專利名稱：：一種高效生物酶微生態(tài)復(fù)合飼料添加劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種復(fù)合飼料添加劑，尤其涉及一種含有NSP酶系與功能寡糖微生態(tài)制劑的高效生物酶微生態(tài)飼料添加劑。技術(shù)背景隨著生物工程技術(shù)的進步，生物酶制劑在飼料添加劑領(lǐng)域已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用，包括有單一酶制劑與復(fù)合酶制劑品種。其中，甘露聚糖酶、木聚糖酶飼用,制劑占有較大的市場份額。另一方面，以甘露寡糖、木寡糖為代表的功能寡糖詞用微生態(tài)制劑也在飼料添加劑市場上得到應(yīng)用。公開的研究成果表明，生物酶作為一種高效的生物催化劑，有其顯著的專一性特點，不同的底物需要有不同的酶來催化分解。在我國廣泛使用的主要是豆粕、棉粕、菜粕等粕類飼料，這些詞料中含有大量的木聚糖、甘露聚糖等非淀粉多糖(NSP)。這些NSP在動物營養(yǎng)學(xué)中被稱之為抗營養(yǎng)因子，不僅難以被消化利用，還容易導(dǎo)致畜禽腸道中食糜粘度過高，降低了飼料的利用率。如果以物理或化學(xué)方法降解或除去之，難度大且代價高，而用相應(yīng)的生物酶制劑進行解除，是最經(jīng)濟和有效的辦法。甘露聚糖酶、木寡糖酶均屬于NSP酶，具有共同的特點①有效地增強體內(nèi)雙歧因子效果，促進粕類飼料中的甘露聚糖、木寡糖等的分解、消化，改善動物腸道的微生態(tài)環(huán)境，提高體內(nèi)能量代謝水平；②消除NSP抗營養(yǎng)因子對消化吸收的不良影響，降低食糜粘性，加強內(nèi)源酶的有效作用，增加十二指腸對氨基酸和葡萄糖的吸收，提高飼料的營養(yǎng)利用率；③促進生長激素的分泌，增加瘦肉率和瘦肉組織面積，增強機體抵抗力；降低畜禽的過渡免疫反應(yīng)，改善畜禽健康和提高畜禽生產(chǎn)能力。經(jīng)濟和飼喂效率高的飼料是養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)的關(guān)鍵。從經(jīng)濟和營養(yǎng)學(xué)的角度看，飼料技術(shù)的發(fā)展客觀上要求飼料來源更加廣泛，這要求畜禽的消化能力應(yīng)與之有很好地匹配才能發(fā)揮相應(yīng)的作用。但事實并非如此，畜禽的消化適應(yīng)能力總是不足。針對這一問題，人們開發(fā)了飼用生物復(fù)合酶，根據(jù)畜禽的消化生理特點，用添加外源酶的方法，將不同來源的日糧飼料調(diào)配成基本統(tǒng)一的適合畜禽消化吸收的高效飼料。現(xiàn)有的酶制劑中，被廣泛使用于飼料生物酶主要有半乳糖苷酶，有效分解餅粕飼料中含有的a-半乳糖苷鍵脹氣因子，提高豆粕的飼料利用率；酸性蛋白酶，用于提高飼料蛋白的消化；纖維素酶，可以水解飼料中的天然纖維素。公開的研究成果也顯示，功能寡糖擁有突出的生物學(xué)功效①具有雙歧因子功效，優(yōu)化腸道微生態(tài)系，參與雙歧桿菌的生長調(diào)節(jié)及粘附等作用，抑制腸道雜菌的滋生，對宿主起到有益保健的作用；②識別病原菌，阻礙病原菌與腸黏膜的粘附，通過其非消化性，將排除體外；③具有一定的免疫原性，能夠刺激機體免疫應(yīng)答，增強巨噬細胞的吞噬能力。功能寡糖做為抗生素的替代品，已經(jīng)得到了飼料業(yè)的廣泛認可。眾所周知，長期詞喂抗生素能引起細菌耐藥性增加，容易造成動tf性食品抗生素殘留等副作用，對人體健康與食品安全構(gòu)成威脅。公眾社會正在逐步采取嚴厲的措施，禁止使用抗生素作為飼料添加劑，同時對動物性食品中抗生素殘留的要求也越來越嚴格。消除抗生素殘留己經(jīng)成為飼料加工行業(yè)面臨的一個十分緊迫的現(xiàn)實，是關(guān)系到企業(yè)生存的重大問題。目前的國內(nèi)外市場上，飼用生物酶添加劑和具有抗生素替代功能的詞用徼生態(tài)添加劑均為相互獨立的產(chǎn)品，效果單-一，價格昂貴。其市場份額基本上為少數(shù)國外品牌產(chǎn)品所壟斷。但是，目前市場上還沒有兼具有飼用生物酶制劑和飼用微生態(tài)制劑特點的、廉價高效、無殘留安全型復(fù)合詞料添加劑產(chǎn)品。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，提供一種兼具有飼用生物酶制劑和飼用微生態(tài)制劑特點的、可消除粕類飼料中的NSP抗營養(yǎng)因子并替代抗生素的、高效安全、無殘留的生物酶微生態(tài)復(fù)合飼料添加劑。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)以NSP酶為主要酶系，酸性蛋白酶、纖維素酶為輔助酶系，配以具有抗生素功效的功能寡糖微生態(tài)制劑。本發(fā)明所采用的NSP酶包括有甘露聚糖酶、木聚糖酶、半乳糖苷酶；所采用的功能寡糖微生態(tài)制劑為甘露寡糖或木寡糖。本發(fā)朋中，各種成分的比例如下P-甘露聚糖酶活性300060000IU/mL、木聚糖酶活性2000100000IU/mL、半乳糖苷酶活性10010000IU/mL、酸性蛋白酶活性1001000IU/mL、纖維素酶活性50300IU/mL，并在此基礎(chǔ)上添加0.010.8%(w/w)的甘露寡糖或者0.010.8%(w/w)的木寡糖。特別是采用如下的優(yōu)化成分比例p-甘露聚糖酶活性100001U/mL、木聚糖酶活性60000IU/mL、半乳糖苷酶活性300IU/mL、酸性蛋白酶活性400IU/mL、纖維素酶活性50300IU/mL和甘露寡糖0.03%(w/w)或者木寡糖0.07%(w/w)。本發(fā)明所采用的生物酶與功能寡糖可以是液體制劑，也可以是固體制劑。與現(xiàn)有的產(chǎn)品相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點①具有飼用生物酶制劑的特點可提供動物體內(nèi)所沒有的酸性蛋白酶、纖維素酶等外源性酶，添加到飼料中，對于不同年齡的畜禽均有明顯的促消化、吸收作用。②具有飼用微生態(tài)制劑特點的通過NSP酶系的作用，分解粕類飼料中的NSP，消除其抗營養(yǎng)因子作用，提高飼料的能量吸收和營養(yǎng)代謝水平。③具有符合生物酶的特性同時含有一種以上的生物酶，改變了以往生物外源性酶單一的弊端，可充分利用酶的協(xié)同作用，顯著提高詞料的營養(yǎng)價值和利用率，使得飼料原料的適用范圍更加廣泛。替代抗生素以往的飼用微生態(tài)制劑是使用單一的NSP酶，利用酶降解NSP產(chǎn)生寡糖。這就要求NSP酶進入機體后，必須維持較高的活性，才能產(chǎn)生抗生素的替代作用。而酶的活性又往往受到多種因素的制約。本發(fā)明直接添加功能寡糖，與NSP酶系協(xié)同作用，能迅速發(fā)揮功能寡糖的雙歧因子作用，起到抗生素替代品的效果。實施例下面結(jié)合實施例，對本發(fā)明作進一步說明。實施例的具體描述，對本發(fā)明的范圍不構(gòu)成任何限制。實施例l復(fù)合飼料添加劑制備一種復(fù)合飼料添加劑，它包含以下成分P-甘露聚糖酶活性10000IU/mL、木聚糖酶活性60000IU/mL、半乳糖苷酶活性300IU/mL、酸性蛋白酶活性400IU/mL、纖維素酶活性100IU/mL和甘露寡糖0.03%(w/w)。其制備工藝如下取卩-甘露聚糖酶、木聚糖酶、半乳糖苷酶、酸性蛋白酶、纖維素酶的液體制劑，分別經(jīng)酶活檢測、配液、復(fù)配后，得到復(fù)合酶制劑，備用。再取甘露寡糖固體制劑，用符合純化水調(diào)配后，按照0.03%(w/w)的最終比例與上述復(fù)合酶制劑進行復(fù)配，得到如上所述成分配比的復(fù)合詞料添加劑。采用上述方法得到的復(fù)合飼料添加劑，可達到以下指標固體型感官指標黃褐色細小粉粒，無結(jié)塊衛(wèi)生指標大腸桿菌固體酶沙門氏菌陰性鉛小于等于30mg/kg無機砷小于等于10mg/kg本發(fā)明產(chǎn)品的適宜pH為4.08.0，最適pH為6.0。適宜溫度為15。C6(TC。70°C、5min條件下，復(fù)合酶制劑的活性下降幅度小于20%，適用于飼料制粒過程中的瞬間造粒工藝。液體型棕褐色液體小于30CUF/mL陰性實施例2復(fù)合飼料添加劑制備一種復(fù)合詞料添加劑，它包含以下成分p-甘露聚糖酶活性10000IU/mL、木聚糖酶活性60000IU/mL、半乳糖苷酶活性300IU/mL、酸性蛋白酶活性400IU/mL、纖維素酶活性100IU/mL和木寡糖0.07%(w/w)。其制備工藝如下取P-甘露聚糖酶、木聚糖酶、半乳糖苷酶、酸性蛋白酶、纖維素酶的液體制劑，分別經(jīng)酶活檢測、配液、復(fù)配后，得到復(fù)合酶制劑，備用。再取木寡糖液體制劑，按照0.07%(w/w)的最終比例與上述復(fù)合酶制劑進行復(fù)配，得到如上所述成分配比的復(fù)合飼料添加劑。實施例3復(fù)合飼料添加劑制備一種復(fù)合詞料添加劑，它包含以下成分P-甘露聚糖酶活性8000IU/mL、木聚糖酶活性20000IU/mL、半乳糖苷酶活性200IU/mL、酸性蛋白酶活性400IU/mL、纖維素酶活性100IU/mL和甘露寡糖0.07%(w/w)。取上述各種酶制劑，按前述工藝制得復(fù)合酶制劑后，再取甘露寡糖液體制劑，按照0.07%(w/w)的最終比例與上述復(fù)合酶制劑進行復(fù)配，得到如上所述成分配比的復(fù)合飼料添加劑。實施例4復(fù)合飼料添加劑在肉鴨飼料中的應(yīng)用取初生2日齡的商品代雛鴨1800只，隨機分成6組，每組300只，其中4組為試驗組，4組為對照組。兩組均采用中國農(nóng)墾進出口公司提供肉鴨飼料，進行隔離飼養(yǎng)。試驗組添加0.05%(w/w)的本發(fā)明產(chǎn)品，對照組不添加。按常規(guī)進行飼養(yǎng)管理，每兩周稱重一次，比較兩組肉鴨的增重和耗料情況。試驗結(jié)果顯示(表l、表2)，試驗組增重明顯多于對照組，平均增重率超過8%;6周齡時，試驗組的料肉比由對照組的2.78降為2.59，飼料報酬明顯占優(yōu)。并且由于試驗組增重較快，比對照組提前23天達到上市標準。表l試驗組與對照組肉鴨體重(單位g)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2試驗組與對照組肉鴨耗料及料肉比(單位g)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實施例5復(fù)合飼料添加劑對肉雞腸道微生物的影響試驗選取體重基本一致的健康肉雞1000只，按每組200只隨機分為6組，第1組為對照(只飼喂基礎(chǔ)日糧)，第2組在基礎(chǔ)日糧中添加4mg/kg黃霉素、第3、4、5組分別添加不同劑量的本發(fā)明產(chǎn)品(0.5g/kg、1.0g/kg、1.5g/kg)。從ll日齡開始，飼喂至上市。試驗的最后l天，每組隨機取5只體重適中的健康肉雞進行屠宰，立即剖腹，取盲、回腸各一段，檢測各腸段內(nèi)容物中大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌和沙門氏菌的含量。結(jié)果顯示(表3)，盲腸和回腸中的雙歧桿菌數(shù)量有明顯提高(p<0.05),乳酸桿菌增殖效果也有不同程度的提高，大腸桿菌數(shù)量沒有明顯差異；各組均未檢測出沙門氏菌。結(jié)果說明，本發(fā)明產(chǎn)品有效改善了肉鴨腸道的微生態(tài)系。表3甘露寡糖對肉雞腸道微生物的影響(單位lg《FU/g)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實施例6復(fù)合飼料添加劑對肉雞免疫機能的影響試驗試驗的分組與飼喂管理與前相同。11日齡滴鼻點眼接種新城疫疫苗，22日齡每組隨機抽取8只，翅靜脈無菌采血2mL，分離血清。采用紅細胞凝集試驗和紅細胞凝集抑制試驗96U形板反應(yīng)法測定抗體效價。采用A-醋酸萘酯(ANAE)染色法測定T淋巴細胞。試驗結(jié)束時，每組隨機抽取3只肉雞，翅靜脈無菌采血，采用BaclcmanAiray-360全自動特定蛋白與藥物分析系統(tǒng)，用速率散射免疫比濁法測定血清中IgA、IgG、IgM的含量。結(jié)果(表4)顯示，添加本發(fā)明產(chǎn)品后，新城疫抗體效價、T淋巴細胞含量、IgA、IgG和JEgM含量均明顯提高，表明本發(fā)明產(chǎn)品能有效提高肉雞的細胞免疫和體液免疫能力。表4甘露寡糖對肉雞免疫系統(tǒng)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>權(quán)利要求1.一種高效生物酶微生態(tài)復(fù)合飼料添加劑，其特征在于這種復(fù)合飼料添加劑的組成是以NSP酶為主要酶系，酸性蛋白酶、纖維素酶為輔助酶系，配以具有抗生素功效的功能寡糖微生態(tài)制劑。2.如權(quán)利要求1所述，其特征在于所述的NSP酶系為甘露聚糖酶、木聚糖酶、半乳糖苷酶o3.如權(quán)利要求1所述，其特征在于所述的功能寡糖微生態(tài)制劑為甘露寡糖或木寡糖。4.如權(quán)利要求l、2、3所述，其特征在于所述的復(fù)合飼料添加劑包含有如下成分P-甘露聚糖酶活性300060000IU/mL、木聚糖酶活性2000100000IU/mL、半乳糖苷酶活性10010000IU/mL、酸性蛋白酶活性1001000IU/mL、纖維素酶活性50300IU/mL和甘露寡糖0.010.8%(w/w)。5.如權(quán)利要求l、2、3所述，其特征在于所述的復(fù)合飼料添加劑包含有如下成分p-甘露聚糖酶活性300060000IU/mL、木聚糖酶活性2000100000IU/mL、半乳糖苷酶活性10010000IU/mL、酸性蛋白酶活性1001000RJ/mL、纖維素酶活性50300IU/mL和木寡糖0.010.8%(w/w)。6.如權(quán)利要求4所述，其特征在于所述的復(fù)合飼料添加劑包含有如下優(yōu)化成分P-甘露聚糖酶活性10000IU/mL、木聚糖酶活性60000IU/mL、半乳糖苷酶活性300IU/mL、酸性蛋白酶活性400IU/mL、纖維素酶活性100IU/mL和甘露寡糖0.03%(w/w)。7.如權(quán)利要求5所述，其特征在于所述的復(fù)合飼料添加劑包含有如下優(yōu)化成分卩-甘露聚糖酶活性10000IU/mL、木聚糖酶活性60000IU/mL、半乳糖苷酶活性300IU/mL、酸性蛋白酶活性400IU/mL、纖維素酶活性100IU/mL和木寡糖0.07%(w/w)。全文摘要本發(fā)明涉及一種高效生物酶微生態(tài)復(fù)合飼料添加劑，所涉及的飼料添加劑以NSP酶為主要酶系，酸性蛋白酶、纖維素酶為輔助酶系，配以具有抗生素功效的功能寡糖微生態(tài)制劑。特別包含以下成分β-甘露聚糖酶、木聚糖酶、酸性蛋白酶、纖維素酶，以及甘露寡糖和木寡糖。這種復(fù)合飼料添加劑具有高效、安全、無殘留的特點，可消除粕類飼料中的NSP抗營養(yǎng)因子并替代抗生素，提高飼料利用率和動物免疫力，降低腹瀉率。文檔編號A23K1/165GK101133779SQ20061003741公開日2008年3月5日申請日期2006年9月1日優(yōu)先權(quán)日2006年9月1日發(fā)明者劉煥明,吳道貧,王玉亭申請人:廣州伯凱生物技術(shù)有限公司