專利名稱：含有腐植酸分解菌的復(fù)合微生物肥料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有腐植酸分解菌的復(fù)合微生物肥料，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
分化煤、褐煤和草炭是木本或草本植物的殘?bào)w經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期分化而形成的腐植酸類物質(zhì)，腐植酸不僅用于石油開采、陶瓷工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域，而且在農(nóng)業(yè)上具有廣泛的應(yīng)用前景。
腐植酸是土壤物理結(jié)構(gòu)的基本材料，可用于改良土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)；增強(qiáng)土壤的保水、保肥能力。小分子的腐植酸具有強(qiáng)烈的生理功能，可促進(jìn)作物根系生長(zhǎng)發(fā)育；提高作物抗旱能力；特別是降低葉片的蒸騰作用。目前對(duì)分化煤的開發(fā)利用很有限，其主要原因是分化煤中的腐植酸活性很低，并與鈣、鎂、鐵、鋁等結(jié)合而不溶于水，直接應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的效果差異性很大。
在現(xiàn)有的微生物肥料中，草炭或分化煤僅為吸附微生物的載體，而其中的腐植酸沒(méi)有經(jīng)過(guò)活化，無(wú)法起到改良土壤和促進(jìn)作物生長(zhǎng)的作用。這樣不僅造成了資源浪費(fèi)而且影響了微生物肥料應(yīng)用效果。因此，如何充分利用腐植酸(活化或稱降解腐植酸)成為本發(fā)明的目的。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明概述本發(fā)明是利用有益微生物的生物降解原理，通過(guò)對(duì)多種微生物的篩選和降解效果試驗(yàn)，篩選出一種能通過(guò)降解腐植酸而提高其水溶性的枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis(Ehrenberg)Cohn，)。實(shí)驗(yàn)表明將該菌種應(yīng)用于現(xiàn)有的微生物肥料中，除增加了微生物肥料的肥效外，還改良了土壤和充分利用了資源。
技術(shù)方案本發(fā)明所說(shuō)的復(fù)合微生物肥料，其主要由復(fù)合微生物菌劑、草炭或分化煤和無(wú)機(jī)添加物組成，其特征在于，所說(shuō)的復(fù)合微生物菌劑由枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis(Ehrenberg)Cohn，)菌劑、巨大芽孢桿菌(Bacillus megatherium de Bary)菌劑與凍樣芽孢桿菌(Bacillas mueilagimosus Krassilmikov)菌劑復(fù)合而成。
推薦的復(fù)合微生物肥料包括如下組分及含量(其中含量以重量百分比計(jì))復(fù)合微生物菌劑5～15％草炭或分化煤 40～60％無(wú)機(jī)添加物25～55％所說(shuō)的復(fù)合微生物菌劑由枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn，)經(jīng)過(guò)三級(jí)發(fā)酵制成微生物菌劑與巨大芽孢桿菌(Bacillus megatherium de Bary)和凍樣芽孢桿菌(Bacillas mueilagimosus Krassilmikov)菌劑復(fù)合而成。所說(shuō)的枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌菌劑、凍樣芽孢桿菌菌劑均為市售品。所說(shuō)的無(wú)機(jī)添加物為氮、磷、鉀無(wú)機(jī)養(yǎng)分，硫酸鎂或/和硫酸鋅，也為市售品。
在所說(shuō)的復(fù)合微生物菌劑中以枯草芽孢桿菌菌劑為30(wt)％、巨大芽孢桿菌菌劑為40(wt)％和凍樣芽孢桿菌菌劑為30(wt)％為宜。
所說(shuō)的枯草芽孢桿菌菌劑的制備方法包括如下步驟1、斜面擴(kuò)大培養(yǎng)取復(fù)篩斜面種子一支，將培養(yǎng)基與菌苔一起攪碎接種到三角瓶的液體培養(yǎng)基中，在32℃、180轉(zhuǎn)/分的搖床下培養(yǎng)20h左右；2、一級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)將擴(kuò)大培養(yǎng)的菌液接種于二級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)瓶中，放在大搖床32℃、180轉(zhuǎn)/分培養(yǎng)17h；3、二級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)按1％的接種量將一級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)液接種到種子罐，在風(fēng)比為1∶1，罐壓1.0Mpa，溫度為32±2℃，發(fā)酵罐培養(yǎng)時(shí)間為10小時(shí)；4、三級(jí)發(fā)酵培養(yǎng)將發(fā)酵好的種子液的2％接入發(fā)酵罐，接種后的種子和發(fā)酵罐通風(fēng)比1∶1，罐壓1.0Mpa，溫度32±2℃條件下進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)酵罐培養(yǎng)時(shí)間為20小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束發(fā)酵罐活菌平板計(jì)數(shù)為40億個(gè)/ml；5、吸附用滅過(guò)菌的草炭載體吸附制成枯草芽孢桿菌菌劑。
本發(fā)明中所說(shuō)的復(fù)合微生物肥料是這樣制備的將復(fù)合微生物菌劑、草炭或分化煤及無(wú)機(jī)添加物按上述比例經(jīng)混合、粉碎及造粒后制成。其使用方法是在作物種植時(shí)將復(fù)合微生物肥料施在根層土壤中，可采用溝施和穴施的施肥方法，用量為60～80公斤/畝。
本發(fā)明公開了一種多功能復(fù)合微生物肥料，其由枯草芽孢桿菌與其它菌種復(fù)合成復(fù)合微生物菌劑，復(fù)合微生物菌劑再與草炭或分化煤、無(wú)機(jī)添加物復(fù)合而成。與現(xiàn)有的微生物肥料相比，本發(fā)明所說(shuō)的多功能復(fù)合微生物肥料除具有現(xiàn)有微生物肥料的作用外，其中含有的腐植酸分解菌能降解草炭和分化煤中的腐植酸，從而增加了微生物肥料的肥效，使其促進(jìn)作物生長(zhǎng)、提高作物產(chǎn)量及改良土壤等優(yōu)點(diǎn)更為明顯。


圖1為培養(yǎng)物上清液在紫外區(qū)的吸收曲線圖具體實(shí)施方式
下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明，其目的是更好理解本發(fā)明的內(nèi)容。因此，所舉之例并不影響本發(fā)明的保護(hù)范圍實(shí)施例1在枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn，由中國(guó)農(nóng)科院菌種保藏中心提供)覆蓋的培養(yǎng)基(培養(yǎng)基為牛肉膏培養(yǎng)基牛肉膏5克；氯化鈉5克；蛋白胨5克；瓊脂10g；水1000ml；pH7.5～7.7)表面上加入分化煤，培養(yǎng)1天就出現(xiàn)被液化的黑色液株，2天后培養(yǎng)基全部變成褐色，吸收＞205nm紫外光的物質(zhì)大幅度提高(圖1)，分化煤的失重率為32.6％，這說(shuō)明通過(guò)微生物的降解作用提高了腐植酸的水溶性。
實(shí)施例21、復(fù)合微生物肥料的制備按重量比例復(fù)合微生物菌劑10％，草炭60％，氮磷鉀無(wú)機(jī)養(yǎng)分20％(折純養(yǎng)分10％)硫酸鎂和硫酸鋅10％，將這些原材料充分混合后造粒制成復(fù)合微生物肥料，其主要技術(shù)指標(biāo)為有效活菌數(shù)≥2×107個(gè)/克，總養(yǎng)分≥10％。
2、復(fù)合微生物肥料的應(yīng)用開溝10～20cm，將復(fù)合微生物肥料施在溝內(nèi)，然后覆土起垅移苗，澆水。
大白菜田間小區(qū)試驗(yàn)本試驗(yàn)設(shè)2個(gè)處理，每個(gè)處理3次重復(fù)；供試小區(qū)面積20m2，隨機(jī)區(qū)組排列；產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)用新復(fù)極差法分析A施沒(méi)有腐植酸分解菌的復(fù)合微生物肥料80Kg/畝；
B施含有腐植酸分解菌的功能性復(fù)合微生物肥料80Kg/畝。
試驗(yàn)結(jié)果表1對(duì)大白菜生長(zhǎng)的影響

從表1可以看出，施用含有腐植酸分解菌的功能性復(fù)合微生物肥料，能夠有效促進(jìn)大白菜的生長(zhǎng)，株高增加2.5cm，球高增加1.9cm，橫徑增加1.4cm。
表2對(duì)大白菜產(chǎn)量的影響

表2結(jié)果看出大白菜施用含有腐植酸分解菌的功能性復(fù)合微生物肥料比沒(méi)有腐植酸分解菌的復(fù)合微生物肥料的增產(chǎn)效果達(dá)到17.5％，達(dá)到了極顯著水平。
權(quán)利要求
1.一種含有腐植酸分解菌的復(fù)合微生物肥料，其主要由復(fù)合微生物菌劑、草炭或分化煤和無(wú)機(jī)添加物組成，其特征在于，所說(shuō)的復(fù)合微生物菌劑由枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn，)菌劑、巨大芽孢桿菌(Bacillusmegatherium de Bary)菌劑與凍樣芽孢桿菌(Bacillas mueilagimosusKrassilmikov)菌劑復(fù)合而成。
2.如權(quán)利要求1所說(shuō)復(fù)合微生物肥料，其特征在于，其中在所說(shuō)的復(fù)合微生物菌劑中枯草芽孢桿菌菌劑為30重量％、巨大芽孢桿菌劑為40重量％、凍樣芽孢桿菌劑為30重量％。
3.如權(quán)利要求1或2所說(shuō)復(fù)合微生物肥料，其特征在于，所說(shuō)的復(fù)合微生物肥料包括如下組分及含量，所說(shuō)的含量以重量百分比計(jì)復(fù)合微生物菌劑 5～15％草炭或分化煤 40～60％無(wú)機(jī)添加物 25～55％其中所說(shuō)的復(fù)合微生物菌劑由枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn，)菌劑、圓褐固氮菌(Azotobacter chroococcum Beijerinck)菌劑、巨大芽孢桿菌(Bacillus megatherium de Bary)菌劑和凍樣芽孢桿菌(Bacillasmueilagimosus Krassilmikov)菌劑復(fù)合而成；所說(shuō)的無(wú)機(jī)添加物為氮、磷、鉀無(wú)機(jī)養(yǎng)分，硫酸鎂或/和硫酸鋅。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含有腐植酸分解菌的復(fù)合微生物肥料，其由枯草芽孢桿菌與其它菌種復(fù)合成復(fù)合微生物菌劑，復(fù)合微生物菌劑再與草炭或分化煤、無(wú)機(jī)添加物復(fù)合而成。與現(xiàn)有的微生物肥料相比，本發(fā)明所說(shuō)的復(fù)合微生物肥料除具有現(xiàn)有微生物肥料的作用外，其中含有的腐植酸分解菌能降解草炭和分化煤中的腐植酸，從而增加了微生物肥料的肥效，使其促進(jìn)作物生長(zhǎng)、提高作物產(chǎn)量及改良土壤等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C05F11/02GK1587218SQ20041005266
公開日2005年3月2日 申請(qǐng)日期2004年7月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月9日
發(fā)明者閻龍翔, 賈小紅, 魯劍魏, 曹衛(wèi)東, 李香貞 申請(qǐng)人:上海綠樂(lè)生物科技有限公司