碳酸鈉溶液中和至PH 6.0。繼續(xù)添加水，調(diào)節(jié)到總固形物濃度為60%，得液 態(tài)動物飼料添加劑成品430mL。該成品為褐色粘稠液，略帶香味，含粗脂肪6. 5%，粗蛋白 20%，粗纖維4。1%，灰分2. 7%。以下實施例選取了上述實施例中代表性的動物飼料添加劑成品，添加到動物飼料 中，用于飼喂雞、豬、奶?；螋~等動物，這將有助于進一步了解本專利，但不以任何形式限制 本發(fā)明動物飼料添加劑成品及其添加方式在其它禽、畜或水產(chǎn)動物飼料中應(yīng)用。應(yīng)用例1在肉雞飼料中的應(yīng)用實施例1制備的固態(tài)動物飼料添加劑成品，預(yù)先經(jīng)急性毒性試驗，7天喂養(yǎng)試驗和 致突變試驗，其結(jié)果為無毒產(chǎn)品，無明顯的突變作用，可部分代替豆粕、進口魚粉以及植物 油作為蛋白飼料在肉雞飼料中應(yīng)用。實驗組飼料配方玉米粉55. 3%，豆粕，固態(tài)動物飼料添加劑成品15%，油 脂1.2%，賴氨酸0. 14%，蛋氨酸0. 12%，維生素0.01%，磷酸鈣1. 0 %，食鹽0. 3 %，石粉 0. 93%。營養(yǎng)水平粗蛋白20. 2%，賴氨酸1.08%，蛋氨酸0.41%，鈣0.61%，磷0.78%， 代謝能12. 12兆焦/千克。對照組飼料配方大連華成肉雞用濃縮飼料35%，玉米粉65%。試驗用雞為愛拔益加(Arbor Acres)肉雞3周齡，實驗組和對照組各200只，隨機 分組，飼養(yǎng)條件和管理條件相同，8周齡出欄。飼喂結(jié)果如下實驗組平均末重3. 27千克/只，料肉比1. 83 1 ；對照組平均末 重3. 02千克/只，料肉比1.91 1。應(yīng)用例2在生長育肥豬飼料中的應(yīng)用實施例5制備的動物飼料添加劑成品，經(jīng)急性毒性試驗，7天喂養(yǎng)試驗和致突變試 驗，其結(jié)果為無毒產(chǎn)品，無明顯的突變作用，可部分代替豆粕、進口魚粉以及植物油作為蛋 白飼料在生長肥豬飼料中的應(yīng)用。實驗組飼料配方玉米粉60%，麩皮14%，豆餅4%，動物飼料添加劑成品20%，貝 殼粉0. 70%，骨粉0. 82%，賴氨酸0.23%，食鹽0. 25%。營養(yǎng)水平參考值粗蛋白15. 09%，賴氨酸0.74%，蛋氨酸+胱氨酸0.42%，鈣 0. 6 %，磷0. 5 %，食鹽0.25%，消化能13. 86兆焦/千克。對照組飼料配方華成838濃縮豬飼料20 %，玉米粉75 %，麩皮5 %。試驗用豬為杜長達三元雜交種，平均始重沈.6千克/頭，實驗組和對照組各80 頭，隨機分組，同樣條件飼養(yǎng)100天。飼喂結(jié)果如下實驗組平均末重108. 5千克/頭，料肉比3. 42 1，對照組平均末 重103. 5千克/頭，料肉比3. 68 1。
應(yīng)用例3在魚類飼料中的應(yīng)用按實施例7方法制備的固態(tài)動物飼料添加劑成品，經(jīng)急性毒性試驗，7天喂養(yǎng)試驗 和致突變試驗，其結(jié)果為無毒產(chǎn)品，無明顯的突變作用，可作為蛋白飼料添加劑在魚類飼料 中應(yīng)用。對照組飼料配方豆粕25 %，魚粉3 %，麩皮62 %，次粉10 %。實驗組飼料配方在對照組飼料配方基礎(chǔ)上，添加按實施例7方法制備的固態(tài)動 物飼料添加劑成品，用量為5%。實驗組飼料營養(yǎng)水平粗蛋白34. 1 %，粗脂肪5.9%，粗纖維7.6%，粗灰分6.2%， 可溶性鹽1.5%。對照組飼料營養(yǎng)水平粗蛋白32. 3 %，粗脂肪5.3%，粗纖維7.2%，粗灰分6.0%， 可溶性鹽1.4%。試驗用網(wǎng)箱養(yǎng)魚，放養(yǎng)時實驗組和對照組均為總重200kg，平均尾重95g。收獲時， 實驗組總重901kg，平均尾重450g，對照組總重850kg，平均尾重437g。由此可見，在混合飼 料中添加5%的固態(tài)動物飼料添加劑成品作為飼料添加劑飼喂魚類，增產(chǎn)效果達6%，魚苗 死亡率明顯降低。應(yīng)用例4在奶牛飼料中的應(yīng)用按實施例2方法制備的液態(tài)動物飼料添加劑成品，經(jīng)急性毒性試驗，7天喂養(yǎng)試驗 和致突變試驗，其結(jié)果為無毒產(chǎn)品，無明顯的突變作用?？勺鳛轱暳咸砑觿┰谀膛ｏ暳现袘?yīng)用。試驗用奶牛為中國荷斯坦奶牛80頭，體況正常，產(chǎn)奶量及產(chǎn)奶期接近，隨機分為 兩組，一組為實驗組(40頭)，另一組為對照組(40頭)。實驗組與對照組的不同之處在于， 將液態(tài)動物飼料添加劑成品噴灑在每天投喂混合飼料的表面，用量占每次投喂混合飼料總 量的0. 8士0. 1 %，試驗期30天，每天擠奶三次，記錄產(chǎn)奶量。利用DHI系統(tǒng)，每隔7天采集 奶樣1次，測定牛乳成分。飼喂結(jié)果及牛乳成分測定結(jié)果如下實驗組奶牛共產(chǎn)奶45690kg，對照組奶牛共 產(chǎn)奶427Mkg，實驗組的乳脂率和乳蛋白率分別為3. 5士0. 1和2. 9士0. 2，對照組的乳脂率 和乳蛋白率3. 2士0. 1和2. 5士0. 2。表明使用本發(fā)明的液態(tài)動物飼料添加劑成品飼喂奶牛， 對提高牛乳中的脂肪和蛋白含量均有較好的促進作用。
權(quán)利要求
1.一種動物飼料添加劑，其特征在于其主要成分為微生物油脂提取后的固體剩余 物，即微生物油脂發(fā)酵菌渣。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動物飼料添加劑，其特征在于所述微生物油脂發(fā)酵菌渣最 好通過水解處理，得添加劑產(chǎn)品，提高其生物利用度。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的動物飼料添加劑，其特征還在于所述水解處理方式為酶水 解、酸水解或它們的組合，具體水解條件為(1)酶水解將微生物油脂發(fā)酵菌渣與水混合，使其總固形物濃度達到10% 90%(w/ w)，添加水解酶至總的酶濃度達到0. 005% 3% (w/w)，在20°C 90°C下保溫10分鐘 40小時；(2)酸水解將微生物油脂發(fā)酵菌渣與水混合，使其總固形物濃度達到10% 90%(w/ w)，用酸調(diào)節(jié)pH 1.0 5. 0，在20°C 90°C下保溫10分鐘 M小時，再用堿中和至pH 5 · 5 “ rJ · 5 ο
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的動物飼料添加劑，其特征還在于所述水解酶為葡聚糖酶、甘 露聚糖酶、葡甘露聚糖酶、纖維素酶、蝸牛酶或幾丁質(zhì)酶中的一種或多種的組合；所用的酸 為無機酸或有機酸；所用的堿為無機堿或有機堿。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的動物飼料添加劑，其特征還在于所述微生物油脂發(fā)酵菌渣 經(jīng)水解處理后，直接制成總固形物濃度為10% 60% (w/w)的液態(tài)添加劑成品或在20°C 100°C干燥制得固態(tài)添加劑成品。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的動物飼料添加劑，其特征還在于所述微生物為在胞內(nèi) 積累油脂超過其生物總量20% (w/w)的真核或原核微生物。
7.—種權(quán)利要求1所述的動物飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在于所述添加劑作為菌體 蛋白用于動物養(yǎng)殖飼料中，按固體含量計，添加劑用量可為混合后飼料總重量的0. 20%。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種動物飼料添加劑及其應(yīng)用，具體的講是以微生物油脂提取后的剩余物為原料，經(jīng)過水解處理制得。該添加劑富含蛋白質(zhì)，同時含有一定量的油脂和粗纖維，是一種營養(yǎng)豐富的蛋白質(zhì)飼料。該動物飼料添加劑制備工藝簡單，生產(chǎn)原料來源廣，有利于實現(xiàn)大規(guī)模化生產(chǎn)，解決了微生物油脂提取后的剩余物粗纖維含量過高不利于動物消化吸收的問題，同時也降低了微生物油脂的生產(chǎn)成本，減少廢料造成的環(huán)境污染，促進資源綜合利用。
文檔編號A23K1/16GK102058018SQ20091021997
公開日2011年5月18日 申請日期2009年11月18日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月18日
發(fā)明者華艷艷, 趙宗保 申請人:中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所