專利名稱：：夏至草開發(fā)的植物源殺蟲劑及其制備方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及夏至草開發(fā)的植物源殺蟲劑及其制備方法，屬于植物源農藥
技術領域：
，專用于夏至草開發(fā)為植物源殺蟲劑。
背景技術：
：隨著環(huán)境保護呼聲的日益提高，高毒性農藥的大量使用對農業(yè)生產(chǎn)及生態(tài)環(huán)境造成的負面影響己引起世界范圍的廣泛關注。為了保護人類生存的環(huán)境和農業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，農藥的研制與使用將嚴格受到環(huán)境和生態(tài)的制約，植物源農藥因其具有無公害、作用方式獨特、與環(huán)境兼容性好以及開發(fā)費用低等優(yōu)點，所以利用中國豐富的植物資源開發(fā)研究新農藥一直是我國農藥化學及農藥毒理學研究的熱點。夏至草，又稱燈籠棵、白花夏枯草，為唇形科一年生草本植物。廣泛分布于我國南北各省，生于溝邊路旁、田埂或農舍附近，高15-35cm，莖直立方柱形分支，被倒生細毛。葉對生有長柄，被細毛，葉片輪廓近圓形，直徑1.5-2cm，掌狀3深裂，裂片有2深裂或有鈍裂齒，兩面均密生細毛，下面葉脈凸起。春夏開花，輪傘花序腋生，有花6-10朵，無?；蛴卸坦＃ㄆ?-4月，果期5-6月。夏至草適應性強，各種環(huán)境都適宜生長，全國分布廣泛，資源豐富，原料易得，產(chǎn)量穩(wěn)定，具有很好的產(chǎn)業(yè)化前景。夏至草在醫(yī)學中研究的較多，主要用于婦科藥的輛制。目前在農藥領域，研究夏至草殺蟲活性未見報道，本發(fā)明提供了一種提取并分離純化夏至草殺蟲有效成分的方法。
發(fā)明內容技術問題本研究的目的一是提供一種安全、經(jīng)濟且無公害的天然植物源殺蟲劑及其制備方法，二是開發(fā)利用夏至草這一植物資源。技術方案夏至草開發(fā)的植物源殺蟲劑，其特征在于，該植物源殺蟲劑是通過以下方法制備而成(1)粉碎夏至草洗凈后陰干，烘干粉碎后過40目篩，獲得夏至草干粉；(2)提取稱量制備好的干粉，配以質量10倍左右的石油醚、苯、三氯甲烷、乙酸乙酉旨、丙酮、乙醇作為提取溶劑進行提取，得各溶劑粗提取液；(3)濃縮利用活性跟蹤確定最佳提取溶劑，然后將最佳溶劑提取液在旋轉蒸發(fā)器內減壓濃縮至稠膏狀，獲得膏狀提取物；(4)萃取將膏狀提取物用IO倍水熱溶，然后用極性不同的有機溶劑石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯進行萃取，得極性不同的浸膏，再利用活性跟蹤確定最佳萃取溶劑。將最佳萃取物用適量丙酮溶解即獲得所需濃度的植物源殺蟲劑。上述制備方法中最佳提取溶劑為乙醇；最佳萃取溶劑為石油醚。有益效果本發(fā)明所提供的夏至草開發(fā)的植物源殺蟲劑及其制備方法與現(xiàn)有方法相比，具有以下優(yōu)點；(1)以分布規(guī)模大的夏至草為原料，原料來源廣，價格低廉，生產(chǎn)成本低，生產(chǎn)工藝簡單，適合于各種規(guī)模生產(chǎn)。(2)殺蟲綜合效果好。實驗證明，本藥劑對小菜蛾、棉蚜均有理想的防治效果。(3)制備方法簡單易行，提取純度較高(4)生產(chǎn)中無環(huán)境污染，低殘留，對作物無害，對人畜安全，是一種無公害植物源殺蟲劑，可用于有機食品的生產(chǎn)。(5)充分開發(fā)了分布廣的夏至草這一植物資源。具體實施例方式采用冷浸法提取、旋轉蒸發(fā)濃縮、液液萃取。(1)原料處理采集新鮮的夏至草，洗凈后陰干并放至恒溫烘箱內于5(TC下烘至材料發(fā)脆，用多功能粉碎機將其粉碎，并通過40目篩制成干粉，密封于塑料袋中備用；(2)提取準確稱取干粉20g或根據(jù)需要稱取，分別用石油醚、苯、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇等6種極性不同的溶劑于25r下浸泡4一5d/次，連續(xù)浸提3次，合并3次濾液備用；(3)濃縮將提取液在旋轉蒸發(fā)器內減壓濃縮至稠膏狀，獲得膏狀提取物，按lg干粉/mL濃度將各提取物用丙酮稀釋，得不同溶劑粗提液，置于4t:冰箱中保存?zhèn)溆?，測定殺蟲生物活性；(4)萃取通過殺蟲生物測定選定好最佳提取溶劑后，用該溶劑用上述方法大量提取，得最佳溶劑提取物浸膏，將此干樣加入10倍量的蒸餾水，熱溶，裝入分液漏斗中，采用液一液分配法，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯各萃取3次。最后將這些萃取液和剩余水溶液減壓濃縮至稠膏狀，并稱重，得極性不同的浸膏。將最佳萃取物用適量丙酮溶解即得所需濃度的植物源殺蟲劑。選擇最佳提取溶劑的實施例見實施例1、2、3;選擇最佳萃取溶劑的實施例見實施例4。實施例l各粗提液對小菜蛾試蟲的觸殺作用甘藍葉適量放入養(yǎng)蟲盒中，取2齡小菜蛾試蟲30頭，置于浸蟲罩中，分別浸入極性不同的溶劑粗提液中，6秒后取出，蟲體晾干后置于甘藍葉上飼喂，分別用試蟲浸入對應濃度的丙酮水溶液中作為對照，重復3次，記錄24、48小時試蟲死亡率。由結果(見表1)可得6種溶劑提取液中，石油醚、苯、三氯甲烷提取液殺蟲活性較差，均在10%以下，而丙酮、乙醇、乙酸乙酯提取液活性較好，尤以乙醇提取液最好，48h試蟲死亡率達到86.7%。表l不同溶劑粗提液(333mg干粉/mL)對小菜蛾的觸殺作用<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實施例2各粗提液對小菜蛾試蟲的拒食作用用打孔器將新鮮的甘藍葉片打成直徑為3厘米的葉碟，再放入lOOmg/mL供試提取樣品的丙酮溶液中浸8秒即取出，待葉碟晾干后，將其放入直徑9厘米的培養(yǎng)皿中(內墊濾紙，加少量蒸餾水保濕)，每個培養(yǎng)皿放入3片處理葉碟(對照為5片)，接入2頭饑餓2小時的2齡小菜蛾試蟲。每處理重復10次，24、48小時用方格紙測算葉碟面積，計算拒食率(％)。由結果可以分析得出，在供試濃度下各提取液對小菜蛾的拒食活性均不高，但丙酮、乙醇粗提液48h拒食率仍達到60%以上。表2不同溶劑提取液對小菜蛾的拒食作用(%)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實施例3各粗提液對蚜蟲的觸殺作用采用載蜒葉片浸漬法。于溫室用營養(yǎng)液培育棉苗，每杯兩株，于子葉期每株接無翅成蚵數(shù)頭，待兩真葉期自然繁殖近百頭，剔除小齡若蚜，僅剩3齡若蚜及無翅成蚜，將供試提取液用0.1%十二烷基硫酸鈉水溶液(該溶液對提取物有乳化作用)稀釋成不同濃度，取出棉苗在藥液中浸蘸5秒鐘，用吸水紙吸去葉緣多余藥液，立即計數(shù)莖葉上的蚜蟲數(shù)為處理前蟲口基數(shù)，每杯為一重復，每處理重復3次，以用0.1%十二烷基硫酸鈉水溶液稀釋后的丙酮溶液為對照，于處理后24、48h記錄存活蚜蟲數(shù)，計算蚜蟲死亡率(％)。各溶劑粗提液對棉蚜均有很好的觸殺效果(結果見表3)。丙酮、乙醇粗提液在50mg/mL濃度下，蚜蟲48h死亡率均在8(m以上，但乙醇粗提液活性稍好于丙酮提取液。表36種溶劑提取液對蚜蟲的觸殺作用<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實施例4各萃取液對小菜蛾的觸殺作用通過以上實驗選擇出夏至草最佳提取溶劑為乙醇后，用乙醇大量提取有效成分，然后采用液液分配法對有效成分進行分離純化，得三:種溶劑萃取物，小菜蛾觸殺活性測定方法同上。由表4可以看出，夏至草有效成分最佳萃取溶劑為石油醚。各萃取物在低濃度(12.5mg/mL)時，石油醚萃取液活性明顯高于另兩種萃取液，而當濃度達到25、50mg/mL時，石油醚和三氯甲烷萃取物活性明顯高于乙酸乙酯萃取物。表4不同溶劑萃取物對小菜蛾的觸殺作用<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>綜合表明夏至草干粉乙醇粗提液對小菜蛾、棉蚜均具有很好的觸殺活性，對小菜蛾還有較好的拒食作用，其次為丙酮、乙酸乙酯粗提液；在進一步分離純化活性成分過程中，最佳萃取溶劑為石油醚，濃度在50mg/mL時小菜蛾死亡率即可達到96.7%。權利要求1、夏至草開發(fā)的植物源殺蟲劑及其制備方法，其特征在于，該植物源殺蟲劑是通過如下方法制備而成(1)粉碎夏至草洗凈后陰干，烘干粉碎后過40目篩，獲得夏至草干粉；(2)提取稱量制備好的干粉，配以質量為10倍的石油醚、苯、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇作為提取溶劑進行提取，得提取液；(3)濃縮將提取液在旋轉蒸發(fā)器內減壓濃縮至稠膏狀，獲得膏狀提取物；(4)萃取浸膏用10倍水熱溶，采用液-液分配法選用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯進行萃取，得極性不同的浸膏；(5)稱取浸膏用丙酮溶解，即可配成所需濃度的植物源殺蟲劑。2、根據(jù)權利要求1所述夏至草開發(fā)的植物源殺蟲劑，其特征在于，干粉原料可以選用單獨的夏至草根、夏至草莖或夏至草葉片，也可選擇夏至草全株。3、根據(jù)權利要求1所述夏至草開發(fā)的植物源殺蟲劑，其特征在于，制備方法中最佳提取溶劑為乙醇。4、根據(jù)權利要求1所述夏至草開發(fā)的植物源殺蟲劑，其特征在于，制備方法中最佳萃取溶劑為石油醚。全文摘要本發(fā)明提供了一種以夏至草為資源開發(fā)的植物源殺蟲劑及其制備方法，以夏至草根、莖、葉或全株為原料，陰干粉碎并烘干后獲得夏至草干粉，配以質量為10倍的乙醇作為提取溶劑提取，減壓濃縮干燥后獲得提取物干樣，用極性不同的溶劑石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯進行萃取，選取石油醚萃取浸膏用丙酮溶解，即可配成所需濃度的植物源殺蟲劑。由此構筑的本發(fā)明原料來源廣，生產(chǎn)成本低，殺蟲綜合防治效果好，生產(chǎn)中無環(huán)境污染，低殘留，對作物無害，對人畜安全，是一種無公害植物源殺蟲劑。文檔編號A01P7/04GK101336643SQ200810013808公開日2009年1月7日申請日期2008年1月4日優(yōu)先權日2008年1月4日發(fā)明者佳張,張宏軍,美李,高興祥,高宗軍申請人:山東省農業(yè)科學院植物保護研究所